药品质量研究方法验证及稳定性试验课件PPT推荐.pptx

药品质量研究方法验证及稳定性试验课件PPT推荐.pptx

《药品质量研究方法验证及稳定性试验课件PPT推荐.pptx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《药品质量研究方法验证及稳定性试验课件PPT推荐.pptx（94页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

”,需验证的项目和内容（CHP）,分析项目：

鉴别试验、杂质限度检查或定量检查、原料药或制剂中有效成分含量测定，以及制剂中其他成分（如防腐剂等，中药中如残留物、添加剂等）的测定。

药品溶出度、释放度等检査中，其溶出量等的测试方法也应进行必要验证。

验证内容：

准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。

视具体方法拟订验证的内容。

ICH需验证的分析类型（项目）和验证的分析特性（内容）和中国药典相似。

一准确度（1含量测定方法的准确度）,原料药可用已知纯度的对照品或供试品进行测定，或用本法所得结果与已知准确度的另一个方法测定的结果进行比较。

制剂可在处方量空白辅料中，加入已知量被测物（原文可用含已知量被测物的各组分混合物）进行测定。

如不能得到制剂辅料的全部组分，可向待测制剂中加入已知量的被测物进行测定，或用本法所得结果与已知准确度的另一个方法测定结果进行比较。

如已测试并求出了精密度、线性和专属性，在准确度也可推算出来的情况下，此项可豁免验证。

一准确度（2杂质定量测定的准确度）,可向原料药或制剂处方量空白辅料中加入已知量杂质进行测定。

如不能得到杂质或降解产物对照品，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较，如药典标准方法或经过验证的方法。

测定杂质或降解产物含量时，可采用加校正因子的主成分自身对照法。

在无法获得杂质或降解产物的校正因子的情况下，或校正因子可以忽略时，也可采用不加校正因子的主成分自身对照法。

应明确表明单个杂质和杂质总量相当于主成分的重量比（%）或面积比（%）。

一准确度（3中药测定方法的准确度）,可用已知纯度的对照品进行加样回收率测定，即于已知被测成分含量的供试品中再精密加入一定量的已知纯度的被测成分对照品，依法测定。

用实测值与供试品中含有量之差，除以加入对照品量计算回收率。

在加样回收试验中须注意对照品的加入量与供试品中被测成分含有量之和必须在标准曲线线性范围之内；

加入的对照品的量要适当，过小则引起较大的相对误差，过大则干扰成分相对减少，真实性差。

回收率=（C-A）/B100%式中A为供试品所含被测成分量；

B为加入对照品量；

C为实测值。

一准确度（4校正因子的准确度）,对色谱方法而言，绝对（或定量）校正因子是指单位面积的色谱峰代表的待测物质的量。

待测定物质与所选定的参照物质的绝对校正因子之比，即为相对校正因子（简称校正因子）。

参照物质又称为参比物质或替代物；

通常以主成分作为参照物质，也可选择其他成分或加入的任一物质作为参照物质。

校正因子计算法常用于化学药有关物质的测定、中药材及其复方制剂中多指标成分的测定。

校正因子的表示方法很多，本指导原则中的校正因子是指气相色谱法和高效液相色谱法中的相对重量校正因子。

校正因子可采用参照物质对照品和待测物对照品标准曲线斜率比值进行比较获得；

采用紫外吸收检测器时，可将参照物质对照品和待测物对照品在规定的波长和溶剂条件下吸收系数比值进行比较来计算获得。

一准确度（5数据要求）,在规定范围内，取相当于100%浓度水平的供试品，用至少6次的结果进行评价；

或设计3个不同浓度，每个浓度分别制备3份供试品溶液，用9个测定结果进行评价。

化学药，一般中间浓度加入量与待测定成分量之比控制在1:

1左右，高、中、低浓度对照品加入量在1.2:

1，1:

1，0.8:

1左右，应报告已知加入量的回收率（%），或测定结果平均值与真实值之差及其相对标准偏差或可信限；

对于中药，一般中间浓度加入量与所取供试品中待测定成分量之比控制在1:

1左右，高、中、低浓度对照品加入量与所取供试品中待测定成分量之比在1.5:

1，0.5:

1左右，应报告供试品取样量、供试品中含有量、对照品加入量、测定结果和回收率（%）计算值，以及回收率（%）的相对标准偏差（RSD%）或可信限（置信度，又称置信水平，设定值是95%。

）。

对于校正因子，应报告测定方法、测定结果和相对标准偏差（RSD%）。

一准确度（样品中待测成分含量与回收率限度）,二精密度,精密度一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。

在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复性；

在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备测定结果之间的精密度，称为中间精密度；

在不同实验室由不同分析人员测定结果之间的精密度，称为重现性。

含量测定和杂质的定量测定应考虑方法的精密度。

二精密度,1.重复性在规定范围内，取同一浓度（相当于100%浓度水平）的供试品，用至少测定6次的结果进行评价；

或设计3个不同浓度，每个浓度分别制备3份供试品溶液进行测定，用9个测定结果进行评价。

2.中间精密度为考察随机变动因素对精密度的影响，应设计方案进行中间精密度试验。

变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备。

二精密度,3.重现性法定标准采用的分析方法，应进行重现性试验。

例如，建立药典分析方法时，通过协同检验获得重现性结果。

协同检验的目的、过程和重现性结果均应记载在起草说明中。

应注意重现性试验用样品质量的一致性及贮存运输中的环境对该一致性的影响（原文：

应注意重现性试验用样品本身质量的均匀性和贮存运输中的环境影响因素），以免影响重现性结果。

4.数据要求均应报告标准偏差、相对标准偏差和可信限。

样品中待测定成分含量和精密度RSD可接受范围参考表2。

二精密度,样品中待测定成分含量和精密度RSD可接受范围,三专属性,鉴别反应、杂质检査和含量测定方法，均应考察其专属性。

如方法专属性不够，应采用多种不同原理的方法予以补充。

1.鉴别反应应能与可能共存的物质或结构相似化合物区分。

不含被测成分的供试品，以及结构相似或组分中的有关化合物，应均呈负反应。

2.含量测定和杂质测定色谱法和其他分离方法，应附代表性图谱，以说明方法的专属性，并应标明诸成分在图中的位置，色谱法中的分离度应符合要求。

三专属性,在杂质对照品可获得的情况下，对于含量测定，试样中可加入杂质或辅料，考察测定结果是否受干扰，并可与未加杂质或辅料的试样比较测定结果。

对于杂质检查，也可向试样中加入一定量的杂质，考察杂质之间能否得到分离。

在杂质或降解产物不能获得情况下，可将含有杂质或降解产物的试样进行测定，与另一个经验证了的方法或药典方法比较结果。

用强光照射、高温、高湿、酸（碱）水解或氧化的方法进行加速破坏，以研究可能的降解产物和降解途径。

含量测定方法应比对二法的结果，杂质检查应比对检出的杂质个数，必要时可采用光二极管阵列检测和质谱检测，进行峰纯度检查。

四检测限,检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。

鉴别试验和杂质检查法，均应通过测试确定方法的检测限。

常用的方法如下。

1.直观法（原文：

非仪器分析目测法）用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。

2.信噪比法用于能显示基线噪声的分析方法，即把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。

一般以信噪比为3:

1或2:

1时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。

四检测限,3.基于响应值标准偏差和标准曲线斜率法DL=3.3/S（：

响应值的偏差；

S：

标准曲线的斜率）可以通过一系列方法测得，如：

（1）测定空白值的标准偏差；

（2）标准曲线的剩余标准偏差或是截距的标准偏差来代替剩余标准偏差SE（即通过线性回归法计算纵坐标预测值所产生的标准误差），在Excel中的函数是STEYX。

四检测限,4.数据要求上述计算方法获得的检测限数据需用实际样品进行验证。

应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。

五定量限,指试样中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。

杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定方法的定量限。

常用的方法如下。

1.直观法用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地定量测定的最低浓度或量。

2.信噪比法用于能显示基线噪声的分析方法，即把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地定量的最低浓度或量。

一般以信噪比为10:

1时相应浓度或注入仪器的量确定定量限。

五定量限,3.基于响应值标准偏差和标准曲线斜率法QL=10/S（：

（1）测定空白值的标准偏差；

（2）标准曲线的剩余标准偏差或是截距的标准偏差来代替。

4.数据要求上述计算方法获得的定量限数据需用实际样品进行验证。

应附测试图谱，说明测试过程和定量限结果。

六线性,线性系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。

应在规定的范围内测定线性关系。

可用同一对照品（或工作对照品）贮备液经精密稀释，或分别精密称取同一对照品（或工作对照品），制备一系列对照品（或工作对照品）溶液的方法进行测定，至少制备5份测试样品。

以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。

必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。

必要时，还可采用描述浓度-响应关系的非线性模型。

数据要求：

应列出回归方程、相关系数和线性图（或其它数学模型）。

七范围,指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。

范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果和要求确定。

原料药和制剂含量测定，范围一般为测试浓度的80%120%；

制剂含量均匀度检査，范围一般为测试浓度的70%130%,特殊剂型，如气雾剂和喷雾剂，范围可适当放宽；

溶出度或释放度中的溶出量测定，范围一般为限度的20%，如规定了限度范围，则应为下限的-20%至上限的+20%；

杂质测定，范围应根据初步实际测定数据，拟订为规定限度的20%。

如果含量测定与杂质检查同时进行，用百分归一化法，则线性范围应为杂质规定限度的-20%至含量限度（或上限）的+20%。

七范围,在中药分析中，范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果及要求确定。

对于有毒的、具特殊功效或药理作用的成分，其验证范围应大于被限定含量的区间。

溶出度或释放度中的溶出量测定，范围一般为限度的20%。

校正因子测定时，范围一般应根据其应用对象的测定范围确定。

八耐用性,耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为所建立的方法用于常规检验提供依据。

开始研究分析方法时，就应考虑其耐用性。

如果测试条件要求苛刻，则应在方法中写明，并注明可以接受变动的范围，可以先采用均匀设计确定主要影响因素，再通过单因素分析等确定变动范围。

典型的变动因素有：

被测溶液的稳定性、样品的提取次数、时间等。

液相色谱法中典型的变动因素有：

流动相的组成和p