药用真菌桑黄的研究进展Word文件下载.docx

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刘波等在第一版的《中国药用真菌》将桑黄命名为Phellinus

igniarius（Berk.&

中文名称是“火木层孔菌”;

应建浙等在《中国药用真菌图鉴》中称之为裂蹄针层孔菌。

进入21世纪后,在传统分类的基础上,分子生物学中的新技术接踵引入到桑黄类群的系统发育与分类鉴定中,Wagner等通过度子和形态学研究,将Phellinus属的部份种划入Inonotussensustricto类群。

随后,Jeong等否定了Wagner对Inonotus.的划分观点,并将该类群划分为Phellinuslinteuscomplex和Inonotussubclade;

Lim等对中国、韩国、哥斯达黎加和墨西哥和标本进行形态学研究,并总结和种间区分特点;

《中国真菌志锈革孔菌科》中记载,目前国内能够称为桑黄的有两种:

和。

但是,Sell等以为是一个复合种,普遍散布在温带地域的阔叶树树木上,欧洲至少发觉12个种。

2桑黄属真菌的要紧性状

形态特点

担子果连年生,通常具菌盖,有时平伏反转,菌盖蹄形、贝壳形或半圆形,菌盖表面暗棕色、深褐色至灰黑色,新鲜时木栓质,后期硬木质;

被绒毛或滑腻无毛,成熟时常有径向的开裂;

孔口表面黄色、黄褐色至深棕色,菌肉同质或异质;

菌丝系统二体系,生殖菌丝简单分隔,无锁状联合;

子实层中通常有锥形刚毛存在,部份种类存在结晶。

担孢子椭圆形至近球形,淡黄色至深黄色,稍厚壁,滑腻,成熟的担孢子在Melzer试剂中无变色反映,在棉蓝试剂中无嗜蓝或有弱嗜蓝反映。

地理散布

迄今为止,世界范围内的桑黄类群有12个种,要紧生长在温带、热带及亚热带地域,被子植物的活立木或倒树干上,部份种类的散布具有明显区域性和宿主植物专一性。

因此,孔口、担孢子、地理散布及寄主植物常作为该属真菌的分类依据。

3要紧的化学成份

桑黄尽管早已被人们熟知,可是,桑黄所对应的拉丁学名与所包括的种类多样性一直存在着争议与转变。

近些年,对“桑黄”药理学研究涉及的物种包括:

、、等。

那个地址,需要澄清的是,只散布在热带美洲,该种并非散布于东亚地域;

尽管与桑黄属真菌比较接近,但其担孢子存在明显不同,桑黄属担孢子为淡黄色至黄褐色,担孢子无色。

而且,在系统发育上二者关系较远。

由于从事桑黄菌化学成份与药理学研究的学者很难对桑黄的物种进行准确鉴定,因此,这些研究涉及的“桑黄”极可能包括了多个不同的物种,其中有一些种类并非是目前桑黄菌属的种类。

现代研究发觉“桑黄”含有多种化合物,如:

多糖、萜类、酚类、黄酮类等药理功效显著的物质。

多糖类

真菌多糖是由多个醛糖和（或）酮糖经糖苷键连接而成的一类高分子聚合物。

桑黄多聚糖类是其重要的药用成份,包括β-葡萄糖、蛋白多糖和酸性多聚糖等。

其中,β-（1,3）-葡萄糖因具有免疫调剂作用,被普遍用于多种疾病的医治。

桑黄多糖所含的单糖除葡萄糖外,包括半乳糖、甘露糖、果糖、木糖。

白日霞等用mol/LNAOH从子实体提取甘露聚糖,Song等采纳热水萃取菌丝体并纯化,取得糖类和多肽,质量分数别离为%和%,其中,糖醛酸占糖类的%。

窦茜茜等通过热水浸提法、离子互换层析等手腕,提取高纯度多糖PL-A及蛋白聚糖PL-B。

Ge等从子实体中分离纯化取得β-D-葡萄糖,分子质量为230kD,该多糖含有3种吡喃葡萄糖残基结构,别离是（1→3）-β-D-、（1→4）-β-D-和（1→3,6）-β-D-,其结构主链为→3）-β-D-Glcp-（1→3）-β-D-Glcp-（1→6）-β-D-Glcp（1→。

其中,以β-（1→3）-D葡萄糖为主连,C6上分支的多糖有较好的抗肿瘤活性。

黄酮类

莫顺燕等利用正相硅胶柱层析、反向HPLC等分离手腕从桑黄子实体第一次分离取得5种黄酮类和2个香豆类化合物,别离是柚皮素（4'

5,7-三羟基二氢黄酮）,樱花亭（4'

5-二羟基-7-甲氧基二氢黄酮）,二氢莰非素（4'

5,7-三羟基二氢黄酮醇）,7-甲氧基二氢莰非素（4,5-二羟基-7-甲氧基二氢黄酮醇）,北美圣草素（3'

4'

5,7-四羟基二氢黄酮）,香豆素（苯并吡喃-2-酮）及莨菪亭（7-羟基-6-甲氧基苯并吡喃-2-酮）。

吴永生对天然野生桑黄和人工培育桑黄95%乙醇提取物进行了化学成份研究,共分离取得57个化合物,从天然桑黄中分离鉴定了50个化合物,其中11个新化合物,包括4个新苄基二氢黄酮。

吡喃酮类及其他成份

Park等从代谢产物中分离取得hispidin。

Hispidin也称为牛奶树碱,其化学结构为6-[（1E）-2-（3,4-二羟基苯基）乙烯基]-4-羟基-2H-吡喃-2-酮。

随后,研究发觉该物质具有清除DPPH自由基和超氧化物阴离子自由基的活性。

Lee等从提取分离到咖啡酸、4-（3,4-二羟苯基）-3-丁烯-2-酮、（2E,4E）-（+）-4'

-γ-ionylideneacetic、（2E,4E）-γ-ionylideneacetic、phellilaneH、inotilone。

Hwang等从分离取得5种多酚类化合物,别离是hispidin、hypholomineB、纤孔菌素A（inoscavin）、davallialactone和phelligridinD。

Lee等从中提取到苯乙烯吡喃酮baumin。

现代研究说明,苯乙烯吡喃酮类化合物被以为与植物中的黄酮类化合物具有相似的作用,具有很强的抗氧化、抗炎、抗血小板聚集等药用特性。

另外,桑黄含有的hispolon、原儿茶酸具有良好的雌激素样作用,可能与医治血崩、闭经等作用相关。

4药理作用

抗肿瘤能力

对桑黄多糖抗肿瘤作用研究报导陆续增加,目前,一样以为桑黄多糖通过诱导特异性免疫应答提高宿主免疫功能是其抗肿瘤的要紧机制。

同时,桑黄含有的蛋白多糖还能够通过Toll样受体（Toll-likereceptors,TLR）2和4,调剂小鼠骨髓树突状细胞（DCs）及要紧组织相容性复合物（majorhistocompatibilitycomplex,MHC）等物质的表达,阻碍DC的抗原呈递功能,进一步增强非特异性免疫应答,从而起到抗肿瘤的成效。

另外,Li等通过热水萃取菌丝培育基,取得PLPS-1和PLPS-2两种新型多糖,体外抗肿瘤实验结果显示,PLPS-1诱导细胞凋亡有效抑制S-180肉瘤细胞。

体内实验也说明,多糖活化半胱氨酸蛋白酶-3,介导小鼠体内前列腺癌细胞的凋亡。

由此可见,与传统化学药物比较,桑黄多糖作为一种天然产物,毒副作用小并具有壮大的抗肿瘤抑制活性,具有潜在的药用价值。

除桑黄多糖外,桑黄含有hispidin与其特有衍生物hispolon均具有很强的抗氧化、抗癌、降糖等成效,对多种疾病,如黑色素瘤、白血病、胃癌、乳腺癌、结肠癌等有明显疗效。

Zhao研究发觉,hispidin能通过抑制ROS/p-ERK/Slug/E-cadherin这一通路,最终表现为细胞间的粘附能力增加,抑制乳腺癌细胞的转移。

Hispolon能通过诱导胃癌细胞发生一种特殊的活性氧自由基（ROS）介导的线粒体途径的凋亡,最终,起到抗肿瘤的作用,hispolon还能调控雌激素受体α转录和特定蛋白表达途径,抑制MCF7、T47D乳腺癌细胞增值。

吴永生等从野生提取多酚类化合物,对其进行核转录因子活性检测,发觉桑黄多酚类化合物对核转录因子NF-кB活性有抑制作用,且具有浓度依托性。

另外,桑黄多酚类成份不但能抑制非竞争性H1N一、H5N1和H3N2神经氨酸酶活性,还可有效抑制病毒诱导牛肾细胞病变（CPE）。

另外,桑黄发酵液含有的酶类物质也起到抑制肿瘤的功效。

Sun等从Inonotusbaumii发酵液分离到由单体蛋白组成的胞外漆酶（IBL）,分子质量为66kD,进一步测定纯化漆酶抗癌活性,发觉IBL能够抑制肝癌细胞株Hep

G2及小鼠淋巴细胞白血病细胞株L1210的增生。

这些结果对进一步研究开发桑黄多酚类及酶类抗肿瘤药物提供新的思路。

免疫作用

桑黄多糖不但具有增强巨噬细胞、B细胞、天然杀伤细胞等免疫细胞活性的功效,还能增强T细胞非依托性抗原和三硝基苯基脂多糖抗原性,诱导淋巴细胞发生特异性免疫反映。

同时,多糖对细胞色素P450家族（CYP1A1,CYP1A2,CYP2B1,CYP2E1）也具有显著的抑制作用。

另外,Kim等研究发觉桑黄酸性多糖（acidicpolysaccharide）通度日化腹膜巨噬细胞诱导细胞免疫抑制黑色素瘤细胞B16增加,同时上调一氧化氮（NO）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）介导淋巴细胞（Yac-1cells）毒性反映,启动特异性免疫应答。

降糖能力

胰岛素是由胰岛β细胞分泌的一种蛋白激素,平稳机体糖分和脂质的代谢。

胰岛β细胞受损会降低胰岛素的分泌,进而引发糖尿病。

现代研究发觉真菌中的多糖具有良好的降糖成效,要紧通过阻碍糖代谢,调剂胰岛β细胞和增强胰岛素灵敏性等方面降低血糖水平并减缓糖尿病病症。

桑黄多糖可抑制α-葡萄糖苷酶活性,延缓碳水化合物分解速度,降低糖毒性,延缓糖尿病的进展。

Wang等发觉从Phellinusbaumii提取物,作用于链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病模型小鼠,发觉给药量达到400mg/kg时,血液中胰岛β细胞增加,糖化白蛋白水平降低,使胰岛素水平升高,从而证明提取物具有明显的降糖成效,这一结果说明降糖机制可能与其刺激胰岛素释放或减少胰岛素降解有关。

Cho等探讨了桑黄菌丝胞外多糖（PbEPS）的降糖机制,通过口服给药200mg/kg,医治周期52d后,与对照组相较,医治组小鼠体内血糖浓度降低32%,同时,小鼠体内游离的甘油三酯浓度也明显下降,进一步分析其作用机制,发觉EPS能上调小鼠脂肪细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR-γ）的mRNA表达水平,通度日化PPAR-γ发挥转录调控作用,从而阻碍脂质代谢途径,增强胰岛素灵敏性。

抗氧化

Phellinuslinteus热水提取液表现出较高的抗氧化活性,对DPPH具有必然清除能力,可用于风湿性关节炎等自身免疫疾病的医治。

另外,内高分子量PL-N多糖,通过测定体外抗氧化活性,结果说明经降解的低分子量多糖拥有更活跃的羟基自由基清除能力。

除此之外,桑黄多糖还能够螯合亚铁离子,达到降低铁离子浓度的成效。

另外,桑黄含有的酚类、黄酮类化合物也是要紧的抗氧化活性物质。

消炎抗菌

桑黄中（1→3,6）-β-D-多糖类物质可有效抑制RAW细胞分泌TNF-α,抑制炎症的发生,进一步研究发觉,该类多糖还可刺激细胞分泌白介素10（IL-10）,同时,下调白介素6（IL-6）的表达。

因此以为,桑黄多糖能够起到调剂IL-6与IL-10动态平稳的作用,二者在全身炎症反映综合征患者中有预警作用。

除此之外,含有hispidin是一种非竞争抑制剂,对脯氨酰寡肽酶（prolylendopeptidase）具有抑制作用,对α-分泌酶,丝氨酸蛋白酶如:

胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、弹性蛋白酶抑制作用不明显。

这些研究说明,桑黄在慢性炎症性疾病、肥胖、2型糖尿病、躁狂和抑郁症和老年痴呆医治可能具有减缓作用。

Phellinusbaumii乙酸乙酯提取物（PBEAE）能够降低CD3（T细胞）,CD19（B细胞）,CD4（辅助T细胞）,CD8（细胞毒性T细胞）,MHCII类/CD11c（抗原递呈细胞）,双阳性B220/CD23和CD3/CD69等相关免疫细胞的表达。

另外,还能抑制中性粒细胞Gr1CD11b在关节炎处的浸润,幸免对软骨关节的侵蚀;

同时,下调免疫球蛋白G,TNF-α,IL-1β

和IL-6在血清中的浓度,从而减缓炎症的阻碍。

综上所述,桑黄被以为在医治风湿性关节炎方面具有踊跃功效。

近期有研究发觉,PBEA一方面抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）合成青霉素结合蛋白（PBP2a）,且呈剂量依托性,另一方面协同β-内酰胺抗生素（新型青霉素和头孢唑啉）增强抗菌作用,从而医治MRSA感染的患者。

5人工培育

桑黄作为药用真菌具有较高的药用价值,而且具有悠长的利用历史,但由于天然子实体少,大量搜集还会对资源造成破坏,因此慢慢开展了一些关于桑黄菌丝体培育和人工栽培技术方面的研究,采纳固体培育、液体发酵、子实体人工栽培等方式取得药用活性物质。

固体培育

桑黄固体培育研究以菌丝生长量为指标,挑选最正确培育基组成成份、浓度配比、最适培育条件等。

雷萍等采纳组织分离法取得桑黄纯菌株,并进行了固体培育条件研究,结果说明:

最适温度为28℃;

最适pH为,最适碳源是葡萄糖,最适氮源是蛋白胨。

骆婷对桑黄最正确固体培育基成份和培育条件进行了挑选,取得碳源、氮源及其浓度的组合为:

葡萄糖3%,蛋白胨4%;

微量元素及其浓度组合为:

磷酸二氢钾%,硫酸镁%,硫酸铜%,复合维生素B%,维生素E%;

最适培育温度为25℃。

蒋宁等以桑黄菌丝体生物量、粗多糖和黄酮产量为指标,挑选最适固体培育基组合为:

玉米粉70%,豆粕28%,蔗糖2%,%,%,维生素%,料液比1∶

液体发酵

桑黄液体发酵的培育条件因种而异,采纳单因素实验和正交实验、响应面分析方式,对发酵液的营养条件和环境等因素进行优化,提高桑黄菌液生产菌丝体、胞内多糖及胞外多糖等活性物质产量。

方白玉等研究显示桑黄菌丝体培育基组合:

甘蔗渣17%,马铃薯9%,%,Mg%。

田雪梅对桑黄液体发酵培育及优化,挑选出8个相关因子别离为:

玉米粉,葡萄糖,蛋白胨,酵母抽提物,麸皮,KH2PO4,MgSO47H2O和发酵液起始PH。

进一步采纳4因素3水平的Box-Behnken设计法取得发酵培育基最正确条件:

玉米粉g/L,葡萄糖g/L,蛋白胨g/L,酵母抽提物g/L,麸皮g/L,g/L,MgSO47H2Og/L和PH。

振荡培育6d后,菌丝生物量达±

g/L,达优化前倍。

李朔以胞内多糖产量为指标,取得最优液体培育组合为:

黄豆粉,可溶性淀粉,PH和C/N为1∶1。

另外,产胞外多糖（EPS）的最正确培育基组合为:

蔗糖40g/L,玉米粉4g/L,KH2PO44mmol/L和PH7。

接种后恒温28℃,摇床转速160r/min,发酵8d后,EPS产量达g/L。

人工栽培

人工代料栽培是高效取得桑黄子实体的要紧途径。

在国外,日本和韩国桑黄的人工栽培研究较早,并取得庞大经济效益。

韩国学者采纳短原木大棚栽培桑黄和室外荫棚木段埋畦栽培桑黄的方式均取得成功。

国内对桑黄子实体栽培研究以有效成份的含量为导向,结合桑黄子实体产量,要紧集中在改良菌种栽培方式,操纵人工栽培条件和提高治理方法等方面。

杜萍等发觉,空气相对湿度对桑黄菇的生长速度及质量有专门大阻碍。

桑黄耳芽生长最适的空气相对湿度为85%~95%,生长20d后,相对空气湿度调整为95%更有利于桑黄子实体的生长。

Zhang等别离以桑树枝、混合木屑和上述二者等量混合物为基质培育Phellinusbaumii,进一步测定子实体多糖的抗氧化活性,实验结果说明,以等量桑树枝和木屑的混合物为基质培育,可提高子实体多糖的抗氧化性能。

俞忠明等研究结果显示,不同生长期桑黄中的总多糖、呋喃酮InoscavinA含量有必然不同,二者在搜集时刻内转变趋势大体一致,均以出菇22d搜集的样本含量最高。

而多酚HypholomineB在出菇53d搜集样本含量达最高值。

这一结果说明究人工栽培桑黄不同生长期其要紧成份含量存不同,因此,在实际生产中应结合具体生产需求,有针对性的分派栽培时刻,合理操纵采摘周期。

6存在的问题及展望

“桑黄”作为重要的药用真菌资源,受到愈来愈多的关注,具有良好的药用价值和广漠的市场前景。

随着各方面研究的深切,人们将会更好的熟悉、研究、爱惜、开发和利用这些资源,为人类健康作出奉献。

可是,目前的研究开发中还存在很多问题亟待解决。

第一,桑黄类群许多种类的拉丁名称利用混乱,有的研究者利用的是过去的名称或同物异名,依照最新的分类系统,这些名称已经再也不利用;

还有的研究者把全然不属于桑黄类群的真菌作为桑黄来研究和报导。

这些现象为后续的研究和交流带来诸多不便。

因此,标准利用正确的桑黄类群真菌拉丁名称显得尤其重要。

第二,目前关于桑黄类群的药理作用和药用价值研究还不够深切,制约了桑黄作为药用真菌资源的开发利用,因此,增强对桑黄类群真菌活性成份、药用价值的研究开发及利用将成为以后的研究热点。

第三,桑黄类群真菌由于受生理生态的特殊性和复杂性和外部环境条件的制约,在自然界中形成的可供药用的天然子实体超级稀少,该类真菌的野生资源愈来愈少,因此对该类野生真菌资源的爱惜应该引发人们的重视。

第四,目前尽管有一些关于桑黄人工栽培成功的报导,但关于桑黄类群真菌的人工栽培技术还不完全成熟,有必要继续开展桑黄真菌的生物学特性、优良菌株选育、栽培技术等方面的深切研究。

相对而言,日本和韩国关于桑黄类群真菌的药用价值研究更为深切,相关产品也已经在市场出售。

中国所拥有的桑黄类群真菌资源比日本和韩国更为丰硕,应用历史也更久远。

因此,中国应增强桑黄的基础研究和应用研究,争取能有更多的产品投入利用,为人类造福。

塔里木大学校训——自强不息求真务实

大型真菌识别与开发

班级食科19-2

姓名李鹏飞

学号17