普通遗传学第十七章基因组自学自出试题及答案详解第一套Word文档下载推荐.docx
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33.Tm：
34.选择标记基因：
35.基因和基因组:
36.分子杂交：
37.生物技术：
38.载体：
39.cDNA文库：
40.转化:
41.黏性末端
42.重叠基因：
43.基因组文库：
44.同尾酶：
45.酶切位点
二、选择题
1、构建cDNA文库时，选用下列哪种载体较好？
-------------------------（）
①质粒②SV40病毒
③Ti质粒④YAC（酵母人工染色体）
2、在Northern杂交中，探针主要用什么来进行标记？
------------------（）
①同位素②EB（溴化乙锭）
③染料④DNA
3、构建GST蛋白表达系统的载体是为了是目标蛋白以哪种方式表达？
-----（）
①融合表达②分泌表达
③独立表达④包含体表达
4、PCR反应中Taq酶常常没有错配碱基纠错功能，因为它没有-----------（）
①5’－3’聚合酶活性②5’－3’外切酶活性
③3’－5’外切酶活性④3’－5’聚合酶活性
5、以下哪种酶需要引物？
-----------------------------------------（）
①限制性核酸内切酶②末端转移酶
③逆转录酶④DNA连接酶
6、II型限制性核酸内切酶的切割位点是-----------------------------------------（）
①识别序列内②识别序列1000bp以外
③识别位点下游24－26bp处④DNA分子任一位点
7、Ti质粒中能插入到植物基因组中的DNA区段是-----------------（）
①复制远点区②毒素蛋白区
③T-DNA区④冠婴碱代谢区
8、艾滋病病毒HIV是通过下列哪个基因编码的产物识别人体T淋巴
细胞的？
-----------------------------------------------------（）
①env②pol③gag④LTR
9、T4DNA连接酶能催化下列哪种分子相邻的5'
端磷酸基团与3'
端羟基末端之间
形成磷酸二酯键？
----------------------------------------------（）
①双链DNA②单链DNA
③mRNA④rRNA
10、下列基因中，哪个不能作为基因工程载体的报告基因？
---------（）
①lacZ②GFP
③Ampr④ori
11、基因治疗的载体采用下列哪种载体比较合适？
----------------------（）
①逆转录病毒②Ti质粒
③噬菌体④质粒pBR322
12、采用原核细胞表达系统的优点之一是可以与下面什么过程直接相连-----（）
①发酵工程②转基因动物
③转基因植物④基因治疗
13、以mRNA为模板合成cDNA时，所用的工具酶是-----------------------（）
①DNA聚合酶I②DNA连接酶
③逆转录酶④核酸酶
14、YAC是----------------------------------------------------------（）
①酵母人工染色体②人工Y染色体
③细菌人工染色体④粘粒
15、用Sanger双脱氧法进行DNA测序时，凝胶上读出的序列是-------------（）
①模板链的②模板链的互补链的
③mRNA的④cDNA的
16、同位素标记探针是指在探针上连接----------------------------------（）
①32P②生物素
③荧光素④酶
17、Southern杂交时，探针与膜上的什么成分杂交？
---------------------（）
①DNA②RNA
③蛋白质④染色体
18、同一种限制性核酸内切酶分别切割目的基因DNA与载体DNA时，酶切片段不能互相
连接的是------------------------------------------------------（）
①目的基因与目的基因之间②载体DNA与载体DNA之间
③目的基因与载体DNA之间④目的基因与mRNA之间
19、pBR322是一种什么样的载体？
---------------------------------（）
①粘粒②质粒
③噬菌体④人工微小染色体
20、PCR引物成对存在，位于目的基因的---------------------------（）
①5'
端②3'
端
③C端④N端
21、构建CDNA文库时，选用下列哪种载体较好？
------------------------------------（）
22、Northern杂交时，探针与膜上的什么成分杂交？
-----------------------------------（）
23、以mRNA为模板合成CDNA时，所用的工具酶是--------------------------------------（）
24、BAC是-------------------------------------------------------------------------------------（）
25、用酶促合成法进行DNA测序时，凝胶上读出的序列是-------------------------（）
③mRNA的④cDNA的
26、同位素标记探针是指在探针上连接----------------------------------------（）
27、同一种限制性核酸内切酶分别切割目的基因DNA与载体DNA时，酶切片段不能互相
连接的是--------------------------------------------------------------------------------（）
28、下列基因中，哪个不能作为基因工程载体的报告基因？
----------------（）
29、M13噬菌体是---------------------------------------------------------------------（）
①双链噬菌体②单链噬菌体
③质粒④粘粒
30、常规PCR反应所用到的酶是-------------------------------------------------（）
①核酸酶②逆转录酶
③DNA连接酶④Taq酶
三、填空题
1.世界上成功构建的第一个体外重组DNA分子是在（）年完成的。
2.质粒载体能够克隆（）大小的DNA片段，噬菌体能够克隆（）大小
的DNA片段。
3.外源基因在动物的血液中表达，从而可以在动物血液里直接提取外源基因的产物，
这种基因产品的生产方式叫（）。
4.用琼脂糖凝胶电泳时，DNA片段越大，离点样孔越（），而DNA片段越小，离
点样孔越（）。
5.用化学降解法进行DNA测序时，必须具有（）个反应系统，用酶促合成法
法进行DNA测序时，必须具有（）个反应系统。
6.电转化的原理是在受体细胞上施加短暂的高压电流脉冲后，结果在细胞膜上形成许
多（），从而使（）容易进入到受体细胞内。
7.λ噬菌体根据接受外源DNA的方式不同，可以分为（）和（）
两种类型载体。
8.互为同裂酶的两种限制性核酸内切酶来源（），产生的粘性末端（）。
9.酵母双杂交系统通常含有两个载体，一个载体含有酵母转录因子GAL4的
（），另一个载体必须含有GAL4的（）。
10.目前抗虫转基因植物常常用到的外源基因主要是（），从而
达到杀死害虫的目的。
11.在转基因植物中，常用的显色或发光标记的报告基因有（），（），
（）等。
12.基因工程诞生于（）年。
13.基因工程中外源DNA与载体DNA分子所形成的杂合分子叫（）。
14.外源基因在人体表达，使人体能克服某一缺陷或疾病，这种基因工程技术叫
（）。
15.将抗性基因转入农作物中，使之具有某种抗病能力，得到的农作物叫（）。
16.用载体制作转基因植物时，最常用的载体是（）质粒。
17.粘粒载体能够克隆（）大小的DNA片段，人工酵母染色体YAC能够克隆
（）大小的DNA片段。
18.DNA自动测序标记的是（），常规Sanger双脱氧链终止法标记的是
19.显微注射技术一般是在显微镜下将目的DNA分子注射进入动物受精卵的（）
中，从而产生转基因动物。
20.基因工程构建基因重组体是指将（）与（）的进
行连接重组。
21.用琼脂糖凝胶电泳时，DNA片段越大，离点样孔越（），而DNA片段越小，
离点样孔越（）。
22.Northern杂交的用途主要是用来检测（）在特定组织的（）
情况。
23.粘粒载体是由（）和（）两部分组成的。
24.质粒载体能够克隆（）大小的DNA片段，噬菌体能够克隆（）大小的
DNA片段。
四、判断题
1、基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。
（）
2、B型双螺旋DNA的稳定因素为氢键和碱基堆砌力。
3、cDNA文库不包含内含子。
4、Western杂交是DNA—RNA之间的杂交。
5、DNA双酶切时，要先低盐缓冲液，后高盐缓冲液。
6、如果需要得到真核生物基因的完整序列，必须用基因组文库方能达到。
7、基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。
8、克隆的本质特征是生物个体在遗传组成上的完全一致性。
9、假基因不能合成功能蛋白质，是相应的正常基因突变引起的。
10、Northern杂交是DNA-RNA之间的杂交。
11、核酸Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关，碱基数相同的情况下，其含量越高，则Tm越高。
12、农杆菌介导法和基因枪法是植物转化的主要方法（）
13、（）有一些来源不同的限制性内切酶识别的是同样的核苷酸序列，这类酶称为同裂酶。
14、检测外源基因的导入时，PCR的准确性要高于Southern杂交的准确性。
15、转基因食品目前存在的最大问题是我们无法检测某种食品到底是不是转基因食品。
16、转基因生物直接食用的，称为“转基因食品”，而作为加工原料生产的食品，则不能被称为“转基因食品”。
（）
17、质粒DNA进行电泳时，其三种构型中，开环DNA跑的最快，共价闭环形DNA跑得最慢。
18、在生物技术的五大工程中，生化工程是核心技术，它能带动其他技术的发展。
19、cDNA是以DNA为起始材料，经过复制得到的互补DNA。
20、DNA的复制是全保留不连续复制。
21、基因是一个功能单位，但不是一个不可分割的最小的重组单位和突变单位。
22、Western杂交可以检测外源DNA的导入与否。
23、生物技术是一门新兴的学科。
24、生物技术是现实生产力，也是具有巨大经济效益的潜在生产力，它将是21世纪高技术革命的核心内容。
25、生物技术是由多学科综合而成的一门新学科。
26、自1996年11月我国正式公布实施《农业生物基因工程安全管理实施办法》以来，我国已批准6种转基因植物商品化。
27、1977年，美国首先采用大肠杆菌生产了人类第一个基因工程药物——人生长激素释放抑制剂激素。
28、生物技术是一门新兴学科，它包括当代生物技术和现代生物技术两部分.（）
29、生物技术主要包括五项技术（工程）。
30、现代生物技术是所有自然科学领域中涵盖范围最广的学科之一。
31、本世纪初，遗传学的建立及其应用，产生了遗传育种学，并于60年代取得了辉煌的成就，被誉为“第一次绿色革命”。
（）
32、人类基因组计划英文简称为HGP.（）
33、无论用哪种转化方法均可用PBR322作载体（）
34、进入细菌的外来DNA之所以被降解，是因为细菌只修饰自身DNA，不修饰外来DNA（）
35、只有粘粒端才可以被连接起来（）
36、用自身作引物合成的cDNA链，往往cDNA并不完整（）
37、所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成新子链DNA的模板，这样产生的双链DNA分子由一条旧链和一条新链组成。
38、任何细胞都可用作受体细胞。
39、克隆子就是重组子。
40、原核生物细胞是最理想的受体细胞。
41、目的基因来源于各种生物，其中真核生物染色体基因组是获得目的基因的主要来源。
42、E.coliDNA连接酶只能催化双链DNA片断互补黏性末端之间的连接。
五、简答题
1.碱性磷酸酯酶的主要作用是什么？
它有哪些应用？
2.什么是蛋白质的分泌表达？
它有什么优缺点？
3.选择T7噬菌体RNA聚合酶/启动子的大肠杆菌表达系统有哪些优点？
4.酵母作为真核基因的高效表达系统有什么优缺点？
5.举例说明转基因动物在医药科学中有哪些应用。
6.艾滋病是由于艾滋病病毒HIV感染引起。
艾滋病的基因治疗可以采取哪些措施？
7什么是荧光定量PCR？
它有什么应用？
8.构建cDNA文库时需要用到哪些工具酶？
9.简述进行菌落原位杂交的基本过程。
10.基因芯片的主要应用是什么？
11.酵母作为真核基因的高效表达系统有什么优缺点？
12、基因工程操作过程的主要步骤有哪些？
13、一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足的条件是什么？
14、PCR反应系统应包括哪几部分？
15、载体DNA与外源基因片段的连接方法主要有哪几种?
16、重组子筛选所用的核酸分析法的内容是什么？
17、基因工程研究的理论依据是什么？
18、分离目的基因的途径有哪些？
19、谈谈你对转基因食品的看法。
20、目的基因克隆的基本方法有哪些？
。
21、请简述PCR技术的原理。
22、cDNA文库和基因组文库的主要差别有哪些？
23、简述一项可以授予专利的发明必须满足的条件。
24、重组DNA导入受体细胞方法
25、简述现代生物技术在人类生产生活中的作用
六、问答题
1.试比较Southern杂交、Northern杂交和Western杂交的相同点与不同点。
2.什么是基因敲除？
基因敲除的基本流程是怎样的？
3.试比较Sanger双脱氧链终止法DNA测序与化学降解法DNA测序的异同点。
4.基因组文库构建的基本步骤是什么？
构建基因组文库需要用到哪些载体？
5.肿瘤的产生可能是抑癌基因突变或表达失误造成，也可能是原癌基因突变或表达失误造成。
对肿瘤患者进行基因治疗时，应该采取哪些策略？
6.有哪些方法可以将外源目的基因转移到植物体内？
你认为转基因农作物的潜在的安全隐患主要表现在哪些方面?
七、论述题
1、请介绍用于遗传图谱构建的至少三种DNA分子标记，包括其名称（中英文）、基本原理及优缺点。
2、什么是基因组诠释（GenomeAnnotation）？
可以从哪几个水平进行？
试举例分析其对基因组学研究的意义。
3．简述研究蛋白质与蛋白质相互作用的方法。
4.基因工程中常用的工具酶通常有哪几类？
说明每一类中主要酶的特性或功能。
5、重组子的筛选和鉴定方法。
答案
基于对蛋白质结构和功能的认识，进行分子设计，通过基因工程途径定向地改造
蛋白质或创造合乎人类需要的新的突变蛋白质的理论或实践活动。
把某种生物的基因组DNA切成适当大小，分别与载体结合，导入宿主细胞，形成
克隆。
汇集这些克隆，应包含基因组中的各种DNA顺序，每种顺序至少有一份代表。
这
样的克隆片段的总汇，叫基因组文库。
一段短的DNA序列，含有多种限制性核酸内切酶的酶切位点，是外源基因插入的位
点。
利用硝酸纤维素膜或经特殊处理的滤纸或尼龙膜具有吸附DNA的功能，先作DNA
片段的凝胶电泳，并将凝胶电泳中的DNA区带吸附到膜上，然后直接在膜上进行同位
素标记核酸探针与被测样品之间的杂交，再通过放射自显影对杂交结果进行检测。
就是指向有功能缺陷的细胞补充相应功能基因，以纠正或补偿其基因缺陷，从而
达到治疗的目的。
借助基因工程技术把外源目的基因导入动物的生殖细胞、胚胎干细胞或早期胚胎，
并在受体染色体上稳定整合，使之经过各种发育途径得到能把外源目的基因传给子代
的个体，叫转基因动物。
将在体外构建的外源目的基因，在显微操作仪下用极细的微吸管注射到处于原核
时期的受精卵原核中，外源基因在受精卵繁殖过程中通过DNA的复制而整合到动物基
因组中，再通过胚胎移植技术将整合有外源基因的受精卵移植到受体的子宫内继续发
育，进而得到转基因动物。
DNA聚合酶的大亚基，具有5－3聚合酶和5－3核酸外切酶的作用。
通过荧光染料或荧光标记的特异性探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监
控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析。
以实时检测外源基因的表达情况。
将基因文库的克隆以矩阵的方式排列在芯片上，利用不同荧光标记不同组织的RNA
或cDNA或基因群，与芯片进行杂交，从而确定不同组织的差异表达基因或特定基因群
的方法。
将某一个组织中的全部mRNA都反转录成cDNA，分别与载体连接形成的克隆的集合
体。
基因枪法，也称微粒轰击法，是将DNA包被到金粒或钨粒中，然后把这些粒子加
速推进靶细胞。
融合表达一般是将克隆化的基因引入某表达载体编码的高表达蛋白一起融合表达。
含有基因表达调控序列能将目的基因在人工控制下置于生物宿主中大量生产的载
限制性核酸内切酶是一类能识别双链DNA分子中特异性核苷酸序列并由此特异切
割DNA双链结构的水解酶。
又称为RNA印迹法，是将RNA样品通过琼脂糖凝胶电泳进行分离，再转移到硝酸
纤维素滤膜上，用同位素或生物素标记的DNA或RNA特异探针针对固定于膜上的mRNA
进行杂交，洗脱除去非特异性杂交信号，对杂交信号进行分析，以确定目的基因的表
达组织。
以mRNA为模板用逆转录酶进行的PCR反应。
含有外源目的基因并能稳定遗传的植物体。
将外源目的基因导入能传代培养的动物体细胞（包括动物成体体细胞、胎体成纤
维细胞等），以这些动物体细胞为核供体，通过显微操作或电融合方法使核供体与去核
的原核胚细胞或去核的成熟卵母细胞核受体进行细胞重组融合，使其不经过有性繁殖
过程。
然后再对重组的胚胎进行胚胎移植，进而得到带有外源基因的转基因动物。
用DNAaseI先将一个DNA片段消化成许多小片段，然后不加引物进行PCR，使得
消化后DNA小段之间重新按多种组合方式连接重组，然后利用原来整片段DNA两端的
引物进行加引物的PCR扩增，以便得到一系列改组后的突变DNA序列。
一段短的DNA序列，含有多种限制性核酸内切酶的酶切位点，是外源基因插入的
位点。
能够在两种以上的受体细胞中繁殖和扩增的载体。
DNA连接酶负责双链DNA中相邻3`-OH与5`-磷酸基团之间的磷酸二酯键的形成。
主要是根据两条单链DNA（或DNA与RNA）中互补碱基序列能专一配对的原理进行
的。
在一定条件下，单链DNA或RNA能与另一条单链DNA上互补的碱基形成氢键，从
而使两条单链杂交形成双链DNA分子。
通常利用已标记的某一DNA或RNA片段或合成
一段寡核苷酸作为探针，探测重组DNA分子中是否有DNA片段与探针发生同源性杂交，
然后利用放射自显影方法进行检测。
利用同源重组的原理，通过载体将外源的失活的基因替换掉内源的正常的基因，从
而使基因沉默而不表现突变性状的方法。
利用反义DNA或反义RNA能够与内源mRNA互补杂交，从而抑制内源基因表达的技
术。
46.基因组DNA文库：
将某一种基因DNA用适当的限制酶切断后，与载体DNA重组，再全部转化宿主细胞，得到含全部基因组DNA的种群，称为基因组DNA文库。
47.DNA的复性：
将变性DNA经退火（低于变性温度约25～30℃的条件下保温一段时间）处理，使其重新形成双螺旋结构的过程，称为DNA的复性。
48.克隆化：
获取同一拷贝的过程，即无性繁殖。
49.Tm：
加热DNA溶液，使其对260nm紫外光的吸收度突然增加，达到其最大值一半时的温度，就是DNA的变性温度（融解温度，Tm
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