届二轮 DNA和蛋白质技术 专题卷全国通用Word文档格式.docx

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③④⑤是多聚酶链式反应扩增DNA片段，③是变性、④是复性、⑤是延伸阶段。

A.①为逆转录过程，该过程需要逆转录酶催化，A错误；

B.④为复性过程，发生的变化是引物与单链DNA链结合形成局部双链，B正确；

C.催化②过程（DNA复制）的酶是DNA聚合酶，催化⑤过程（DNA单链延伸）的酶是耐高温DNA聚合酶（Taq酶），⑤过程进行的温度是70℃，因此催化⑤过程的DNA聚合酶耐高温，而催化②过程的DNA聚合酶不耐高温，C错误；

D.③过程为DNA双链打开的过程，在体外是在高温下进行的，不需要ATP供能，D错误。

考点：

PCR技术的基本操作和应用

2．将经处理破裂后的红细胞混合液以2000r/min速度离心10min后，离心管中溶液分为4层，血红蛋白位于从下至上的（　　）

A.第一层B.第二层

C.第三层D.第四层

【解析】分离血红蛋白溶液时，将搅拌好的混合液转移到离心管中，经过中速长时离心后，可明显看到试管中溶液分为4层，从上往下数，第1层为甲苯层，第2层为脂溶性物质的沉淀层，第3层为血红蛋白水溶液，第4层为杂质沉淀层。

因此，血红蛋白位于从下至上的第二层，故选B。

3．有关PCR技术的下列叙述，不正确的是

A.聚合酶链式反应，是用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术

B.在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似

C.PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行，只需提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸即可

D.PCR一般经历三十多次循环，每次循环均分为变性、复性和延伸三个阶段

【答案】C

【解析】PCR反应是聚合酶链式反应，是用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术，A项正确；

体外扩增DNA片段的技术，在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似，B项正确；

PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行，需要提供DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸，耐热的DNA聚合酶等，故C项错误；

PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性、延伸三个阶段，D项正确。

4．在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,甲、乙、丙、丁四个小组除下表中所列处理方法不同外,其他操作步骤均正确,但实验结果却不同,下列有关叙述不正确的是（）

A.实验材料选择错误的组别是丙

B.沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁

C.甲组实验现象差的原因是25℃的酒精对DNA的凝集效果差

D.乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂

【答案】D

【解析】鸡血、菜花中都含有DNA，而猪是哺乳动物，其成熟的红细胞中不含DNA，因此实验材料选择错误的组别是丙，A正确；

甲、乙、丁的实验材料中都含有DNA，但乙为植物，将植物细胞放入蒸馏水中时，植物细胞不会吸水胀破，且DNA应该用二苯胺鉴定，而不能用双缩脲试剂鉴定，因此沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁，B正确；

甲组实验现象差的原因是25℃的酒精对DNA的凝集效果差，C正确；

乙为植物，将植物细胞放入蒸馏水中时，植物细胞不会吸水胀破，且DNA应该用二苯胺鉴定，而不能用双缩脲试剂鉴定，D错误。

【点睛】解答本题关键能掌握该实验中使用到的各种化学物质的作用，特别要注意DNA难溶于95%酒精溶液。

5．若从植物细胞中提取DNA,发现实验效果不好,如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等,其不可能的原因是（）

A.植物细胞中DNA含量低

B.研磨不充分

C.过滤不充分

D.体积分数为95%冷酒精的量过少

【答案】A

【解析】植物细胞中DNA含量低，则提取的DNA含量不足，但是仍然有少量丝状沉淀物、二苯胺鉴定时也会出现蓝色，A错误；

研磨不充分，导致DNA不能释放，提取DNA太少，可能出现看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等，B正确；

过滤不充分，导致滤液中DNA含量太少，可能出现看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等，C正确；

DNA不溶于酒精，所以95%冷酒精的量过少，提取DNA太少，可能出现看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等，D正确。

6．在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述不正确的是（）

A.调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质

B.用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L，滤取析出物

C.将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色

D.用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤不相同

【解析】DNA在不同浓度的NaCl溶液中DNA溶解度不同，DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度最大，在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小。

酶具有专一性，木瓜蛋白酶可以水解DNA中的蛋白质类杂质，A正确；

DNA的粗提取实验原理是0.14mol/LNaCl溶液中DNA溶解度最低，DNA不溶于95%的冷酒精等，用蒸馏水将2mol/LNaCl溶液浓度调制0.14mol/LNaCl，析出的是DNA，丢弃的是滤液，B正确；

DNA丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂后需要沸水浴才会呈现蓝色，C错误；

植物细胞有细胞壁保护着，所以用菜花做实验材料时，需要研磨，加入食盐和洗涤剂，D错误。

7．在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是

A.利用DNA能溶而蛋白质不溶于冷酒精溶液，可将DNA与蛋白质分离

B.调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质

C.将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色

D.用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同

【解析】利用DNA在不同氯化钠溶解中的溶解度不同，可以通过DNA的反复溶解和析出除去杂质，A错误；

DNA在不同的NaCl溶液中的溶解度不同，调节NaCl溶液浓度可以除去部分杂质；

蛋白酶能水解蛋白质，而对DNA没有影响，因此可以利用木瓜蛋白酶除去部分杂质，B正确；

用二苯胺试剂检测DNA分子的条件是水浴加热，C错误；

植物细胞有细胞壁，所以用菜花做实验材料时，需要加入食盐和洗涤剂进行研磨等步骤，D错误。

【点睛】本题旨在考查学生对DNA分子粗提取与鉴定的实验原理和具体操作的理解和掌握。

8．下列关于现代生物技术应用的叙述，正确的有几项（　　）

①在蛋白质的提取和分离实验中，凝胶色谱法可将不同相对分子质量的蛋白质分离出来

②在PCR中，引物的结构和长度决定DNA子链从5′端向3′端延伸

③在蛋白质的提取和分离实验中，透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质

④在多聚酶链式反应中，TaqDNA聚合酶只能特异性地复制整个DNA的部分序列

A.1B.2

C.3D.4

【解析】凝胶色谱法的原理是根据蛋白质的相对分子质量的大小来分离蛋白质，①正确；

DNA复制时，DNA的合成方向总是从子链的5′端自3′端延伸的，和引物的结构和长短没有关系，②错误；

在蛋白质的提取和分离实验中，透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质，③正确；

在多聚酶链式反应中，TaqDNA聚合酶只能特异性地复制整个DNA的部分序列，④正确，故选C。

9．利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。

图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

下列叙述错误的是

A.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列

B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连

C.退火温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物

D.第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比率为15/16

【解析】用PCR方法扩增目的基因时，要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物（两种），但不必知道基因的全部序列，A正确；

设计引物时，需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连，B正确；

退火的目的是使两种引物通过碱基互补配对与两条DNA单链结合，因此退火温度过高可能引起两种引物不能与两条DNA单链结合，进而导致PCR反应得不到任何扩增产物，C正确；

DNA复制为半保留复制，第四轮循环即DNA复制4次，共形成24＝16个DNA分子，其中含有最初模板链的2个DNA分子含有引物A或引物B，其余14个DNA分子均含有引物A和引物B，所以第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比率为14/16＝7/8，D错误。

10．下列操作过程中需要利用水浴加热的一组是（　　）

①胡萝卜素的萃取　

②橘皮芳香油的提取　

③亚硝酸盐含量的测定　

④DNA的鉴定

A.①②B.②③

C.③④D.①④

【解析】胡萝卜素易溶于石油醚等脂溶性有机溶剂，常采用萃取法提取，因为有机溶剂都是易燃物，所以应避免明火加热，而采用水浴加热的方法，①正确；

橘皮精油的提取一般采用压榨法，不需要水浴加热，②错误；

亚硝酸盐含量的测定不需要水浴加热，③错误；

DNA的鉴定需要用沸水浴加热，④正确，因此正确的是①④，故选D。

二、非选择题

11．[生物一一选修3:

现代生物科技专题]

某重点实验室课题研究组欲将一株野生杂草的抗病基因转给一双子叶农作物。

该农作物含有高茎基因，植株过高容易倒伏，科学家欲通过基因工程操作抑制高茎基因的表达。

结合所学知识分析下列问题：

（1）课题研究组已经获得了抗性基因，欲体外大量扩增该目的基因需采用___________技术，该技术的基本反应过程：

目的基因受热______________后解链为单链，__________与单链相应互补序列结合，然后在___________DNA聚合酶的作用下进行______________。

（2）该基因工程操作的核心是____________。

本研究中，欲将目的基因转入受体细胞，常采用_________法。

（3）科学家将高茎基因的__________基因转入受体细胞，该基因产生的mRNA能够与高茎基因转录出的mRNA互补结合，形成____________，抑制高茎基因的表达。

【答案】PCR变性引物Taq热稳定性延伸基因表达载体的构建农杆菌转化反义双链RNA

【解析】试题分析：

本题结合转基因农作物的培养过程，考查基因工程和PCR技术等相关知识，要求熟记基因工程的原理、工具及操作步骤，掌握各步骤中应注意的细节，在此基础上结合题意作答。

（1）要在体外大量扩增该抗性基因可以采用PCR技术，利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热变性，形成单链并与引物结合，在Taq热稳定性聚合酶的作用下延伸形成DNA。

（2）基因工程操作的四个基本步骤是：

获取目的基因，基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定，其中核心步骤是基因表达载体的构建。

当植物细胞作受体细胞时，一般采用农杆菌转化法将目的基因导入。

（3）科学家将高茎基因的反义基因转入受体细胞，反义基因转录产生的mRNA能够与高茎基因转录出的mRNA互补结合，形成双链RNA，导致核糖体无法与高茎基因转录出的mRN结合，而翻译受阻，从而抑制高茎基因的表达。

12．Ⅰ.在以鸡血为实验材料的DNA进行粗提取的实验中，若需进一步提取杂质较少的DNA，可