革兰氏染色PPT格式课件下载.pptx

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采用复染色法（鉴别染色）：

采用两种以上两种以上的不同染料的不同染料进行先后染色，可将细菌染成不同的颜色，以便鉴进行先后染色，可将细菌染成不同的颜色，以便鉴别细菌。

别细菌。

抗酸染色抗酸染色:

用于检查结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌等用于检查结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌等抗酸抗酸性细菌性细菌（一些一旦用某些方法染色后，能够抵抗酸性酒一些一旦用某些方法染色后，能够抵抗酸性酒精脱色的细菌精脱色的细菌），阳性者为红色。

，阳性者为红色。

特殊染色：

荚膜染色，芽胞染色，鞭毛染色，极体染色特殊染色：

荚膜染色，芽胞染色，鞭毛染色，极体染色（用于白喉杆菌异染颗粒染色）。

（用于白喉杆菌异染颗粒染色）。

1.21.2革兰氏染色法革兰氏染色法革兰染色法是丹麦内科医生革兰染色法是丹麦内科医生ChristainGramChristainGram于于18841884年创立的一种细菌年创立的一种细菌复染色复染色方法，已有方法，已有130130多多年的历史，仍在广泛使用。

年的历史，仍在广泛使用。

1.31.3革兰氏染色法的原理革兰氏染色法的原理结晶紫结晶紫卢戈碘液液卢戈碘液液95%乙醇乙醇复红复红G-菌：

菌：

类脂质类脂质多多多多肽聚糖肽聚糖少少少少G+菌：

肽聚糖肽聚糖多多多多交联度大交联度大类脂质类脂质少少少少通透性学说通透性学说、等电学说、化学学说1.31.3革兰氏染色的意义革兰氏染色的意义v鉴别细菌：

把细菌分成鉴别细菌：

把细菌分成GG+和和GG-两大类。

两大类。

v选择抗菌药物：

例如选择抗菌药物：

例如GG+球菌球菌对青霉素敏感对青霉素敏感,GG-杆菌杆菌耐耐药。

药。

v了解细菌的致病机理：

了解细菌的致病机理：

GG+菌大多产生外毒素菌大多产生外毒素,G,G-菌产菌产生内毒素。

生内毒素。

革兰染色的步骤革兰染色的步骤涂片涂片干燥干燥固定固定染色染色实验器材与材料实验器材与材料接种环、细菌分离培养物（上次实验平板）接种环、细菌分离培养物（上次实验平板）接种环接种针，酒精灯，生理盐水接种环接种针，酒精灯，生理盐水22支，镜油瓶、拭支，镜油瓶、拭镜纸镜纸11套，吸水纸套，吸水纸11本，载玻片本，载玻片44张，细菌分离培养物张，细菌分离培养物（上次实验平板），革兰氏染色液（上次实验平板），革兰氏染色液22涂片的制备涂片的制备灭菌接种环灭菌接种环无无菌菌操操作作22涂片的制备涂片的制备细菌合适细菌较多接种环取盐接种环取盐水水3ul23ul2滴滴,水滴间距小于水滴间距小于2cm2cm。

取取菌菌苔苔少少许许（1mm1mm小小菌菌落落半半个个）与与盐盐水水混混匀匀，涂涂成成大于大于1cm1cm22均匀涂膜均匀涂膜。

涂毕涂毕环移至涂膜中环移至涂膜中央侧立，待环内菌膜破央侧立，待环内菌膜破裂，接种环烧灼灭菌。

裂，接种环烧灼灭菌。

无无菌菌操操作作22涂片的制备涂片的制备固定固定FixationFixation涂片涂片smearsmear干燥干燥drydry手手持持载载玻玻片片一一端端，涂涂膜膜朝朝上上，两两个个涂涂膜膜快快速速通通过过火火焰焰外外层层33次，时间次，时间2233秒钟。

秒钟。

促促使使菌菌体体蛋蛋白白质质凝凝固固，固固定定在在载载玻玻片片上上，以以免免染染色色水水洗洗的的时候，细菌被水洗掉。

时候，细菌被水洗掉。

初染初染：

结晶紫染液染结晶紫染液染1min1min水洗，甩干水洗，甩干媒染媒染：

卢戈氏碘液染卢戈氏碘液染1min1min水洗，甩干水洗，甩干脱色脱色脱色脱色：

95%乙醇脱色约乙醇脱色约30s30s水洗，甩干水洗，甩干复染复染：

复红染液染复红染液染30s30s水洗，甩干水洗，甩干印干印干油镜观检油镜观检染染色色关键步骤！

关键步骤！

33革兰氏染色的方法和步骤革兰氏染色的方法和步骤生物安全警告生物安全警告BIOHAZARDBIOHAZARDl本次实验操作，可产生几十至几百个微生物本次实验操作，可产生几十至几百个微生物气溶气溶胶颗粒。

胶颗粒。

l气溶胶粒径气溶胶粒径100um100um沉降很快沉降很快,50um50um在在0.4s0.4s内扩内扩散开散开,5um5um通过呼吸道直接到达肺泡。

通过呼吸道直接到达肺泡。

l实验室感染统计分析结果发现，不明原因的感染实验室感染统计分析结果发现，不明原因的感染高达高达82%82%，大多数是气溶胶在空气中扩散引起的。

，大多数是气溶胶在空气中扩散引起的。

l实验时应坐稳，很专注，不分心，在火焰周围实验时应坐稳，很专注，不分心，在火焰周围10102020厘米内操作，保持安静、有序，尽量少说话，厘米内操作，保持安静、有序，尽量少说话，以免感染病原菌。

以免感染病原菌。

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