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实现定性、定位或定量定性、定位或定量检测检测基基本本特特点点是是“特特异异,灵灵敏敏，准准确确，形形态态、机机能能、代代谢谢三三位位一一体体”，系系分分子病理学研究的常用手段。

子病理学研究的常用手段。

学习的重点有四：

1.1.名词概念；

名词概念；

2.2.技术原理；

技术原理；

3.3.操作要领；

操作要领；

4.4.结果判断原则结果判断原则（尤其是对照染色和假阳性（尤其是对照染色和假阳性假阴性的判别）。

假阴性的判别）。

免疫组化免疫组化发展概况发展概况免疫组化免疫组化的优点的优点相关的免相关的免疫学理论疫学理论免疫组化免疫组化应用范围应用范围染色技术染色技术和注意事和注意事项项凡是能作抗原、半抗原的物质，如凡是能作抗原、半抗原的物质，如蛋白质、多肽、核酸、酶、激素、磷脂、蛋白质、多肽、核酸、酶、激素、磷脂、多糖、受体及病原体等都可用相应的特多糖、受体及病原体等都可用相应的特异性抗体在组织、细胞内将其用免疫细异性抗体在组织、细胞内将其用免疫细胞化学手段检出和研究。

胞化学手段检出和研究。

抗原抗原抗体反应的抗体反应的一对一性一对一性大体观察大体观察目的：

寻找目的：

寻找“特征性特征性”的组织学改变的组织学改变组织学观察组织学观察（HEHE染色染色特殊染色特殊染色-组织化学方法）组织化学方法）免疫组化发展概况免疫组化发展概况免疫组化免疫组化发展概况发展概况免疫组化免疫组化的优点的优点相关的免相关的免疫学理论疫学理论免疫组化免疫组化应用范围应用范围染色技术染色技术和注意事和注意事项项免疫组化在病理诊断中的应用开始免疫组化在病理诊断中的应用开始于于2020世纪世纪7070年代，年代，9090年代已经在国外病年代已经在国外病理科列为病理技术室的常规工作，我国理科列为病理技术室的常规工作，我国9090年代开始在病理诊断中逐渐普及。

年代开始在病理诊断中逐渐普及。

免疫组化的发展过程免疫组化的发展过程年年代代研究者研究者事事件件1941年年Coons实用免疫荧光技术实用免疫荧光技术1948年年Fagraeus进一步发展免疫荧光技术进一步发展免疫荧光技术1970年年Sternberger抗体酶标记技术抗体酶标记技术1974年年Taylor证实组织中的浆细胞免疫组化证实组织中的浆细胞免疫组化1975年年Kohler单克隆抗体技术单克隆抗体技术1981年年HsuABC法法90年代以来年代以来SP法，原位杂交法，原位杂交免疫细胞化学的突出优点是：

免疫细胞化学的突出优点是：

1.1.高度的特异性高度的特异性免疫组化免疫组化发展概况发展概况免疫组化免疫组化的优点的优点相关的免相关的免疫学理论疫学理论免疫组化免疫组化应用范围应用范围染色技术染色技术和注意事和注意事项项抗原抗体反应是特异性最强的反应之一，免疫细抗原抗体反应是特异性最强的反应之一，免疫细胞化学所用的抗体必须是特异性强的多价或单价抗体，胞化学所用的抗体必须是特异性强的多价或单价抗体，具有高度的认别能力，在抗原识别上可达到单个氨基具有高度的认别能力，在抗原识别上可达到单个氨基酸的水平，这是其它组织化学方法难以相比的。

酸的水平，这是其它组织化学方法难以相比的。

2.2.敏感性高敏感性高免疫组化免疫组化发展概况发展概况免疫组化免疫组化的优点的优点相关的免相关的免疫学理论疫学理论免疫组化免疫组化应用范围应用范围染色技术染色技术和注意事和注意事项项现代免疫细胞化学采用各种有效方法最大限度现代免疫细胞化学采用各种有效方法最大限度保存细胞和组织内待检物质的抗原性，采用各种增保存细胞和组织内待检物质的抗原性，采用各种增敏方法，使用高度敏感的和高亲和力的抗体，保证敏方法，使用高度敏感的和高亲和力的抗体，保证可检出细胞内超微量的抗原分子，用显微镜和电子可检出细胞内超微量的抗原分子，用显微镜和电子显微镜观察结果，因此，它是在细胞、分子水平或显微镜观察结果，因此，它是在细胞、分子水平或基因水平的检测技术。

基因水平的检测技术。

免疫组化免疫组化发展概况发展概况免疫组化免疫组化的优点的优点相关的免相关的免疫学理论疫学理论免疫组化免疫组化应用范围应用范围染色技术染色技术和注意事和注意事项项3.3.方法步骤统一方法步骤统一若掌握一种技术操作方法步骤，则一通百通。

若掌握一种技术操作方法步骤，则一通百通。

4.4.形态、机能和代谢密切结合形态、机能和代谢密切结合是一种综定性、定位和定量密切结合；

形态、是一种综定性、定位和定量密切结合；

形态、机能和代谢密切结合为一体的研究和检测技术。

机能和代谢密切结合为一体的研究和检测技术。

免疫细胞化学技术在细胞、染色体或亚细胞水免疫细胞化学技术在细胞、染色体或亚细胞水免疫细胞化学技术在细胞、染色体或亚细胞水平原位检测抗原分子，是其它任何生物技术难以达平原位检测抗原分子，是其它任何生物技术难以达平原位检测抗原分子，是其它任何生物技术难以达到和代替的，它能在细胞、基因和分子水平同时原到和代替的，它能在细胞、基因和分子水平同时原到和代替的，它能在细胞、基因和分子水平同时原位显示基因及其表达产物，形成了新的检测系统，位显示基因及其表达产物，形成了新的检测系统，位显示基因及其表达产物，形成了新的检测系统，为生物学、医学和各个领域分子水平的研究与诊断，为生物学、医学和各个领域分子水平的研究与诊断，为生物学、医学和各个领域分子水平的研究与诊断，开拓了广阔的前景。

开拓了广阔的前景。

免疫组化免疫组化发展概况发展概况免疫组化免疫组化的优点的优点相关的免相关的免疫学理论疫学理论免疫组化免疫组化应用范围应用范围染色技术染色技术和注意事和注意事项项免疫细胞化学技术日新月异，以惊人的速度发免疫细胞化学技术日新月异，以惊人的速度发免疫细胞化学技术日新月异，以惊人的速度发免疫细胞化学技术日新月异，以惊人的速度发免疫细胞化学技术日新月异，以惊人的速度发免疫细胞化学技术日新月异，以惊人的速度发展，尤其是和分子生物学的理论和技术日益结合密展，尤其是和分子生物学的理论和技术日益结合密展，尤其是和分子生物学的理论和技术日益结合密展，尤其是和分子生物学的理论和技术日益结合密展，尤其是和分子生物学的理论和技术日益结合密展，尤其是和分子生物学的理论和技术日益结合密切，基因探针、核酸分子杂交技术、原位切，基因探针、核酸分子杂交技术、原位切，基因探针、核酸分子杂交技术、原位切，基因探针、核酸分子杂交技术、原位切，基因探针、核酸分子杂交技术、原位切，基因探针、核酸分子杂交技术、原位PCRPCRPCR技术、技术、技术、技术、技术、技术、核酸杂交和免疫细胞化学双标记技术、电镜杂交技核酸杂交和免疫细胞化学双标记技术、电镜杂交技核酸杂交和免疫细胞化学双标记技术、电镜杂交技核酸杂交和免疫细胞化学双标记技术、电镜杂交技核酸杂交和免疫细胞化学双标记技术、电镜杂交技核酸杂交和免疫细胞化学双标记技术、电镜杂交技术等成为免疫细胞化学技术的新发展成员，标志着术等成为免疫细胞化学技术的新发展成员，标志着术等成为免疫细胞化学技术的新发展成员，标志着术等成为免疫细胞化学技术的新发展成员，标志着术等成为免疫细胞化学技术的新发展成员，标志着术等成为免疫细胞化学技术的新发展成员，标志着免疫细胞化学又进入了一个新的发展阶段。

免疫细胞化学又进入了一个新的发展阶段。

免疫组化免疫组化发展概况发展概况免疫组化免疫组化的优点的优点相关的免相关的免疫学理论疫学理论免疫组化免疫组化应用范围应用范围染色技术染色技术和注意事和注意事项项核酸分子探针核酸分子探针核酸分子探针-杂交杂交杂交-免疫细胞化学放大和显示杂交信免疫细胞化学放大和显示杂交信免疫细胞化学放大和显示杂交信号，可以称为杂交免疫细胞化学。

所以，核酸分子探号，可以称为杂交免疫细胞化学。

所以，核酸分子探针的研制已成为免疫细胞化学实验室中必需的试剂生针的研制已成为免疫细胞化学实验室中必需的试剂生针的研制已成为免疫细胞化学实验室中必需的试剂生产技术，需要学习引进分子生物学的有关技术和设备，产技术，需要学习引进分子生物学的有关技术和设备，产技术，需要学习引进分子生物学的有关技术和设备，建立相应的基因工程实验条件，把基因重组技术、单建立相应的基因工程实验条件，把基因重组技术、单建立相应的基因工程实验条件，把基因重组技术、单克隆抗体技术和免疫细胞化学技术融合在一起，就成克隆抗体技术和免疫细胞化学技术融合在一起，就成克隆抗体技术和免疫细胞化学技术融合在一起，就成为了现代免疫细胞化学的新主体。

更高倍电镜技术和为了现代免疫细胞化学的新主体。

更高倍电镜技术和图像分析，流式细胞仪技术的不断更新，把原位定性、图像分析，流式细胞仪技术的不断更新，把原位定性、图像分析，流式细胞仪技术的不断更新，把原位定性、定位和定量技术提高到了更新的水平，形成了免疫细定位和定量技术提高到了更新的水平，形成了免疫细定位和定量技术提高到了更新的水平，形成了免疫细胞化学发展的两翼，向着生物科学更广阔领域飞翔。

胞化学发展的两翼，向着生物科学更广阔领域飞翔。

免疫组化免疫组化发展概况发展概况免疫组化免疫组化的优点的优点相关的免相关的免疫学理论疫学理论免疫组化免疫组化应用范围应用范围染色技术染色技术和注意事和注意事项项免疫组织、细胞化学的全过程包括：

免疫组织、细胞化学的全过程包括：

抗原提取和纯化抗原提取和纯化抗原提取和纯化抗原提取和纯化免疫动物或细胞融合（单克隆抗体）免疫动物或细胞融合（单克隆抗体）免疫动物或细胞融合（单克隆抗体）免疫动物或细胞融合（单克隆抗体）抗体效价检测和提取抗体效价检测和提取抗体效价检测和提取抗体效价检测和提取标记抗体标记抗体标记抗体标记抗体细胞和组织切片标本的制备细胞和组织切片标本的制备细胞和组织切片标本的制备细胞和组织切片标本的制备免疫细胞化学反应和显色免疫细胞化学反应和显色免疫细胞化学反应和显色免疫细胞化学反应和显色观察和记录结果观察和记录结果观察和记录结果观察和记录结果免疫组化免疫组化发展概况发展概况免疫组化免疫组化的优点的优点相关的免相关的免疫学理论疫学理论免疫组化免疫组化应用范围应用范围染色技术染色技术和注意事和注意事项项由此可见，免疫细胞化学的基本理论是由此可见，免疫细胞化学的基本理论是抗原抗体抗原抗体反应反应，标记化学反应标记化学反应和和呈色化学反应呈色化学反应。

由于免疫细胞。

由于免疫细胞化学是在细胞和组织上进行抗原抗体反应，所以，必化学是在细胞和组织上进行抗原抗体反应，所以，必须熟练掌握显微标本制备的全过程，要求待检标本形须熟练掌握显微标本制备的全过程，要求待检标本形态结构和抗原性保存良好，抗原不从原位扩散或丢失。

态结构和抗原性保存良好，抗原不从原位扩散或丢失。

所以，从事免疫细胞化学的工作者必须了解以下有关所以，从事免疫细胞化学的工作者必须了解以下有关理论及掌握有关细胞和组织学技术。

理论及掌握有关细胞和组织学技术。

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