04白介素6IL6测定试剂盒荧光免疫层析法工艺规程ok文档格式.docx

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二类6840体外诊断试剂

定义、组成及预期用途：

本产品采用高度特异性的抗原抗体反应及免疫层析分析技术,通过夹心法检测原理来体外定量测定人血清、血浆样本中白介素—6（IL-6）的含量。

依据：

《白介素—6（IL-6）测定试剂盒（荧光免疫层析法）产品技术要求》

1.生产工艺流程图

2.试剂卡制备生产工艺

3.质量控制点

4.主要原辅料、包装材料消耗定额、能源消耗定额、物料平衡的计算方法

5.包装要求、标签、说明书（附样本）与产品贮存方法及有效期

6.设备一览表

7.技术安全及劳动保护

1.IL-6生产工艺流程图

2.试剂卡制备生产工艺

2。

1工序一:

样品垫制作

2.2工序二：

ＮＣ膜制备

2.3工序三:

样本稀释液制备　　

4工序四：

贴膜组装

5工序五：

切条

2.6工序六：

压卡装袋

7工序七:

烧数据卡

2.8工序八：

白介素—6（IL—6）测定试剂盒（荧光免疫层析法）试剂盒组装

2.1工序一:

1.1探针稀释液

2.1。

1.1标准配方

名称

试剂名称

配制1000ml使用量

75人份使用量

探针稀释液

三羟甲基氨基甲烷

4228g

0.12ml

调节PH=8.4±

0。

2

蔗糖

150g

牛血清白蛋白

5g

proclin300

0.3ml

1.1。

2配制方法

按照标准配方准确称取三羟甲基氨基甲烷2。

4228g，放入洁净烧杯中，加纯化水800ml，放入1个洁净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH值应在8.4±

0.2范围内，再依次加入蔗糖150g、牛血清白蛋白5g、proclin3000。

3ml，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后,将溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，所有溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml。

混合均匀4～30℃保存备用，有效期7天。

2样品垫处理液

2.1.2。

1标准配方

物料名称

样品垫处理液

十二水合磷酸氢二钠

17.19g

40ml

二水合磷酸二氢钠

1.87g

调节PH=7。

4±

0.2

纯化水定容至1000ml

1.2。

按照标准配方分别准确称取十二水合磷酸氢二钠17.19g、二水合磷酸二氢钠1。

87g，放入洁净烧杯中，加纯化水800ml，放入1个洁净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH值应在7。

0.2范围内，将充分溶解并调好pH的溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶中,用纯化水反复冲洗3次烧杯，所有溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml，混合均匀4～30℃保存备用，有效期7天.

1.3样品垫制作

3。

1样品垫处理

（1）将玻璃纤维平铺到水平槽内，倒入足量样品垫处理液，应让玻璃纤维完全浸泡入样品垫处理液中；

（2）浸泡至少15分钟，保证玻璃纤维完全浸透，玻璃纤维表面无气泡；

（3）玻璃纤维浸透后,将玻璃纤维取出,45度恒温干燥4-6小时;

（4）干燥完成后4～30℃封存备用，有效期7天。

3.2样品垫制作

（1）处理后的样品垫裁切成29mm宽度;

（2）按照兔IgG抗体微球偶联物：

鼠抗人IL—6抗体微球偶联物：

探针稀释液=1:

3：

20的比例配制探针溶液；

（3）按4ul/cm喷量，将配制好的探针溶液均匀喷点到已裁切的样品垫上。

（4）在45度恒温干燥、湿度小于30％的环境下干燥4-6小时。

注：

干燥湿度的控制是本岗位的工艺要点之一，湿度应控制在30%以下。

（5）干燥完成后4~30℃封存备用，有效期14个月。

注:

干燥后应避免长时间放置于4～30℃环境。

2工序二：

2.2.1包被液

1标准配方

包被液

磷酸氢二钾

1.82g

0.06ml

0.22g

调节PH=7.4±

30g

2配制方法

按照标准配方分别准确称取磷酸氢二钾1.82g、二水合磷酸二氢钠0.22g，放入洁净烧杯中，加纯化水800ml,放入1个洁净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH值应在7。

0.2范围内,再加入蔗糖30g，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯,所有溶液倒入上述容量瓶中,用纯化水定容至1000ml，混合均匀4~30℃保存备用，有效期7天。

2.2.2C线包被液

使用包被液将羊抗兔IgG抗体稀释成终浓度为1mg/ml。

充分混合后保存备用.

注:

现用现配

2.3T线包被液

使用包被液将鼠抗人白介素-6抗体稀释成终浓度为1mg/ml。

充分混合后保存备用。

注：

现用现配,配制好的液体肉眼观察应为澄清、无浑浊的液体

4NC膜划线

（1）按左图所示，将PVC底板摆好；

除去PVC底板中间25mm处的保护纸,沿上面保护纸的下边缘,将硝酸纤维素膜（NC膜）贴在该区;

粘贴上下边缘与相邻区上下边缘齐平；

2.粘贴时注意动作轻柔，避免用手直接按压硝酸纤维素膜（NC膜）表面。

（2）贴吸水滤纸:

按27mm的宽度将吸水滤纸切割成条，除去PVC底板上端25mm处的保护纸,将切好的吸水滤纸贴在该区；

吸水滤纸下边缘超出该区2mm覆盖硝酸纤维素膜（NC膜）；

上边缘与底板边缘齐平.

（3）使用划线包被机按照1μl/cm包被量将C线包被液及T线包被液包被至NC膜适当位置；

（4）C、T线区域间距应调节足够宽度以保证检测仪可以显著区分，习惯上C线距NC膜上边缘距离为10mm,CT线之间间距为6mm，T线与NC膜下边缘间距为9mm。

1、贴膜和包被过程应注意避免膜的污染.

2、划线时的湿度条件是NC膜制备的要点之一，湿度应控制在45％~65％.

3、制备前需将C线包被液、T线包被液与硝酸纤维素膜（NC膜）平衡至相同温度。

5NC膜干燥

将包被的NC膜放置在相对湿度≤30％（环境温度18℃~26℃）条件下干燥。

NC膜干燥时间4—6小时。

干燥完成后封存备用,有效期14个月。

干燥时，湿度的控制是本岗位的工艺要点之一，湿度应控制在≤30％.已删除后一句话

3工序三：

样本稀释液制备　

2.3.1标准配方

试剂组分

样本稀释液

82g

12ml

氯化钠

8.76g

调PH至7。

S9

10g

乙二胺四乙酸二钠

Proclin300

3ml

3.2配制方法

按照标准配方分别准确称取磷酸氢二钾1.82g、二水合磷酸二氢钠0.22g、氯化钠8。

76g，放入洁净烧杯中,加纯化水800ml，放入1个洁净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后,使用多参数测试仪测量PH值应在7。

2范围内，再依次加入S910g、乙二胺四乙酸二钠0.5g、Proclin3000。

3ml、牛血清白蛋白5g,置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯,所有溶液倒入上述容量瓶中,用纯化水定容至1000ml，混合均匀后4-30℃保存备用，有效期7天。

2.3。

3分装

将上面配制好的样本稀释液按照160ul/支的装量进行分装，4—30℃条件下保存，有效期12个月.

2.3.4标签打印、贴签

2.3.5质控项目和标准

项目

标准

外观

样本稀释液为无色透明液体，无悬浮物及沉淀物。

净含量

样本稀释液净含量应在标示值的90％~110%之间.

pH

在7.4±

0.2范围内。

2.4工序四:

贴膜组装（湿度≤30％）

（1）贴样品垫：

将样品垫贴在已包被好的NC膜底板28mm处；

样品垫上边缘1mm覆盖NC膜;

下边缘与底板边缘齐平。

（2）贴好后，应如下图所示；

1、避免混淆是本工序的要点,确保指令、样品垫标示和包被好的NC膜三者之间的完全一致.未经清场，不得贴膜组装不同批号、规格、品种的产品。

2、清场在本岗位必须得到强调。

3、湿度的控制是本岗位的工艺要点之一，湿度应控制在湿度≤30％。

2.5工序五：

（1）接通切条机电源，设定切条程序,设定切割宽度为4mm;

（2）将大卡平放入切条机平台轨道中，正面朝上，调节切条机上的螺丝，调节卡槽宽度与大卡宽度相同按操作面板上“连动”键，开始切条;

（4）将所有大卡头尾相接，慢慢放于切条机上，收集切好的条子,除去有标记（不合格）的条子.

湿度的控制是本岗位的工艺要点之一,湿度应控制在≤30%。

6工序六：

（1）装条：

将切好的条子放置在底卡的卡槽内，面板加样孔位置对应样本垫;

不得直接按压中间部位,如条子上出现划痕，按不合格品处理。

（2）盖面板：

将面板与底板对合,用力按压，使面板与底板吻合。

（3）压卡：

按《平板压壳机操作规程》压卡

压卡时应使卡竖向排列在传送带上，并严禁将卡重叠放置。

（4）装袋：

将1份试剂卡、1袋干燥剂装入铝箔袋中，按《封口机操作规程》封好铝箔袋.

（5）标签打印、贴签.4—30℃条件下保存，有效期12个月.

（5）质控项目和标准.

线性范围

试剂的线性范围为（3～1000）pg/mL,在此线性范围内,线性相关系数r应不小于0.990。

准确度

回收率在85%～115％之间.

1、避免混淆是本工序的要点。

确保指令、包装物标示和待包装产品三者之间的完全一致。

未经清场，不得包装不同批号、规格、品种的产品。

3、湿度的控制是本岗位的工艺要点之一，湿度应控制在≤30％。

2.7工序七：

7。

1产品校准品赋值

用IL-6工作校准品检测我公司的IL—6试剂，使用10个浓度点工作校准品，每个浓度点重复检测3次，分别求出测定结果的均值，以浓度点为自变量，以测定结果均值为因变量求出线性回归方程,做曲线。

随机抽取的同一批号的不同浓度的IL-6产品校准品各重复测定10次，分别计算每个浓度的平均值,即为该批IL—6产品校准品的值。

测量不确定度：

U=Uc（y）*K,包含因子K=2，置信水平约95％。

2产品校准品确认

用IL-6工作校准品和IL-6产品校准品同时定标我公司相同批号的IL—6试剂后，分别测定30例血清样本,并计算两组测定数值间的相关系数r及系统偏差，要求相关系数r应不低于0。

975，且系统偏差应不超过15%

若满足以上要求,则该批IL—6产品校准品的值确定；

若无法满足,则需重复赋值过程，以确定该批IL-6产品校准品的值。

7.