天然药物化学实验指导书详解Word文档格式.docx

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一、实验目的：

1.了解显微镜的基本构造并掌握显微镜的正确使用方法和保养。

2.掌握撕取表皮的制片方法。

3.掌握植物细胞的基本构造。

二、实验仪器与材料

1.仪器：

生物显微镜。

2.用具：

镊子、刀片、解剖针、载玻片、盖玻片、玻璃皿、吸水纸、擦镜纸、棉布块。

3.材料：

洋葱鳞茎的磷叶或大葱磷叶。

4.试液：

蒸馏水、稀碘液、10%硝酸钾溶液。

三、实验内容：

（一）显微镜的构造

1.机械部分次部分是显微镜的骨架，是安装光学部分的基座。

包括：

镜座、镜柱、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调焦装置等。

（1）基座是显微镜的底座，支持整个镜体，使显微镜放置平稳。

（2）基柱镜座上面直立的短柱，支持镜体上部的各部分。

（3）镜臂弯曲如臂，下连镜柱，上连镜筒，为取放镜体时手握的部分。

直筒显微镜的镜臂下端与镜柱连接处有一活动关节，可使镜体在一定范围内后倾，便于观察。

（4）镜筒上端置目镜，下端与物镜转化器相连。

（5）物镜转换器连接于镜筒下端的圆盘，可自由转动，盘子有3－4个安装物镜的螺旋孔。

当旋转转换器时，物镜即可固定在使用的位置上，保证物镜与目镜的光线合轴。

（6）载物台放置玻片标本的平台，中央有一通光孔，两侧有压片夹或机械移动器，既可固定玻片标本，也可以前后左右各方向移动。

（7）调焦装置调节物镜和标本之间的距离，得到清晰的物像。

在镜臂两侧有粗细调焦螺旋各1对，旋转时可使镜筒上升或下降，大的一对为粗调焦螺旋，旋转一圈可使镜筒移动2mm左右。

小的一对为细调焦螺旋，旋转一圈可使镜筒移动0.1mm。

（8）聚光器调节螺旋镜柱一侧，旋转它时可使聚光器上下移动，借以调节光线德鄂强弱。

2.光学部分包括：

物镜、目镜、反光镜、聚光器

（1）物镜安装在镜筒前端物镜转化器上的透镜。

利用光线使被检标本第一次成像，因而直接关系和影响成像的质量，对分辨力有着决定性的影响。

物镜分为低倍、高倍、油浸物镜。

物镜放大倍数愈高，物镜下面透镜的表面与盖玻片的距离愈小，所以使用时应该特别注意。

（2）目镜安装在镜筒上端，可使物镜的成像进一步放大。

目镜上刻有放大倍数，如5×

、10×

、16×

等。

（3）反光镜普通光学显微镜的取光设备。

圆形两面镜，一面平面镜，能反光，另一面为凹面镜，有反光和汇集光线的作用。

（4）聚光器安装在载物台下，由聚光镜和彩虹光圈组成，作用是将光源经过反光镜反射来的光线聚集于标本上，从而得到较强的照明，使物像获得明亮清晰的效果。

聚光器可以上下调节，以改变视野的亮度，使焦点落在被检标本上，从儿得到适度亮度。

彩虹光圈可以放大或缩小，以此来影响成像的分辨力和反差。

调节操作杆，可调节光圈大小，控制通光量。

（二）显微镜的使用方法

1.取镜和放置取镜时应右手握住镜臂，左手平托镜座，保持镜体直立，严禁用单手提镜走，防止某些光学部分脱落损坏。

2.对光

3.低倍镜的使用观察任何标本都必须先用低倍镜，因为低倍镜的视野大，容易发现目标和确定要观察的部位。

（1）放置切片

（2）调节焦距（3）低倍镜的观察

4.高倍镜的使用在低倍镜下选好目标，转动物镜转换器，高倍观察（因高倍镜工作距离很小，操作要格外小心，防止镜头碰见玻片）。

正常情况下，只要调节细调螺旋，即可见到清晰的物像。

5.油镜的使用

6.显微镜使用后整理观察结束后，应先升高镜筒，取下玻片，转动物镜转换器，使物镜镜头与通光孔错开，并将反光镜直立。

（三）显微镜的保养

防潮、放热、防腐蚀、防撞击

注意：

不能用手指或纱布等粗糙物擦试镜头，必须用试镜纸轻擦或用镜头毛刷拂取灰尘。

（四）植物学基本实验技术及细胞的基本结构

1.洋葱内表皮细胞的制片

取洋葱磷茎，镊取3－5mm大小的内表皮，放于加蒸馏水的载玻片上，用解剖针展平，将盖玻片沿水滴一侧慢慢盖下，防止产生气泡，用吸水纸沿盖玻片一侧吸掉多余的水分。

2.观察洋葱内表皮细胞基本构造

将制好的洋葱内表皮装片置于显微镜下观察，洋葱内表皮细胞为长方形，排列紧密，没有细胞间隙。

换用高倍镜可见：

细胞壁、细胞质、细胞核和液泡

（1）细胞壁是植物细胞所特有的结构。

洋葱表皮细胞的细胞壁为无私透明的，镜下可见初生壁和相邻细胞所共有的胞间层。

（2）细胞质年幼细胞中，细胞质呈现细小颗粒分布均匀，细胞核位于中央；

成熟细胞中，细胞质为紧贴细胞壁的薄薄一层，细胞核位于边缘。

（3）细胞核为半透明且有较强折光性的小物体。

细胞核内可见1－3个核仁。

（4）液泡年幼细胞中，液泡分散存在，成熟细胞中一个大液泡占据细胞中央绝大部分，细胞质、细胞核则靠近细胞壁边缘。

3.碘试液染色观察

装片盖玻片一侧滴稀碘液，进行洋葱内表皮细胞染色，观察可见细胞核呈深黄色，细胞质呈浅黄色，液泡未染色。

4.细胞的质壁分离

在显微镜下观察完细胞的正常形态后，用吸水纸在盖玻片的一测将清水吸去，而同时在盖玻片的相反一侧用滴管滴加10%硝酸钾溶液，注意观察细胞中的变化，可见到原生质体，开始由细胞角隅脱离细胞壁，而后逐渐脱离全部细胞壁，最后整个原生质体缩成球形一团，这就是质壁分离现象。

四、作业

1.写出显微镜各部分构造的名称

2.绘制洋葱表皮细胞图及质壁分离图

3.为什么植物细胞会出现质壁分离现象？

这种现象在生产实践中有什么意义？

实验二植物细胞后含物——淀粉粒、草酸钙结晶体

1．掌握中草药粉末的临时制片方法。

2．掌握淀粉粒的形态、结构、类型和检识方法。

3．掌握草酸钙结晶体的形态、类型和检识方法。

1．仪器：

生物显微镜

2．用具：

镊子、解剖针、牙签、载玻片、盖玻片、玻璃皿、吸水纸、火柴、擦镜纸、棉布块、酒精灯、刀片。

3．材料：

马铃薯块茎、小麦粉、大黄粉末、半夏粉末、甘草粉末、牛膝粉末。

4．试液：

蒸馏水、水合氯醛试液、稀甘油、稀碘液、甘油、醋酸液、酒精。

三、实验内容:

（一）淀粉粒的观察

1．观察马铃薯块茎的淀粉粒

（1）操作：

取马铃薯块茎一小块，用刀片刮取少许汁液，置于载玻片水滴中，滴稀甘油一滴，加盖玻片，制成临时装片，置显微镜下观察。

（2）观察：

可见到各种大小且成卵圆形或椭圆形颗粒状的淀粉粒。

每一个淀粉粒中，可见到明暗交替的层纹，在层纹围绕的中心有一个特别明亮的脐点，脐点位于卵圆状淀粉粒较窄的一端。

马铃薯淀粉粒多为单粒淀粉，且脐点多为偏心型，少有复粒淀粉，偶见半复粒淀粉。

在观察过的淀粉粒装片上，加一滴碘液于盖玻片的一边，使碘液逐渐进入盖玻片下，立即在显微镜下观察，淀粉粒变成蓝紫色。

2．观察半夏粉末、小麦粉末的淀粉粒时，取粉末少许，置载玻片上的水滴中，加盖玻片，制成临时水装片，放在显微镜下观察，注意淀粉粒的形状、大小及脐点的形状。

（二）草酸钙结晶体的观察

实验方法：

采用中草药粉末的临时制片法。

此法适用于干燥中草药粉末，即取药材粉末少许，放在载玻片的中央，滴加水合氯醛溶液2～3滴，用解剖针调和均匀，在酒精灯上以小火微微加热约1分钟，到江津煮沸为止（可反复加热三次），加热过程中，由于蒸发的关系可随时添加水合氯醛溶液，以免蒸干，待载玻片冷却时，再加稀甘油1～2滴，用解剖针拌匀，加盖玻片，制成临时装片。

1．簇晶：

取大黄根茎粉末的水合氯醛透化片，置显微镜下观察，可见分散的大型星状结晶，是由许多三棱形结晶的基部集合而成。

2．方晶：

取甘草根粉末（或黄柏粉末）的水合氯醛透化片，置显微镜下观察，可见纤维束旁侧的薄层细胞中含有方晶，其形状有方形、棱形、八面体或长方形。

3．针晶：

取半夏球茎粉末的水合氯醛透化片，置显微镜下观察，可见细针状结晶，呈束状存在于粘液细胞中。

4．砂晶：

取牛膝根粉末的水合氯醛透化片，置显微镜下观察，可见随处散在的略呈箭头形的极细结晶，有的薄层细胞内充满砂晶。

1．绘制马铃薯块茎中观察到的淀粉粒，并注明脐点和层纹。

2．绘制半夏、小麦淀粉粒各3～5粒。

3．绘制大黄簇晶、甘草方晶、半夏针晶、牛膝砂晶图。

实验三保护组织和分泌组织

一、实验目的

1．掌握气孔、腺毛、非腺毛、油细胞及油室的特征。

2．掌握撕取表皮及徒手切片的方法。

3．熟悉乳管、树脂道的形状特征。

镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、玻璃皿、吸水纸、火柴、擦镜纸、棉布块、酒精灯、刀片、毛笔。

薄荷叶、生姜、桔皮、人参粉末。

蒸馏水、水合氯醛试液、稀甘油、酒精。

三、实验内容

1．观察薄荷叶中的直轴式气孔、腺毛、腺鳞、非腺毛

采用撕取表皮法。

用镊子撕取薄荷叶的下表皮一小片，将外表皮向上，置于载玻片上的蒸馏水中，展平，加盖玻片。

将制好的标本片置显微镜下观察，可见：

①表皮细胞及气孔：

可见表皮是由多数不规则的细胞镶嵌连接而成，细胞壁呈波状弯曲，细胞内不含叶绿体。

表皮细胞之间有一些小孔，每一小孔由两个肾形的保卫细胞对合而成，此孔即为气孔。

保卫细胞中含叶绿体，与保卫细胞相连的表皮细胞为副卫细胞。

气孔轴式多为直轴式。

②腺毛：

腺毛较小，由单细胞的腺头和单细胞的腺柄构成，腺头细胞中常充满黄色挥发油。

③腺鳞：

腺鳞较多，腺头大而明显，扁圆球形，常由8个分泌细胞组成，角质层囊内贮有黄色挥发油，腺柄极短，为单细胞。

④非腺毛：

非腺毛较大，顶端尖锐，由3～8个细胞单列构成，也有单细胞的，细胞壁较厚。

如果上述观察效果不好，可将标本片的盖玻片取下，用吸水纸吸取蒸馏水，然后加水合氯醛试液一滴，微热透化，用稀甘油装片观察。

2．观察生姜根茎中的油细胞

操作方法：

采用徒手切片法：

此法操作简便迅捷，能保持细胞及其含有物的原有形态，且利于进行各种显微化学反应。

将姜的根状茎切成长和宽各0.5cm，高1～2cm的长方条，用左手的拇指和食指捏紧，拇指略低于食指，长方条上端露出1～2mm，两臂夹紧，刀片放平，刀口朝向怀内，从材料的左前方向右后方作水平方向的连续拉切，拉切时速度宜快，要用臂力。

切下的薄片应尽快用毛笔刷入盛水的玻璃皿中，选择其中最薄者用蒸馏水装片。

将制好的标本片置显微镜下观察，可见薄壁组织中，有些细胞较大，充满淡黄色油滴，散在或成群，即是油细胞。

3．观察桔皮中的油室

采用徒手切片法。

取桔皮横切薄片，制成水装片或水合氯醛液微热透化装片，置显微镜下观察，可见一些大而椭圆形的腔隙，其周围有被溶解破坏的分泌细胞，该腔隙就是油室。

4．观察人参中的树脂道

取人参粉末，制成水合氯醛透化片，置显微镜下观察，树脂道碎片呈管状，内含黄色滴状或块状分泌物。

1．绘制薄荷叶表皮中的气孔、非腺毛、腺毛、腺鳞。

2．绘制生姜根状茎中的油细胞。

3．绘制桔皮中的油室。

4．绘制人参中的树脂道。

实验四机械组织和输导组织

1．掌握机械组织纤维、石细胞的特征。

2．了解导管和管胞，筛管和伴胞的形状。

镊子、刀片、解剖针、载玻片、盖玻片、玻璃皿、酒精灯、火柴、吸水纸、擦镜纸、棉布块。

肉桂粉末、甘草粉末、红梨、薄荷茎