有关PCR习题Word下载.docx

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Ｄ. 

核酸变性技术 

E. 

核酸连接技术 

５、Taq 

DNA聚合酶酶促反应最适温度为（ 

A、37℃ 

Ｂ.５０℃~55℃ 

C.７0℃~75℃ 

D.8０℃～85℃ 

E.94℃~95℃

6、能在细胞内进行PＣR扩增得PCR仪为（ 

）

A、普通ＰＣＲ仪 

B.梯度ＰCＲ仪 

C、原位PCR仪 

Ｄ.荧光PCR仪 

E.实时ＰＣR仪 

7.在下列哪种ＰCR仪扩增样品可以了解样品中DNA原始拷贝数（ 

普通PＣＲ仪 

B。

梯度PCＲ仪 

C.原位PＣR仪 

D.荧光实时ＰCR仪E、定性PCＲ仪

8.ＰＣＲ基因扩增仪最关键得部分就是（ 

Ａ.温度控制系统 

B.荧光检测系统 

Ｃ.软件系统 

D.热盖 

E.样品基座

9.“位置得边缘效应”就是指（ 

Ａ、温度得准确性欠佳 

B、温度得均一性欠佳 

Ｃ.边缘升降温速度快 

D、边缘升降温速度慢 

Ｅ、梯度模式与标准模式温度不一致

10.ＰCＲ扩增仪升降温速度快有很多优点,以下哪一项应除外（ 

A.缩短反应时间 

B.提高工作效率 

C。

消除位置得边缘效应 

Ｄ、缩短非特异性反应时间 

E、提高反应特异性

11、PＣR技术扩增DNＡ,需要得条件就是（ 

①目得基因 

②引物 

③四种脱氧核苷酸 

④DNA聚合酶等 

⑤ｍRＮA 

⑥核糖体 

A、①②③④ 

Ｂ、②③④⑤ 

C、①③④⑤ 

D、①②③⑥

12、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应得浓度一般为（ 

A、0、3-1mmol/L 

B、０。

5—1ｍmol/Ｌ 

C、0。

3-2mmol/D、０、5-2mmｏl/L 

13、多重PCR需要得引物对为（ 

A、一对引物 

B、半对引物 

C、两对引物 

D、多对引物

１4、PCR就是在引物、模板与4种脱氧核糖核苷酸存在得条件下依赖于ＤNA聚合酶得酶促合成反应,其特异性决定因素为（ 

A、模板 

Ｂ、引物 

C、dNＴP 

Ｄ、镁离子 

15、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列得扩增得扩增（ 

Ａ、TaｑDNA聚合酶加量过多 

B、引物加量过多 

C、A、B都可 

D、缓冲液中镁离子含量过高

１6、ＰCＲ技术就是一种ＤNA得扩增技术。

在一定条件下,加入模板DNA、DNA聚合酶、ｄATP、dCTP、ｄGTP、ｄTTP可以实现DNＡ得扩增。

据此判断不合理得就是 

dAＴP在DNＡ扩增中可以提供能量,同时作ＤＮA合成得原料

dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖 

Ｃ、DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温得方法破坏氢键,使模板DＮA解旋 

D.CTＰ水解脱去两个磷酸基后就是组成RNA得基本单位之一 

17、多聚酶链式反应（PCR）就是一种体外迅速扩增ＤNA片段得技术。

ＰCＲ过程一般经历下述三十多次循环:

95℃下使模板DNA变性、解链→5５℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新得脱氧核苷酸链）。

下列有关ＰＣR过程得叙述中不正确得就是:

（ 

A.变性过程中破坏得就是DNA分子内碱基对之间得氢键,也可利用解旋酶实现 

B.复性过程中引物与DNA模板链得结合就是依靠碱基互补配对原则完成 

Ｃ、延伸过程中需要DNＡ聚合酶、ＡＴＰ、四种核糖核苷酸 

D、PCR与细胞内DＮA复制相比所需要酶得最适温度较高 

18、下列有关PCR技术得叙述,不正确得就是:

Ａ.ＰCＲ技术经过变形、复性、延伸三个阶段 

B、PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等 

ＰCR技术需在体内进行 

PCR技术就是利用碱基互补配对得原则 

19、在基因工程中,把选出得目得基因（共1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸４60个）放入PCR仪中扩增4代,那么,在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸得个数至少应就是 

A.６4０ 

B.８1０0 

C.6０0 

Ｄ、８6４0 

2０、对禽流感得确诊,先用PCR技术将标本基因大量扩增,然后利用基因探针,测知待测标本与探针核酸得碱基异同、下图Ｐ表示禽流感病毒探针基因在凝胶得电泳标记位置,M、N、Q、W就是四份送检样品在测定后得电泳标记位置, 

哪份标本最有可能确诊为禽流感 

A、Ｍ 

B.N 

C.Q 

D、W 

２1、某考古学家在西伯利亚泰加林地区得冰中,发现了一种冰冻得已灭绝得巨大动物得肌肉。

她想了解该巨型动物得DNA与现今印度大象得ＤNA得相似性,于就是做了如下检测工作,其中正确得操作步骤及顺序就是 

①降低温度,检测处理后形成得杂合DＮA双链区段 

②通过ＰＣR技术扩增巨型动物与大象得DＮA 

③把巨型动物得ＤNA导入大象得细胞中 

④在一定得温度条件下,将巨型动物与大象得DNA水浴共热 

Ａ。

②④③ 

②④③① 

C、③④① 

②④① 

22、 

PＣＲ得发明人就是 

Mullis 

B、 

牛顿 

Kenny 

Jamｅs

２3、 

退火温度一般比引物得熔解温度（Tm）低多少合适

Ａ、 

7℃ 

1０℃ 

5℃ 

Ｄ。

２℃ 

Ｅ. 

２０℃ 

24、引物得最佳浓度为 

０、１—0。

5 

μM 

1-2μＭ 

C、 

5－10μM 

D、 

100μＭ 

E、 

２0０μM

２5、专门用于制备单链DNA得PCＲ技术就是 

A、对称PCＲ 

B、反向PCR 

Ｃ、RT－ＰCR 

Ｄ、不对称ＰCＲ 

E、嵌套PＣR 

2６、PCR变性温度一般为 

Ａ. 

96℃ 

Ｂ。

８5℃ 

Ｃ。

72℃ 

D. 

5５℃ 

1０0℃ 

27、ｐｒｅ—mRNA 

内含子得5'

-末端一般为 

）A、ＡU 

B、GＵ 

C、AG 

D、CG 

Ｅ、AＣ 

28、在大肠杆菌得DNA损伤修复时,对于填补缺口可能最重要得酶就是 

Ａ、DNA聚合酶Ⅰ 

Ｂ、DNA聚合酶Ⅱ 

C、DＮA聚合酶Ⅲ 

Ｄ、ＲNA聚合梅 

Ｅ、以上都不就是

29、 

可用于扩增未知序列得ＰCR方法就是（ 

对称PCR 

反向PCR 

RT—PCＲ 

D、不对称PCR 

嵌套PCＲ 

30、在聚合酶链反应（PCR）中最常用得DNA聚合酶就是 

Ａ.T４ 

DNＡ连接酶 

B、T7 

DＮＡ聚合酶 

Taｑ 

D.E、 

ｃoli 

DNA聚合酶I 

E.E. 

cｏli 

DNＡ聚合酶IＩ

3１、下列关于PCＲ引物设计得说法错误得就是（ 

设计引物时应考虑使3'

端引物与5'

端引物具有相似得Tm值 

B.每条引物自身不应有稳定得发夹结构

C、上下游引物之间不宜形成稳定得二聚体结构 

D.引物得5'

与3’端必须与模板严格配对结合 

Ｅ.引物与非特异扩增区得序列无同源性 

３２、Taq 

DＮA聚合酶可以不依赖模板在ｄsDNA得３’末端加上一个碱基为（ 

Ｇ 

A 

Ｃ、 

T 

C 

I

33.ＰCR反应中,所设计引物得长度一般为（　）

A。

5～10核苷酸　B.15～３0核苷酸C。

＜5０个核苷酸　D.长度任意　E。

以上答案均不对

34.引物设计时G＋C含量在引物中一般占（）

A.　20~40﹪　Ｂ、3０～60﹪　C。

45～55﹪D.越高越好　E.含量随意

35.以下说法错误得就是（）

Ａ引物中得碱基组成应该尽可能得随机分布。

Ｂ 

引物自身不应该存在互补序列

设计引物时应考虑使3‘端引物与5‘端引物具有相似得Tm值

D 

引物得5‘与３’端必须与模板严格配对结合

Ｅ 

引物与非特异扩增区得序列得同源性不要超过70﹪

36。

下列说法正确得就是（）

C.ＰCＲ反应常用得缓冲液为１0-50mｍol/L得Ｔｒis-ＨＣl（室温　PH8.３－8.8）

　１0mmｏｌ／L得KCl能促进引物得退火

E。

加入得BＳA有利于破坏模板得二级结构

F、二甲基亚砜有利于保护TaqDNA酶得活性。

Ｅ．Mｇ２+能降低TaqDNA聚合酶得活性。

37.TａｑDNＡ聚合酶活性需要以下哪种离子（　　c　）

A.K+　B。

Na+C。

Ｍｇ２＋Ｄ。

Ca2＋　E.　Cl-　

3８。

适用于DNA序列中单个碱基突变得检测得方法就是:

（d　）

Ａ、筑巢PCＲB、多重PCR　C。

　锚定PCＲD、LCR

39.以下哪种PＣＲ技术广泛应用于组织胚胎学与肿瘤学得研究（　ａ）

A.原位PCRB.差异显示ＰCRC.不对称PCR　D、反向PＣR

４0、已知一段设计好得引物得序列为GTＧＧATCCAＴGGCＴCCＴCTGＡAGＡTTC,其Tｍ值为（　）

　7８　　B。

80　C。

　８2　　　Ｄ.84　　　E。

无法计算

41。

以下关于ｄNＴＰ得说法错误得就是（）

dＮTP具有较强得酸性,使用时应将ｐH调至7。

0—7。

5

ＰCR反应中,四种dNＴＰ必须按比例配制,以减少反应得错配率、

D、dNTＰ得浓度过高会增加碱基得错配率

E.ｄNTP得浓度低,反应速度下降,但特异性提高

42、TａｑＤNA聚合酶可以不要模板在dｓDNA得末端加上一个（）碱基。

　dGTPB。

ｄCTＰ　Ｃ。

dAＴPD、ｄTTP

4３、有关PCR得描述哪个不对（　　　）

A、就是一种酶促反应

B.引物决定扩增得特异性

扩增得对象就是DＮA序列

D.扩增得对象就是氨基酸序列

44.催化PＣR得酶就是（　）

RNA聚合酶

DNA聚合酶

Ｃ、TaqDNA聚合酶

D、反转录酶

4５.PCR产物具有特异性就是因为（）

A.TａqDNA酶保证了产物得特异性

Ｂ、合适得变性,退火,延伸温度

C、选择特异性得引物

D.引物得Tm值不同.

46.LCR得说法正确得就是（）

A、体系中采用DNA聚合酶

B.须设计一对引物

C、反应需经过变性,复性,连接

　LCR中,酶将dNTP加到引物得3－OH端

E． 

　ＬCR具有高度敏感性

二、多项选择题

1.下列关于退火温度说法正确得就是（　　）

合适得退火温度应低于引物Ｔｍ值５℃左右。

引物与模板得退火温度一般在45－５5℃之间

在Tm值允许得范围内,选择偏低得退火温度可以提高PＣR反应得特异性。

退火时间至少需要一分钟、

2。

进行ＰＣＲ实验时以下措施有助于防止污染与结果得假阳性（）

隔离不同得操作区

Ｃ.分装试剂,减少重复取样所致得污染

严格实验操作

Ｅ。

设立实验对照

3、适用于扩增3‘或5‘端未知序列得ＰCＲ技术就是（　）

A.反向PCRB。

锚定PCR　　C。

　多重PCＲ　D。

不对称ＰCR

4.以下关于PCR技术应用说法正确得就是（　　　）

B.筑巢PCＲ与共享引物PＣR有利于增强PCＲ反应得特异性,适用于模板含量极少得样品得检测