普通植物病理学实验文档格式.docx

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这就是利用病状诊断植物病害的基础。

病征是由病原微生物的群体或器官着生在病体表面所构成的，它更直接地暴露了病原物在质上的特点。

如真菌子实体在寄主表面形成的霉层、黑点等。

由植物病毒、植原体、许多病原细菌、非侵染性植物病害等没有病征的表现。

病征的出现与否和出现的明显程度，虽受环境条件的影响很大，但一经表现出来却是相当稳定的特征，所以根据病征能够正确的判定病害。

不同植物的任何病害都具有其独特症状，通常在病害发生过程中按一定顺序出现。

病理学家正是根据这种顺序出现的症状在田间诊断植物病害。

病状和病征，尤其是前者，作为诊断病害的依据也有其局限性。

首先是许多植物病害常产生相似的病状，因此要从各方面的特点去综合判断；

其次，植物常因作物品种的变化或受害器官的不同，而使病状有一定幅度的变化；

第三，病害的发生发展是一个过程，有初期和后期，病状也随之而发展变化；

第四，环境条件对病状和病征有一定的影响，尤其是湿度对病征的产生有显著地作用，加之发病后期病部往往会长出一些腐生菌的繁殖器官。

因此，症状的稳定性和特异性只是相对的，要认识症状的特异性和变化的规律，在观察植物病害时，须认真地从症状的发展变化中去研究和掌握症状的特殊性；

观察和采集植物病害标本，仔细地区别病征的那种微小的、似同而异的特征，这样才能正确地诊断病害。

一、目的要求

认识各类病害对植物造成的危害，了解植物病害的种类及其多样性，初步掌握主要病害的症状表现及其特点，学会植物病害症状的描述，为今后病害的诊断奠定基础。

二、材料、试剂与仪器

按照植物病害的病状类型（变色、坏死、斑点、腐烂、畸形）和病征类型（粉状物、霉状物、点状物、菌核、溢脓等）准备植物病害的盒装标本、瓶装浸渍标本及新鲜标本（不同类型的病状和病征的标本可根据当地的情况准备）。

各类症状的挂图、模型、多媒体课件等。

实体显微镜、手持扩大镜、水果刀、载玻片等。

三、实验操作

（一）病状的观察

1．斑点观察玉米大斑病、棉花角斑病、棉花黑斑病、大麦条纹病、小麦根腐叶斑病、大葱或大蒜紫斑病、花生网斑病、番茄早疫病、十字花科霜霉病等标本，注意不同类型病害所表现病斑的形状、大小、颜色等的异同以及病斑上有无轮纹、花纹伴生，同时注意观察各类病斑上有无病征以及病征的特点。

斑点类发生在叶、茎、果等部位，受病组织局部坏死，一般有明显的边缘。

斑点中还可以伴生轮纹、花纹等特点，根据病斑的颜色、形状等特点而分为褐斑、黑斑、紫斑、角斑、条斑、大斑、小斑、胡麻斑、轮纹斑、网斑等多种类型。

2．腐烂观察甘薯黑斑病和干腐病病薯、马铃薯晚疫病和环腐病病薯、棉苗立枯病、柑桔溃疡病等病害标本，认识该类病害对植物所造成的危害，同时掌握这类病害的病状特点。

腐烂类病状发生在植物的各个部位，由于组织分解的程度不同，有软腐、干腐之分。

根据腐烂的部位，有根腐、基腐、茎腐、果腐、花腐等名称，还伴随有各种颜色变化的特点，如褐腐、白腐、黑腐等。

3．萎蔫观察棉花、黄瓜等植物枯萎病、棉花和茄子黄萎病、玉米和茄科植物青枯病、马铃薯环腐病等标本，注意区别枯萎、黄萎、青枯等病状类型，必要时可以剖开病株茎杆观察微管束是否褐变。

典型的萎蔫病状是植物根、茎的维官束组织受到破坏而发生的叶片或枝条萎垂现象，皮层组织完好，萎蔫病害常无外表的病征。

植物受萎蔫菌侵染后，不一定都能引起萎蔫，发病初期有半边叶片、半个枝条萎垂的现象，但更常见的是全株性萎蔫。

提示对于萎蔫类病害病状的观察应以新鲜标本为主，有条件时最好在田间进行，这类病害发生具有一定的地域性，观察时要注意其微管束组织的病变，干标本则失去了原有的特点。

4．变色变色主要有两种类型。

一种表现为黄化，是整个植株或叶片部分地或全部地均匀褪绿、变黄，或呈现其它的颜色。

多数伴生有整株或部分的畸形。

另一种为花叶，病株叶片色泽浓淡不均，深绿与浅绿部分相间夹杂，一般遍及全株，上部叶片较为显著，无病征表现。

比较观察烟草花叶病、苹果花叶病、小麦黄矮病、瓜类、十字花科和茄科植物的病毒病病状、注意每一种病害的病状特点。

5．畸形畸形类病状由不同组织、器官的病变，如叶片的膨肿、皱缩、小叶、蕨叶；

果实的缩果及其它畸形；

整个植株的徒长、矮缩；

局部器官如花器和种子的退化变形和促进性的变态等。

瘤、瘿、癌、丛枝和发根也是常见的畸形病状。

观察桃缩叶病、十字花科根肿病、马铃薯癌肿病、果树根癌病、桑树根结线虫病、油菜白锈病、番茄蕨叶病、枣疯病、泡桐丛枝病、玉米黑粉病、小麦粒线虫病、水稻恶苗病等，归纳各类标本的病状类型。

（二）病征的观察

1．粉状物借助手持扩大镜或实体解剖镜观察麦类锈病、十字花科白锈病、麦类白粉病、、玉米黑粉病和麦类黑粉病等病害标本，注意粉状物的颜色、质地和着生状况等。

2．霉状物借助手持扩大镜或实体解剖镜观察黄瓜霜霉病、甘薯软腐病、瓜类软腐病、柑桔青霉病、番茄灰霉病和番茄叶霉病等病害标本或瓶装标本。

注意区别霜霉、黑霉、绵霉、青霉和灰霉等不同类型的霉状物。

3．点状物取小麦白粉病、瓜类炭疽病、棉花茎枯病、芹菜斑枯病、苹果树腐烂病和麦类赤霉病等病害标本，借助手持扩大镜或实体解剖镜观察，注意点状物是埋生、半埋生还是表生，以及在寄主表面的排列状况、颜色等。

4．菌核观察油菜菌核病和水稻纹枯病等病害标本，注意菌核的大小、形状、颜色、质地等，并观察菌核萌发状况。

5．溢脓溢浓为细菌性病害特有的病征。

观察水稻白叶枯病、水稻细菌性条斑病、十字花科细菌性软腐病、棉花角斑病和黄瓜角斑病等病害标本，注意溢脓的颜色、出现位置等。

用剪刀将植物病组织剪成4mm2的小块，放于载玻片上，加一滴水，盖上盖玻片，在显微镜下观察或直接用载玻片对光观察喷菌现象。

实验二鞭毛菌亚门真菌形态观察

鞭毛菌是一类低等真菌，其中不少是水生的。

它们的共同特征是无性繁殖时产生有鞭毛的游动孢子。

根据菌体的形态和游动孢子鞭毛的特征分为根肿菌纲、壶菌纲、丝壶菌纲和卵菌纲。

其中与植物病害关系较为密切的有根肿菌纲、壶菌纲、卵菌纲。

了解鞭毛菌亚门中根肿菌纲、壶菌纲和卵菌纲真菌的主要形态特征，掌握与植物病害有关的重要属的形态特征、分类依据及所致病害的症状特点，同时学习使用检索表来鉴定病菌，为分类鉴定打下初步基础。

二、仪器与用品

显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备；

载玻片、盖玻片、浮载剂（蒸馏水或乳酚油）、吸水纸、解剖刀、挑针、镊子、纱布、刀片、通草、酒精灯、无菌水等。

三、实验材料

1．芸苔根肿菌（Plasmodiophorabrassicae）2.马铃薯粉痂菌（Spongosporasubterranea）

3．禾谷多粘霉（Polymyxagraminis）4.玉蜀黍节壶菌（Physodermamaydis）

5．串囊水霉（Saprolegnia.monilifera）6.稻绵霉（Achlyaoryzae）

7.瓜果腐霉（Ｐythiumaphanidermatum）8.致病疫霉（Phytophthorainfestans）

9.禾生指梗霉（Sclerosporagraminicola）10.葡萄霜霉病菌（Plasmoparaviticola）

11.寄生霜霉（Peronoporaparasitica）12.瓜类霜霉病菌（Pseudoperonosporacubensis）

13.莴苣盘梗霉（Bremialactucae）14.十字花科白锈病菌（Albugocandida）

以上病害标本或新鲜材料、挂图、病原菌永久玻片，多媒体教学课件（包括幻灯片、录象带、光盘等影像资料）以及水霉和腐霉游动孢子形成与释放的录相带等。

四、观察内容和方法

（一）根肿菌纲（Plasmodiophoromycetes）

1.芸苔根肿菌取甘蓝根肿菌切片，镜检切片中的病原菌。

有的寄主细胞内可见到许多堆集在一起的鱼籽状颗粒，是病菌的休眠孢子。

休眠孢子近球形。

2.马铃薯粉痂菌镜检马铃薯粉痂病菌切片，在寄主根的皮层组织的受害细胞中可看到病原菌的休眠孢子，球形至多角形，多个休眠孢子聚集呈海绵状或空心球。

3.禾谷多粘霉选取有褐点的根，用解剖刀或镊子撕取小麦根基皮层，制成临时玻片，镜检。

病菌的休眠孢子常有规律地呈条状排列。

提示被寄生的表皮细胞呈褐色小点，必须仔细观察才能见到。

（二）壶菌纲（Chytridiomycetes）

玉蜀黍节壶菌（Physodermamaydis）观察由玉蜀黍节壶菌引起的玉米褐斑病标本。

用针挑取受害病组织内呈黄色粉末状物制成临时玻片，或对病组织作徒手切片，镜检可见到许多金黄色扁球状的休眠孢子，休眠孢子椭圆形，一面扁平有盖。

（三）卵菌纲（Oomycetes）

水霉目（Saprolegniales）

1.串囊水霉引起水稻烂秧，又称水稻烂秧水霉菌。

孢子囊圆筒形或棍棒状，层出式，即新的孢子囊从老的空孢子囊内基部长出，游动孢子具明显的两游现象。

2.水稻烂秧绵霉菌孢子囊圆筒形或棍棒状，合轴分枝，新的孢子囊从老孢子囊的基部外侧长出，呈聚伞形排列，游动孢子第一个活动时期很短，休止孢在孢子囊顶部孔口处聚集成团。

霜霉目（Peronosorales）

1.腐霉属（Pythium）观察瓜果的腐烂病病果上的白色菌丝体，将生长旺盛的小块菌丝体移至清水中培养24～48h，菌丝顶端即形成大量游动孢子囊，用针挑取在清水中培养过的菌丝，观察腐霉菌的游动孢子囊，丝状、姜瓣状或球状等，顶生或间生，无特殊分化的孢囊梗。

孢子囊不脱落，萌发时在其顶端产生一管状物，原生质经管状物排出而形成泡囊。

游动孢子产生在泡囊内。

2.疫霉属（Phytophthora）取马铃薯或番茄晚疫病标本制片观察。

孢囊梗2~3支成丛自气孔伸出，假轴状分枝，小梗基部膨大，多次产生孢子囊，使孢子囊梗上部呈节状；

孢子囊近球状、卵形或梨形等，具乳突。

3.霜疫霉属（Peronophthora）取荔枝霜疫霉病标本挑取霉层观察，孢囊梗直立，双叉锐角分枝，孢囊梗多级有限生长。

孢子囊柠檬形、椭圆形，乳突明显。

4.霜霉属（Peronospora）取十字花科植物（油菜、白菜等）的霜霉病标本从叶背面刮取霉层观察，孢囊梗二叉状锐角分枝，末端尖锐。

按照寄生霜霉的观察方法，选取禾生指梗霉、葡萄霜霉病菌、瓜类霜霉病菌、莴苣盘梗霉等材料，对照下列检索表，制片观察各种霜霉病的病原菌或观察病菌永久玻片标本，掌握霜霉科几个常见属的主要形态特征。

霜霉科主要属的检索表

1.孢囊梗粗壮，上部为重复2～3次的不规则二叉分枝…………指梗霉属（Sclerospora）

1.孢囊梗较细……………………………………………………………………………………2

2.孢囊梗单轴分枝，小轴与主轴成直角，分枝末端平钝………单轴霉属（Plasmopara）

2.孢囊梗呈现锐角二叉分枝……………………………………………………………………3

3.分枝两侧不对称，顶端尖锐……………………………假霜霉属（Pseudoperonospora）

3.分枝两侧对称…………………………………………………………………………