赛分科技SRT体积排阻色谱柱Word文件下载.docx
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概述
SRT、Zenix、SRT-C和Zenix-C系列体积排阻色谱柱均采用经特殊表面修饰的高纯硅胶作为填料，其修饰方式为在硅胶表面化学键合一层均一、亲水、纳米厚度的中性聚合物薄膜。
SRT、Zenix和SRT-C、Zenix-C键合方式的不同之处在于：
前两者固定相表面键合的是一层“站立”着的单分子层，而后两者则是一层“平躺”着的单分子层。
同时Zenix和Zenix-C为3um粒径，SRT和SRT-C为5um粒径，这四款体积排阻柱相互配合，可满足客户对分辨率及柱效的不同要求。
赛分科技完整的产品线为生物分子体积排阻分离提供了稳定、重现和最高分辨率的最优选择。
固定相的差异
图1.固定相修饰的差异：
SRT和Zenix在硅胶表面修饰了一层“站立”着的亲水中性单分子层，SRT-C和Zenix-C在硅胶表面修饰了一层“平躺”的亲水中性单分子层。
粒径差异
图2.Zenix和Zenix-C以3µ
m多孔硅胶为基质；
SRT和SRT-C以5µ
m多孔硅胶为基质
Zenix和Zenix-C的独特优点
Zenix和Zenix-C色谱柱采用3µ
m粒径的填料，为生物分子的分离提供最高的柱效。
图3.孔径为300Å
的SRTSEC柱与ZenixSEC柱对BSA分离效果的对比。
色谱柱:
7.8x300mm;
流动相:
150mM磷酸盐缓冲液,pH7.0;
流速:
1.0mL/min;
检测波长:
214nm;
进样量:
10L（5.0mg/mL）
表1.SepaxSEC色谱柱的主要特点
特性
SRT
Zenix
SRT-C
Zenix-C
粒径
5µ
m
3µ
孔径（Å
）
100,150,300,500,1000&
2000
100,150,300
150,300&
500
分辨率
高
最高，更短的柱子得到更快的分离
效率
为5um柱的两倍
选择性
SRT与Zenix相同
SRT-C与Zenix-C相同
表面结构
化学键合一层“站立”的单分子层
化学键合一层“平躺”的单分子层
典型应用领域
单克隆抗体、蛋白、多肽、核酸、寡核苷酸、病毒和水溶性聚合物等
“棘手的样品”
包括胰岛素、膜蛋白等疏水性蛋白，聚合物（如PEG、肽链等）修饰的单克隆抗体蛋白
SRT体积排阻色谱柱
SRTSEC键合固定相采用专利的表面修饰技术，通过在高纯度具有良好机械稳定性的硅胶基质上，键合一层均匀的纳米厚度中性亲水薄膜而制备得到。
工艺采用可控的化学修饰技术，因此能确保柱与柱之间有着可靠的重现性。
SEC填料采用化学键合技术，表面亲水涂层覆盖完全，因此不仅具有优异的稳定性，而且对蛋白等生物样品的非特异性吸附作用也非常小。
精心设计的大孔体积可保证高的分离容量以及优异的分辨率。
广泛应用于生物分子及水溶性聚合物的分离和检测。
优异的特性
高柱容量、高分辨率
宽的pH范围（pH范围2-8.5）
使用寿命长
低盐浓度洗脱，适合LC-MS分析
对于生物样品常见的PEG或者吐温80等物质无强吸附
极低的非特异性吸附,高的蛋白回收率及活性回收率
解决多维色谱分析应用
应用领域
蛋白药物（人血白蛋白、免疫球蛋白、HGH、EPO等）
多肽（Peptide）
水溶性聚合物（多糖、PEG）
抗生素（头孢类抗生素）
抗体（Antibodies）、疫苗（Vaccine）
病毒蛋白（VirusProtein）、细胞发酵液、DNA
标准测试谱图及蛋白分子量校正曲线
图1.标准蛋白测试图谱
1
1a
SRTSEC-100、SRTSEC-150、SRTSEC-300、SRTSEC-500和SRTSEC-1000柱（5µ
m,4.6mmI.D.×
300mm）
流动相:
150mM磷酸盐缓冲液，pH7.0
流速:
0.35mL/min
检测波长:
UV214nm
温度:
室温（～23°
C）
进样体积:
3µ
L
样品:
1a）甲状腺球蛋白聚合体;
1）甲状腺球蛋白（1.0mg/mL）,
670kD；
2）BSA双聚体,132kD；
3）BSA（1.0mg/mL）,66kD;
4）核糖核酸酶A（1.0mg/mL）,13.7kD;
5）尿嘧啶（2.5mg/mL）,120D。
表1.SRTSEC色谱柱技术参数表
固定相
SRTSEC-100
SRTSEC-150
SRTSEC-300
SRTSEC-500
SRTSEC-1000
SRTSEC-2000
材料
表面键合亲水薄膜的硅胶
颗粒大小
5m
孔径（Å
~100
~150
~300
~500
~1,000
~2,000
蛋白分子量范围
100-100,000
500-150,000
5,000–1,250,000
15,000-5,000,000
50,000-7,500,000
>
10,000,000
水溶性聚合物
分子量范围
500-10,000
500-25,000
1,000-100,000
2,500-500,000
5,000-1,500,000
50,000->
2,500,000
pH稳定性
2–8.5，短时间可耐受8.5-9.5
2–8.5，短时可耐8.5-9.5
反压（psifora7.8x300mm）
~700
~700
最大压力（psi）
~4,500
~3,500
~3,000
盐浓度范围
20mM-2.0M
最高使用温度
~80oC
~80oC
流动相兼容性
常规水相及有机相溶剂
宽的孔径选择
基于独有的表面修饰技术，赛分SRTSEC柱提供众多孔径规格（从100Å
到2000Å
）以供用户选择。
SRTSEC固定相在众多的分离应用中可实现高的分离及最大的回收率。
其应用领域涵盖了生物大分子（如蛋白质和核酸）、生物小分子（如缩氨酸和寡聚核苷酸）、天然高分子（如多糖）、人造高分子、生物细胞（如细菌和病毒），以及纳米粒子等。
图2.SRTSEC柱蛋白分子量校正曲线
7.8x300mm,5µ
150mMphosphatebuffer,pH7.0
1.0mL/min
UV280nm
进样量:
10µ
1.Thyroglobulin,670kD;
2.-Globulin,158kD;
3.BSA,66kD;
4.Ovalbumin,44kD;
5.Myoglobin,17.6kD;
6.RibonucleaseA,13.7kD;
7.B12,1.35kD;
8.Uracil,120
高容量、高分辨率
体积排阻色谱中，填料的孔体积决定了色谱柱的最高容量。
孔体积越大，柱容量就越高，分离效果也越好。
赛分科技精心设计的SRT固定相具有大的孔体积，例如SRTSEC-150、300、500孔体积为1.3～1.5mL/g，而SRTSEC-100、1000、2000的孔体积为1.0～1.1mL/g。
图3显示与竞争对手T的SEC柱相比，SRTSEC-150柱具有许多优点。
首先，SRT柱比T柱具有更高的分离容量。
对于SRT柱和T柱，从全渗透峰（尿嘧啶）到全排阻峰（甲状腺球蛋白）之间的洗脱体积分别为6.7mL和6.17mL。
其次，SRT柱比T柱具有更高的分辨率。
图中聚-DL-丙氨酸为一种缩氨酸，平均分子量为1～5KD（Sigma）。
根据经验可知，体积排阻色谱柱中能达到基线分离的两种物质其平均分子量必须相差两倍以上。
SRTSEC-150可以很好地分离核糖核酸酶A（13.7kD）和聚-DL-丙氨酸，而T柱则不能实现基线分离。
另外，SRT柱分离聚-DL-丙氨酸的完美峰形表明其对聚-DL-丙氨酸没有非特异性作用。
反之，T柱分离聚-DL-丙氨酸时的峰形变宽和拖尾现象则说明该柱固定相与样品之间存在某些非特异性结合作用。
图3.相近孔体积的SRTSEC-150与某品牌TSEC柱的比较
SRTSEC-150,7.8x300mm,5µ
150mMPBS,pH7
1.0mL/min
Ambient（~23°
C）
UV280nm
1）Thyroglobulin,670kD;
2）BSAmonomer,66kD;
3）RibonucleaseA,13.7kD;
4）poly-DL-alanine,1-5kDa;
5）Uracil,120D.（Allcolumnsarebrandnewandequilibratedfor>
5columnvolumeswithmobilephasetogetflatbaseline.Allsamplesrunonsameday）.
高载量
上样量是体积排阻色谱分离与纯化的重要指标。
从图4可以看到，以BSA作为目标分子，赛分SRT分析柱的上样量可以超过500μg，说明其具有高载量的特点。
图4.BSAloadingtestonaSRTSEC-15
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