补肾中药对骨质疏松大鼠性激素影响的实验研究Word文档下载推荐.docx

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　　性激素水平的下降是骨质疏松症的重要发病原因之一，韩瑞平等［1］研究发现，正常中老年人骨矿物质丢失程度与血清性激素含量呈负相关。

有研究报道补肾类中药能提高大鼠性激素水平［2］。

为探讨性激素在骨质疏松发病中的作用及中药对其影响，本试验采用切除大鼠卵巢和睾丸造成骨质疏松模型，旨在观察去势大鼠血清性激素水平的变化，并探讨中药骨康防治骨质疏松症的作用机理与性激素间关系。

　　1　材料和方法

　　1.1　材料

　　1.1.1　药物：

骨康口服液由广州中医药大学附属骨伤科医院制剂室提供。

尼尔雌醇由上海华联制药有限公司提供，批号：

961001，尼尔雌醇为国产长效口服雌三醇衍生物，有文献证明每周每100g体重0.15mg可防止卵巢切除大鼠的骨丢失［3］。

特乐定（Tridin）由意大利Rotta药厂提供，批号：

970224，该药用于治疗骨质疏松症已载入欧洲各国药典。

戊巴比妥钠由佛山市化工厂提供，批号：

860001。

　　1.1.2　动物：

选用10月龄SD大鼠120只，体重270～300g，雌雄各半，由广州中医药大学实验动物中心提供。

　　1.2　实验方法

　　1.2.1　造模方法：

将120只实验动物分为两个组，所有雄性大鼠分在第一组，雌性大鼠分在第二组，第一组又随机分为A1、B1、C1、D1、E1、F16组，第二组亦随机分为A2、B2、C2、D2、E2、F26组，每组10只，A1、A2为正常对照组、B1、B2为模型组，C1、C2组为阳性对照组，D1和D2、E1和E2、F1和F2分别为骨康高、中、低剂量组。

各组大鼠均以3%戊巴比妥钠按1ml/kg腹腔注射麻醉后，A1及A2组行假手术，其余各组雌性大鼠均从背侧入路行完整双侧卵巢摘除术，雄性大鼠从腹侧入路行完整双侧睾丸摘除术。

　　1.2.2　饲养及给药途径：

术后第3天开始给药，正常对照组、模型组每天以蒸馏水6ml/kg灌胃，骨康高、中、低剂量组每天分别给予高、中、低剂量骨康口服液6ml/kg灌胃，浓度分别为每ml含生药6.6g、3.3g、1.65g，C1组每天给予特乐定60mg/kg灌胃，使用前配成混悬液，C2组给予尼尔雌醇6mg/kg灌胃，浓度为0.2ml/kg，1次/周，其余时间给予蒸馏水6ml/kg灌胃。

所有大鼠均在同等条件下喂养，自由摄水，控制食量。

所有大鼠均灌药3个月。

　　1.2.3　观察指标：

各组大鼠在实验前及灌胃3个月后，分别眼球抽血，分离血清，同批放射免疫分析法测定血睾酮和血雌二醇含量，测量仪器为BECKMANDP5500型γ计数器，T、E2放免疫试盒由天津DPC公司提供。

　　各组大鼠于处死前2天用美国HOLOGIC公司QDR-2000型双能X线吸收仪［变异系数（CV）＜1.0%］扫描全身骨矿含量及骨密度，并分别取右、左股骨下端两个敏感点的数值。

　　1.3　统计学处理

　　所有数据均输入计算机，采用PEMS软件进行分析，组间比较用方差分析，显著性差异用t检验。

　　2　结果

　　2.1　对去睾丸大鼠血睾酮含量的影响：

各组雄性大鼠去睾丸前血睾酮含量无显著性差异（P＞0.05），去睾丸后3个月，中药骨康高、中剂量防治组大鼠血睾酮含量明显高于模型组，差异有显著性（P＜0.01），见表1。

表1　骨康对去睾丸大鼠血睾酮（T）含量的影响（

±

s）（ng/ml）

组别

手术前

给药3个月

A1（10）

3.20±

1.12

3.49±

1.13**

B1（10）

3.26±

0.83

0.19±

0.11##

C1（10）

3.25±

0.65

0.30±

0.19##

D1（10）

3.03±

1.11

0.67±

0.49##**

E1（10）

3.33±

0.67

0.44±

0.24##**

F1（10）

3.01±

0.85

0.28±

方差分析

P＞0.05

P＜0.01

　　2.2　对去卵巢大鼠血雌二醇含量的影响：

各组雌性大鼠去卵巢前血雌二醇含量无显著性差异（P＞0.05），去卵巢后3个月，中药骨康高、中、低剂量防治组及尼尔雌醇防治组大鼠血雌二醇含量明显高于模型组，差异有显著性（P＜0.05），见表2。

表2　骨康对去卵巢大鼠血清雌二醇含量的影响（

s）（pg/ml）

A2（10）

14.57±

3.99

28.86±

7.85**

B2（10）

14.23±

3.46

　7.78±

2.28##

C2（10）

15.63±

2.04

16.12±

2.39*

D2（10）

15.17±

1.91

20.31±

2.96*

E2（10）

14.07±

4.12

18.68±

2.59*

F2（10）

14.74±

3.23

15.77±

3.57*

　　2.3　对去卵巢大鼠骨密度及骨矿含量的影响：

服用各剂量骨康口服液防治组及尼尔雌醇防治组的去势大鼠全身及左右股骨下端骨密度均高于模型组，差异有显著性（P＜0.05～0.01），见表3；

服用各剂量骨康口服液防治组及尼尔雌醇防治组的去势大鼠全身及左右股骨下端骨矿含量均高于模型组，差异有显著性（P＜0.05～0.01），见表4。

表3　骨康对去卵巢大鼠BMD变化的影响（灌胃3个月时）（

s）

global

右股骨下端

左股骨下端

0.1316±

0.0053**

0.1828±

0.0276**

0.1856±

0.0142**

0.1200±

0.0045##

0.1329±

0.0079##

0.1438±

0.0096##

0.1251±

0.0051*#

0.1702±

0.0176**

0.1764±

0.0179**

0.1314±

0.0022**

0.1629±

0.0191**

0.1770±

0.0165**

0.1294±

0.0049**

0.1572±

0.0169*

0.1763±

0.0113**

0.1289±

0.0054**

0.1570±

0.0150*

0.1697±

0.0163**

表4　骨康对去卵巢大鼠BMC变化的影响（灌胃3个月时）（

9.0156±

0.4147**

0.0682±

0.0078**

0.0723±

0.0067**

7.3655±

0.6638##

0.0514±

0.0043##

0.0563±

0.0039##

8.3943±

0.8107*#

0.0654±

0.0063**

0.0646±

0.0065*#

9.0773±

0.9950**

0.0092**

0.0687±

0.0079**

8.6034±

0.5385**

0.0641±

0.0082**

0.0686±

0.0055**

8.3523±

0.9195*#

0.0615±

0.0057**

0.0629±

0.0082*#

　　2.4　对去睾丸大鼠骨密度及骨矿含量的影响：

服用各剂量骨康口服液防治组及特乐定防治组的去睾丸大鼠全身及左右股骨下端骨密度均高于模型组，差异有显著性（P＜0.05～0.01），见表5；

服用各剂量骨康口服液防治组及特乐定防治组的去睾丸大鼠全身及左右股骨下端骨矿含量均高于模型组，差异有显著性（P＜0.05～0.01），见表6。

表5　骨康对去睾丸大鼠BMD变化的影响（灌胃3个月时）（

0.1417±

0.0046**

0.1932±

0.0076**

0.1956±

0.0101**

0.1301±

0.0055##

0.1437±

0.0078##

0.1537±

0.0086##

0.1354±

0.0049*#