高考提升宝典高考生物实验及相关知识汇总 14好学生必备.docx

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高考提升宝典高考生物实验及相关知识汇总14好学生必备

高考生物：

实验及相关知识汇总

实验一观察DNA和RNA在细胞中的分布 

实验原理：

DNA 绿色，RNA 红色 

分布：

真核生物DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。

实验结果:

 细胞核呈绿色,细胞质呈红色.

DNA              甲基绿           绿色RNA              吡啰红           红色

实验二物质鉴定

还原糖 + 斐林试剂～砖红色沉淀

脂肪 + 苏丹III ～橘黄色 

脂肪 + 苏丹IV～红色

蛋白质 + 双缩脲试剂～紫色反应

1、还原糖的检测

（1）材料的选取：

还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。

（2）试剂：

斐林试剂（甲液：

0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：

0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。

（3）步骤：

取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色） 

★模拟尿糖的检测 

1、取样：

正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 

2、检测方法：

斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸 

3、结果：

（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。

4、分析：

因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应

2、脂肪的检测 

（1）材料的选取：

含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。

（2）步骤：

制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 

  ↓ 

  染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精） 

  ↓ 

  制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片） 

  ↓ 

  镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）

3、蛋白质的检测 

（1）试剂：

双缩脲试剂（A液：

0.1g/mL的NaOH溶液，B液：

0.01g/mL的CuSO4溶液） 

（2）步骤：

试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化（紫色） 

考点提示：

（1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些？

   葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。

（2） 还原性糖植物组织取材条件？

   含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：

苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。

（3） 研磨中为何要加石英砂？

不加石英砂对实验有何影响？

   加石英砂是为了使研磨更充分。

不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。

（4）斐林试剂甲、乙两液的使用方法？

混合的目的？

为何要现混现用？

   混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。

（5） 还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为：

浅蓝色棕色砖红色 

（6）花生种子切片为何要薄？

只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。

（7）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？

   切片的厚薄不均匀。

（8）脂肪鉴定中乙醇作用？

洗去浮色。

（9）双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？

先加A液的目的。

怎样通过对比看颜色变化？

   不能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。

实验三观察叶绿体和细胞质流动 

1、材料：

新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片 

2、原理：

叶绿体在显微镜下观察，绿色,球形或椭球形。

用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。

知识概要：

取材制片低倍观察高倍观察 

考点提示：

（1）为什么可直接取用藓类的小叶，而不能直接取用菠菜叶？

      因为藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成。

（2）取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉？

      表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。

    （3）怎样加快黑藻细胞质的流动速度？

最适温度是多少？

       进行光照、提高水温、切伤部分叶片；25℃左右。

    （4）对黑藻什么部位的细胞观察，所观察到的细胞质流动的现象最明显？

    叶脉附近的细胞。

    （5）若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针，则在装片中该细胞的细胞质的实际流动方向是怎样的？

  仍为顺时针。

 （6）是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少数植物的细胞质才流动？

    否，活细胞的细胞质都是流动的。

 （7）若观察植物根毛细胞细胞质的流动，则对显微镜的视野亮度应如何调节？

     视野应适当调暗一些，可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。

 （8）在强光照射下，叶绿体的向光面有何变化？

叶绿体的受光面积较小有一面面向光源。

实验四 用高倍镜观察线粒体和叶绿体

一．实验目的：

使用高倍镜观察叶绿体（原色观察）和线粒体的形态分布。

二．实验原理：

叶绿体的辨认依据：

叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。

线粒体辨认依据：

线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。

健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。

三．实验材料：

观察叶绿体时选用：

藓类的叶、黑藻的叶。

取这些材料的原因是：

叶子薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。

若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。

因为表皮细胞不含叶绿体。

四．方法步骤：

步 骤 注 意 问 题 分 析

1．制片。

用镊子取一片黑藻的小叶，放入载玻片的水滴中，盖上盖玻片。

 制片和镜检时，临时装片中的叶片不能放干了，要随时保持有水状态 否则细胞或叶绿体失水收缩，将影响对叶绿体形态和分布的观察。

2．低倍镜下找到叶片细胞   

3．高倍镜下观察叶绿体的形态和分布   

4．制作人的口腔上皮细胞临时装片 在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液→用牙签取碎屑→盖盖玻片 

5．观察线粒体 蓝绿色的是线粒体，细胞质接近无色。

讨论：

1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？

为什么？

答：

不是。

呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。

2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？

答：

叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。

如叶绿体在不同光照条件下改变方向。

又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。

实验四观察有丝分裂 

1、材料：

洋葱根尖（葱，蒜） 

2、步骤：

（一）洋葱根尖的培养 

（二）装片的制作 

制作流程：

解离→漂洗→染色→制片 

1. 解离:

 药液:

 质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精（1:

1混合液）. 

时间:

3~5min.目的:

 使组织中的细胞相互分离开来. 

2. 漂洗:

 用清水漂洗约10min. 目的:

 洗去药液,防止解离过度,并有利于染色. 

3. 染色:

 用质量浓度为0.01g /mL或0.02g /mL的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）染色3~5min 

目的:

 使染色体着色,利于观察. 

4. 制片:

 将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片. 然后用拇指轻轻地按压载玻片. 目的:

 使细胞分散开来,有利于观察. 

（三）观察 

1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：

细胞呈正方形，排列紧密,有的细胞正在分裂。

2、换高倍镜下观察：

分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。

（注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点）。

其中，处于分裂间期的细胞数目最多。

考点提示：

（1）培养根尖时，为何要经常换水？

增加水中的氧气，防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。

（2）培养根尖时，应选用老洋葱还是新洋葱？

为什么？

应选用旧洋葱，因为新洋葱尚在休眠，不易生根。

（3）为何每条根只能用根尖？

取根尖的最佳时间是何时？

为何？

   因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂；上午10时到下午2时；因为此时细胞分裂活跃。

（4）解离和压片的目的分别是什么？

压片时为何要再加一块载玻片？

解离是为了使细胞相互分离开来，压片是为了使细胞相互分散开来；再加一块载玻片是为了受力均匀，防止盖玻片被压破。

（5）若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么？

压片时用力过大。

（6） 解离过程中盐酸的作用是什么？

丙酮可代替吗？

分解和溶解细胞间质；不能，而硝酸可代替。

（7） 为何要漂洗？

 洗去盐酸便于染色。

（8） 细胞中染色最深的结构是什么？

染色最深的结构是染色质或染色体。

（9）若所观察的细胞各部分全是紫色，其原因是什么？

染液浓度过大或染色时间过长。

（10）为何要找分生区？

分生区的特点是什么？

能用高倍物镜找分生区吗？

为什么？

 因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂；分生区的特点是：

细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状态；不能用高倍   镜找分生区，因为高倍镜所观察的实际范围很小，难以发现分生区。

（11）分生区细胞中，什么时期的细胞最多？

为什么？

 间期；因为在细胞周期中，间期时间最长。

（12）所观察的细胞能从中期变化到后期吗？

为什么？

 不能，因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。

（13）观察洋葱表皮细胞能否看到染色体？

为什么？

不能，因为洋葱表皮细胞一般不分裂。

（14）若观察时不能看到染色体，其原因是什么？

      没有找到分生区细胞；没有找到处于分裂期的细胞；染液过稀；染色时间过短。

实验五比较酶和Fe3+的催化效率  [要学习网一直在为调动你的学习积极性而努力]  

考点提示：

（1）为何要选新鲜的肝脏？

因为在不新鲜的肝脏中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。

（2）该实验中所用试管应选较粗的还是较细的？

为什么？

应选用较粗的，因为在较细的试管中容易形成大量的气泡，而影响卫生香的复燃。

（3）为何要选动物的肝脏组织来做实验，其他动植物的组织的研磨液能替代吗？

因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富；其它动植物组织也含有少量的过氧化氢酶，所以能够替代。

（4）相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液，哪一个催化效果好？

为什么？

研磨液效果好；因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。

（5）滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时，可否共用下个吸管？

为什么？

不可共用，防止过氧化氢酶与氯化铁混合，而影响实验效果。

实验六色素的提取和分离 

1、原理：

叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇——提取色素 

各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素 

2、步骤：

（1）提取色素   研磨 

（2）制备滤纸条 

（3）画滤液细线：

均匀，直，细，重复若干次 

（4）分离色素：

不能让滤液细线触及层析液 

（5）观察和记录:

 结果滤纸条上从上到下依次为:

橙黄色（胡萝卜素）、黄色（叶黄素）、蓝绿色（叶绿素a）、黄绿色（叶绿素

考点提示：

（1）对叶片的要求？

为何要去掉叶柄和粗的时脉？

    绿色、最好是深绿色。

因为叶柄和叶脉中所含色素很少。

（2）二氧