电泳相关溶液配制Word格式文档下载.docx
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N-N亚甲基双丙烯酰胺
8
纯水
ml
定容至1000
1.将丙烯酰胺和N-N亚甲基双丙烯酰胺置于1L烧杯中。
2.向烧杯中加入约600ml的去离子水，于40℃左右水浴加热，并用玻璃棒搅拌至完全溶解。
3.加水将溶液定容至1L，用0.45μm滤膜滤去杂质。
4．观察溶液上层有无漂浮物，有□、无□：
下层有无沉淀，有□、无□；
（Istherefloatingsubstance?
onthesurfaceofthesolution,yes□no□;
onthebottom,yes□no□）
5.于棕色瓶中4℃保存。
备注（Remark）：
丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴手套等。
聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。
10%十二烷基硫酸钠（SDS）
十二烷基硫酸钠（SDS）
20
定容至200
1．将SDS置于烧杯中，加入一定量的水，用磁力搅拌器搅拌至完全溶解，用水定容至200ml。
2．观察溶液上层有无漂浮物，有□、无□：
（Istherefloatingsubstance?
onthebottom,yes□no□）
10%过硫酸铵（APS）
过硫酸铵（APS）
0.1
定容至1
1.将过硫酸铵倒入2ml的离心管中，加1mL去离子水，用漩涡振荡器震荡溶解，贮存于4℃。
10%过硫酸铵溶液在4℃保存可使用2周左右，超过期限会失去催化作用。
4%分离胶
11.9
5.4
1.5MTris-HCl（pH8.8）
10
10%SDS
μl
200
10%过硫酸铵
TEMED
12
1．按照配方依次将纯水、30%丙烯酰胺、1.5MTris-HCl（pH8.8）、10%SDS、10%过硫酸铵、TEMED加入100ml的烧杯中，加入搅拌子，用磁力搅拌器搅拌均匀。
TEMED为交联剂，应最后加入，以防胶凝固。
20%分离胶
1.3
13.3
5
1．按照上述配方依次将纯水、30%丙烯酰胺、1.5MTris-HCl（pH8.8）、10%SDS、10%过硫酸铵、TEMED加入100ml的烧杯中，加入搅拌子，用磁力搅拌器搅拌均匀。
5%积层胶
10.2
2.55
1.875
150
15
备注（Remark）TEMED为交联剂，应最后加入，以防胶凝固。
10*电泳液
Trisbase
30
甘氨酸
144
SDS
1．在烧杯中加入一定量的去离子水，依次加入Trisbase、甘氨酸、SDS，加完后用磁力搅拌器搅拌至完全溶解，补加纯水定容至1000ml。
用时用纯水稀释成1*的电泳液。
10*电转液
5.8
29
0.37
甲醇
1．在烧杯中加入一定量的去离子水，依次加入Trisbase、甘氨酸、SDS，加完后用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。
2．加入200ml的甲醇，补加纯水定容至1000ml。
3．观察溶液上层有无漂浮物，有□、无□：
用时用纯水稀释成1*的电转液
封闭液
脱脂奶粉
定容至100
1．将脱脂奶粉加入烧杯中，加入100ml的1*PBS，用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。
10*TBST
1MTris-HCl（pH7.4）
40
NaCl
17.532
Tween20
1
1．将Tris-HCl、NaCl加入烧杯中，加入一定量水，置于磁力搅拌器上搅拌，再用移液枪（剪枪头）加入Tween20，继续搅拌至完全溶解，用纯水定容至200ml。
1.5MTris-HCl（pH8.8）
36.33
1．将Trisbase加入烧杯中，加入约150ml的水，用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。
2．用盐酸调节pH至8.8，定容至200ml。
1MTris-HCl（pH6.8）
24.22
1.将Trisbase加入烧杯中，加入约150ml的水，用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。
2.用盐酸调节pH至6.8，定容至200ml。
1MTris-HCl（pH7.5）
2.用盐酸调节pH至7.4，定容至200ml。
5*上样缓冲液
1MTris-HCl（pH6.8）
0.6
甘油
2
巯基乙醇
0.5
溴酚蓝
4.4
1.先用少量的水将溴酚蓝溶解后，将1MTris-HCl（pH6.8）、甘油、10%SDS、巯基乙醇、溴酚蓝、纯水依次加入烧杯中，用磁力搅拌器搅拌混匀。
置于-20℃保存。
PBS
KH2PO4
0.27
Na2HPO4
1.42
KCl
0.2
800
1.按配方将KH2PO4、Na2HPO4、NaCl、KCl依次加入烧杯中，用磁力搅拌器搅拌混匀。
用纯水定容至800ml。
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