届苏教版基因工程单元测试文档格式.docx
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2．限制性内切酶HindⅢ和XhoⅠ的识别序列及切割位点分别为A↓AGCTT和C↓TCGAG，下列相关叙述正确的是（ ）
A．两种限制酶的识别序列在DNA分子中出现的概率不同
B．两种限制酶切割形成的黏性末端都是—AGCT
C．分别用这两种酶切割目的基因和质粒后能形成重组质粒
D．实验中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果
选D 限制性核酸内切酶HindⅢ和XhoⅠ的识别序列均为6个脱氧核苷酸，所以在DNA中出现的概率相同，均为1/46；
两者切出的黏性末端分别为—AGCT和—TCGA；
由于黏性末端不同，故用两种酶切割目的基因和质粒后不能形成重组质粒。
3．用限制酶EcoRⅠ、KpnⅠ和二者的混合物分别降解一个1000bp（1bp即1个碱基对）的DNA分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，凝胶电泳结果如下图所示。
该DNA分子的酶切图谱（单位：
bp）正确的是（ ）
选C 根据限制酶KpnⅠ切割后，降解产物只有一种，推测该DNA分子是环状DNA，且只有1个KpnⅠ识别位点。
根据限制酶EcoRⅠ切割后，降解产物为200bp和800bp，推测该DNA分子上有2个EcoRⅠ识别位点。
再根据限制酶EcoRⅠ和KpnⅠ混合切割，得到200bp和400bp两种片段，确定选项C的图谱是合理的。
4．（2017·
泰州一模）将经过扩增的DNA和质粒用相同的限制酶进行如下图所示的切割，电泳得到纯净的B片段和D片段，将两种片段置于适宜的缓冲液中用DNA连接酶处理。
如果只考虑两个片段的环状连接，则能形成不同核苷酸序列的环状DNA的种类是（ ）
A．6种 B．3种
C．2种D．1种
选A 只考虑两个片段的环状连接，能形成的环状DNA有B片段与B片段同向连接的、B片段与B片段反向连接的、D片段与D片段同向连接的、D片段与D片段反向连接的、B片段与D片段同向连接的及B片段与D片段反向连接的，共6种。
5．（2017·
扬州一模）下列关于核酸分子杂交和抗原—抗体杂交的叙述，正确的是（ ）
A．核酸分子杂交是指两条脱氧核苷酸链的杂交
B．抗原—抗体杂交的原理为碱基互补配对原则
C．核酸分子杂交可检测目的基因的存在和转录
D．抗原—抗体杂交常以目的基因产物作为抗体
选C 核酸分子杂交可以是两条脱氧核苷酸链的杂交，也可以是DNA单链和RNA的杂交；
抗原—抗体杂交的原理是抗体能与对应的抗原发生特异性结合；
核酸分子杂交可检测目的基因的存在和转录；
抗原—抗体杂交中目的基因产物常作为抗原。
6．（2018·
启东中学段考）如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用效果的顺序，正确的是（ ）
A．①④②③ B．①②④③
C．①②③④D．①④③②
选A ①是将一个DNA切成互补的两个黏性末端，由限制性内切酶发挥作用；
DNA聚合酶是在DNA复制时发挥作用，④是DNA复制；
DNA连接酶是将两个DNA片段连接在一起（②）；
解旋酶是将DNA分子双链解旋成两条互补的单链（③）。
7．（2018·
海安期中）从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1。
目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是（ ）
A．合成编码目的肽的DNA片段
B．构建含目的肽DNA片段的表达载体
C．依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽
D．筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽
选C 已经获得该目的基因片段，不需要合成编码目的肽的DNA片段，A错误；
需要构建含目的肽的DNA片段的表达载体，但这不是第一步，B错误；
蛋白质工程的第一步是根据蛋白质的功能，设计P1氨基酸序列，从而推出其基因序列，C正确；
该基因表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1，目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，而目的多肽是抗菌性强但溶血性弱，所以必需对其改造，保持其抗菌性强，抑制其溶血性，D错误。
8．（2018·
泰兴期中）微生物常被用于基因工程中。
下列相关叙述正确的是（ ）
A．从耐热的细菌中获取PCR所需的DNA连接酶
B．大肠杆菌、酵母菌等是基因工程常用的载体
C．作为载体的DNA分子需具有合成抗生素的基因
D．常利用土壤农杆菌将目的基因导入植物细胞
选D 从耐热的细菌中获取PCR所需的DNA聚合酶，A错误。
基因工程中常用的载体是质粒、动植物病毒、噬菌体的衍生物，B错误。
作为载体的DNA分子需要有抗生素抗性基因，便于后期的筛选，C错误。
常利用土壤农杆菌将目的基因导入到双子叶植物细胞中，D正确。
9．下面为利用基因工程培育抗虫植物的示意图。
以下相关叙述，正确的是（ ）
A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与
B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上
C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状
D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异
选D 构建重组质粒需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶，不需要DNA聚合酶；
含重组Ti质粒的农杆菌侵染植物细胞后，重组Ti质粒的TDNA整合到受体细胞的染色体上，而不是重组Ti质粒整合到受体细胞的染色体上；
导入受体细胞的目的基因表达后，转基因植株方能表现出相应性状，若目的基因在受体细胞中不表达，转基因植株不能表现出相应性状；
⑤表现出抗虫性状则表明该植株细胞发生了基因重组，基因重组是可遗传变异。
10．（2017·
南京三模）根据某基因上游和下游的碱基序列，设计合成了用于该基因PCR的两段引物（单链DNA）。
引物与该基因变性DNA（单链DNA）结合为双链DNA的过程称为复性。
下图是两引物的Tm（引物熔解温度，即50%的引物与其互补序列形成双链DNA分子时的温度）测定结果，下列叙述错误的是（ ）
A．通常引物1和引物2不能有碱基互补配对关系
B．两引物分别是子链延伸的起点，并可以反复利用
C．若两引物的脱氧核苷酸数相同，推测引物2的GC含量较高
D．复性所需温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度等因素
选B 引物1和引物2不能有碱基互补配对关系，以免二者结合，A正确；
两引物参与形成子链，不能反复利用，B错误；
若两引物的脱氧核苷酸数相同，引物2的熔解温度较高，推测GC含量较高，C正确；
综上所述，复性所需温度与时间取决于引物的长度、碱基组成及其浓度等因素，D正确。
11．（2018·
南通模拟，多选）科学家利用基因工程技术将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高。
在培养转基因番茄的过程中，下列操作合理的是（ ）
A．可用PCR技术或逆转录法获得抗冻蛋白基因
B．利用选择性培养基对构建的基因表达载体直接筛选
C．利用农杆菌转化法将基因表达载体导入番茄体细胞
D．在低温条件下筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄植株
选ACD 利用逆转录法可获得cDNA；
构建的基因表达载体不可以直接在选择培养基上进行筛选，需要先导入受体细胞中再进行筛选；
农杆菌转化法是目的基因导入受体细胞的常用方法；
利用低温条件对耐寒番茄进行个体性状水平的检测，筛选出耐寒番茄植株。
12．（2017·
南通三模，多选）科研人员先分别PCR扩增尿酸酶基因和原核生物胞外蛋白信号肽基因（编码的肽链能引导新合成的蛋白质转移、分泌），再将它们拼接形成融合基因，并导入大肠杆菌生产尿酸酶。
相关叙述正确的是（ ）
A．扩增两类基因时可以通过设计引物来控制两类基因的拼接方向
B．构建融合基因的目的是使大肠杆菌能合成尿酸酶并分泌到细胞外
C．融合基因导入大肠杆菌前需构建基因表达载体，以保证目的基因正常表达和遗传
D．在导入融合基因前，应先用NaCl处理大肠杆菌，使其变为感受态细胞
选ABC 每个基因的两端都有启动子和终止子，它会调节基因的表达，因此扩增两类基因时可以通过设计引物来控制两类基因的拼接方向，以便它们都能正常表达，A
正确；
根据题干中原核生物胞外蛋白信号肽基因的功能可知，构建融合基因的目的是使大肠杆菌能合成尿酸酶并分泌到细胞外，B正确；
融合基因导入大肠杆菌前需构建基因表达载体，以保证目的基因正常表达和遗传，C正确；
在导入融合基因前，应先用CaCl2处理大肠杆菌，使其变为感受态细胞，D错误。
二、非选择题
13．（2017·
常州一模）我国科学家屠呦呦因在青蒿素研究中的特殊贡献荣获2015年诺贝尔生理学或医学奖。
青蒿素是青蒿植株的次级代谢产物，其化学本质是一种萜类化合物，其生物合成途径如图1所示。
正常青蒿植株的青蒿素产量很低，难以满足临床需求，科学家为了提高青蒿素产量，将棉花中的FPP合成酶基因导入了青蒿植株并让其成功表达，获得了高产青蒿植株，过程如图2所示。
（1）研究人员从棉花基因文库中获取FPP合成酶基因后，可以采用________技术对该目的基因进行大量扩增，该技术除了需要提供模板和游离的脱氧核苷酸外，还需要提供________、__________________等条件。
（2）图2中的①为________________，形成过程中需要________________等酶；
棉花FPP合成酶基因能够和质粒连接成①的主要原因是_____________________________________。
（3）若②不能在含有抗生素Kan的培养基上生存，则原因是_______________。
（4）由题意可知，除了通过提高FPP的含量来提高青蒿素的产量外，还可以通过哪些途径来提高青蒿素的产量？
（试举一例）________________________________。
（1）PCR技术的实质是DNA复制，需要热稳定的DNA聚合酶、模板、引物和能量等。
（2）①是重组质粒（即基因表达载体），需要先利用限制酶切割棉花FPP合成酶基因和质粒，再用DNA连接酶连接。
能够连接的原因是具有相同的黏性末端。
（3）若重组质粒没有导入农杆菌，则农杆菌不含抗生素Kan抗性基因，不能在含有抗生素Kan的培养基上生存。
（4）由图1可以看出，提高青蒿素的产量可以通过提高FPP的含量或增强ADS基因的表达来实现，也可以通过抑制SQS基因的表达，从而抑制FPP形成其他萜类化合物来实现。
答案：
（1）PCR 引物 热稳定的DNA聚合酶
（2）基因表达载体（重组质粒） 限制酶和DNA连接酶 切割后具有相同的黏性末端 （3）重组质粒没有导入农杆菌
（4）抑制SQS基因的表达（或增强ADS基因的表达）
14．（2017·
盐城三模）如图为培育转基因抗虫棉的两种途径示意图，请据图回答问题：
（1）与图2相比，图1的优点是筛选出的目的植株_____________________。
（2）构建重组质粒时，需要使用的限制酶是___________________，还需要使用的工具酶是_____________________。
（3）图中过程①获取的完整的重组质粒，除了图中标出的特殊DNA片段外，还应该有_________________________等部分；
过程②常用的方法是____________
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