学年生物人教版选修1检测专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离文档格式.docx

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答案　A

解析　凝胶的种类较多，但每一种凝胶内部都有孔隙。

相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；

相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离，A正确。

3．如图能正确表示相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程的是（　）

解析　相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢；

相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，B正确。

4．下列有关电泳的叙述，不正确的是（　）

A．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程

B．待测样品中各种分子的形状、大小及带电性质的差异等会影响其在电泳中的迁移速度

C．进行电泳时，带电粒子会向着与其所带电荷相同的电极移动

D．常用的电泳方法是琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳

答案　C

解析　电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程，在电场的作用下，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，A正确，C错误；

由于待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，会使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离，B正确；

琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳是两种常见的电泳方法，D正确。

5．SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入的SDS的作用是（　）

A．增大蛋白质的相对分子质量

B．将蛋白质分解成单个氨基酸

C．掩盖不同蛋白质分子间的电荷差别

D．增加不同蛋白质分子间的电荷差别

解析　SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的目的是使蛋白质完全变性，解聚成单条肽链；

同时SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别，C正确。

6．下列有关透析的叙述，错误的是（　）

A．用于透析的薄膜要具有选择透过性

B．透析膜一般是用硝酸纤维素制成的

C．透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内

D．透析可用于更换样品的缓冲液

解析　透析袋一般是用硝酸纤维素（又称玻璃纸）制成的，它没有生物活性，故不具有选择透过性（活的生物膜才具有选择透过性），B正确，A错误；

透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内，C正确；

透析可以去除样品中相对分子质量较小的杂质，或用于更换样品的缓冲液，D正确。

题型二　血红蛋白的提取与分离的实验过程

7．下列关于血红蛋白提取和分离实验的描述，正确的是（　）

A．红细胞的洗涤：

加入蒸馏水，缓慢搅拌，低速短时间离心

B．血红蛋白的释放：

加入生理盐水和甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌

C．分离血红蛋白：

将搅拌好的混合液离心、过滤后，用分液漏斗分离

D．透析：

将血红蛋白溶液装入透析袋，然后置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12h

解析　红细胞洗涤过程中应该用生理盐水，不能用蒸馏水，A错误；

血红蛋白的释放应该加入蒸馏水和甲苯，使红细胞吸水涨破，释放其中的血红蛋白，B错误；

将搅拌好的混合液通过离心、过滤后，用分液漏斗分离出血红蛋白溶液，C正确；

透析所用的磷酸缓冲液的pH为7.0，D错误。

8．在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是（　）

A．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程

B．血红蛋白是一种两性物质，需要酸进行中和

C．防止血红蛋白被氧气氧化

D．让血红蛋白处在稳定的pH范围内，以维持其结构和功能

答案　D

解析　在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变，防止血红蛋白的结构发生改变，从而有利于血红蛋白的分离。

9．凝胶色谱柱制作的程序一般是（　）

①橡皮塞打孔　②挖凹穴　③装玻璃管　④盖尼龙网

⑤盖尼龙纱　⑥将橡皮塞插入玻璃管　⑦接尼龙管、装螺旋夹　⑧柱顶插入安装了玻璃管的橡皮塞

A．①→③→④→⑤→⑥→⑧→⑦→②

B．①→②→③→④→⑤→⑥→⑦→⑧

C．①→②→③→④→⑥→⑤→⑧→⑦

D．①→②→③→⑦→⑥→⑤→⑧→④

解析　凝胶柱制作的一般流程是：

选择玻璃管→选择合适的橡皮塞→打孔→挖凹穴→装玻璃管→盖尼龙网→盖尼龙纱→将橡皮塞插入玻璃管→接尼龙管→装螺旋夹→柱顶插入安装了玻璃管的橡皮塞。

10．下列关于凝胶色谱柱的操作，不正确的是（　）

A．在色谱柱中装填凝胶的时候要尽量紧密

B．凝胶用酒精充分溶胀后，配成凝胶悬浮液

C．加样前，打开色谱柱下端的流出口

D．在凝胶色谱制作过程中，不能发生洗脱液流干，露出凝胶颗粒的现象

解析　凝胶应用蒸馏水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液，B错误。

11．将处理破裂后的红细胞混合液以2000r/min的速度离心10min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是（　）

A．血红蛋白、甲苯层、脂质物质层、细胞破碎物沉淀层

B．甲苯层、细胞破碎物沉淀层、血红蛋白、脂质物质层

C．脂质物质层、血红蛋白、甲苯层、细胞破碎物沉淀层

D．甲苯层、脂质物质层、血红蛋白、细胞破碎物沉淀层

解析　将处理破裂后的红细胞混合液以2000r/min的速度离心10min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是甲苯层、脂质物质层、血红蛋白、细胞破碎物沉淀层。

12．在装填凝胶柱时，不得有气泡存在的原因是（　）

A．气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果

B．气泡阻碍蛋白质的运动

C．气泡能与蛋白质发生化学反应

D．气泡会在装填凝胶的时候，使凝胶不紧密

解析　在装填凝胶柱时，不得有气泡存在的原因是气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果，A正确。

13．红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请完成下列有关问题：

（1）血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：

__________、________、________和________。

（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。

①加入柠檬酸钠的目的是____________________________________。

②以上所述的过程即是样品处理，它包括______________、__________________、分离血红蛋白溶液。

（3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析，这就是样品的粗分离。

①透析的目的是________________________________________________。

②透析的原理是________________________________________________。

（4）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。

①样品纯化的目的是_____________________________________________。

②血红蛋白有什么特点？

__________________________________________。

这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义？

__________________________。

答案　

（1）样品处理　粗分离　纯化　纯度鉴定

（2）①防止血液凝固　②红细胞的洗涤　血红蛋白的释放

（3）①去除相对分子质量较小的杂质　②透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内

（4）①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去　②血红蛋白呈现红色　在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液；

这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作程序

解析　

（1）血红蛋白的提取和分离一般分为四步：

样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。

（2）①采取血液时要在采血容器中预先加入柠檬酸钠以防止血液凝固。

②样品处理包括红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液。

（3）①透析即是血红蛋白的粗分离，透析的目的是除去分子量较小的杂蛋白。

②透析的原理是透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内。

（4）①样品的纯化是通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去。

②血红蛋白呈红色，在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作程序。

14．下面是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入（图Ⅰ）和洗脱（图Ⅱ）示意图，请据图回答下列问题：

（1）在加样示意图中，正确的加样顺序是________。

（2）用吸管加样时，应注意正确操作，分别是①________、②贴着管壁加样、③___________________________________________________________。

（3）等样品___________时，才加入缓冲液，待____________________接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每________mL收集一管，连续收集。

答案　

（1）④→①→②→③

（2）①不要破坏凝胶面　③使吸管管口沿管壁环绕移动

（3）完全进入凝胶层　红色的蛋白质　5

解析　加样品时应严格按要求进行操作，吸管应贴着管壁，管口沿着管壁环绕移动，还应注意不要破坏凝胶面。

等样品完全进入到凝胶层时，才加入缓冲液进行洗脱。

待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。

1．分离不同种类的蛋白质依据的原理不包括（　）

A．分子的形状和大小

B．所带电荷的性质和多少、吸附性质

C．对其他分子的亲和力

D．蛋白质分子的组成元素

解析　分离不同种类的蛋白质依据的原理包括分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、吸附性质、对其他分子的亲和力和蛋白质分子的溶解度等。

蛋白质分子的组成元素不是分离不同蛋白质的依据。

2．下面说法不正确的是（　）

A．在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变

B．缓冲溶液通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成

C．血红蛋白由4条肽链组成

D．透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内

解析　透析袋一般是用硝酸纤维素（又叫玻璃纸）制成的。

透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内。

透析可以除去样品中相对分子质量较小的杂质，或用于更换样品的缓冲液。

3．关于电泳的说法不正确的是（　）

A．琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳是两种常用的电泳方法

B．带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动

C．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少

D．用SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳，蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小

解析　蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶