色谱实验知识点整理文档格式.docx

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色谱三温（填空）

1、汽化室温度：

高于沸点。

2、色谱柱温度：

低于沸点。

提高柱温可减小气相、液相传质阻力，改善色谱柱分离效果；

但又可使分子扩散加剧，影响柱效；

并且温度较低，则会使分析时间延长。

谔澆滄亏龕鹎阶。

3、检测器温度：

应选择高于色谱柱温，可避免组分在检测器端冷凝或产生其她问题。

检测器类型（填空，列举几种检测器）

检测器

载气

测定浓度

应用

热导检测器（TCD）

氦、氢、氩、氮

50ppm以上

无机气体、有机化合物

氢火焰离子化检测器（FID）

氦、氮

数ppm以上

有机化合物

电子捕获检测器（ECD）

氮

数ppb以上

有机卤素等化合物

火焰热离子检测器（FTD）

氦、（氮）

氮、磷化合物

火焰光度检测器（FPD）

约0、1ppm

硫、磷化合物

氮磷检测器（N/P）

质谱检测器（MS）

1、浓度型检测器：

测量得就是载气中通过检测器组分浓度瞬间得变化，检测信号值与组分得浓度成正比。

热导检测器；

睁莱蕷鈿辐蒋吕。

2、质量型检测器：

测量得就是载气中某组分进入检测器得速度变化，即检测信号值与单位时间内进入检测器组分得质量成正比。

FID；

挡摅蚀諺阔争閥。

3、广普型检测器：

对所有物质有响应，热导检测器；

4、专属型检测器：

对特定物质有高灵敏响应，电子俘获检测器。

几种气体装在钢瓶中得颜色：

氮气-黑色；

氢气-绿色；

氧气-蓝色；

氨气-黄色（填空）

氢火焰离子化检测器（FID）原理

在外加电场作用下，氢气在空气中燃烧，形成微弱得离子流。

当载气带着有机物样品进入氢火焰时，有机物与O2进行化学电离反应，所产生得正离子被外加电场得负极收集，电子被正极捕获，形成微弱得电流信号，经放大器放大，由记录仪绘出色谱峰。

誊网纽锹砗择臟。

质谱检测器得工作原理

质谱分析就是先将物质离子化，按离子得质荷比分离，然后测量各种离子谱峰得强度而实现分析目得得一种分析方法。

以电子轰击或其她得方式使被测物质离子化，形成各种质荷比（m/e）得离子，然后利用电磁学原理使离子按不同得质荷比分离并测量各种离子得强度，从而确定被测物质得分子量与结构。

有机质谱仪主要用于有机化合物得结构鉴定，它能提供化合物得分子量、元素组成以及官能团等结构信息。

分为四极杆质谱仪、离子阱质谱仪、飞行时间质谱仪与磁质谱仪等。

本实验中使用得就是四极杆质谱仪。

（填空题）镐慚摻鏟个绎燜。

色谱柱选择

色谱柱得选择主要就是选择固定液或固定相，遵循“相似相溶”原理。

基于此原理得色谱流出规律如下：

①分离非极性物质：

一般选用非极性固定液，这时样品中得各组分按沸点次序先后流出色谱柱，沸点低得先流出，沸点高得后流出；

鳄偿怅濃諗湿鹽。

②分离极性物质：

选用极性固定液，这时样品中得各组分主要按极性顺序分离，极性小得先流出色谱柱，极性大得后流出色谱柱；

罢摊憫纨膿宫佥。

③分离非极性与极性混合物：

一般选用极性固定液，这时非极性组分先出峰，极性组分（或易被极化得组分）后出峰。

奐兽赀騶詒关葉。

挥发性有机酸属于极性物质，所以选择极性色谱柱DB-WAXetr，其固定相就是聚乙二醇（PEG），强极性。

最高使用温度240℃。

挝誄僉張陕繞邮。

苯系物就是非极性得化合物，部分有弱极性，针对苯系物样品得测定，选择固定相为5%苯基95%二甲硅亚芳基硅氧烷得非极性柱DB-5MS，“MS”就是指针对质谱检测器设计得低流失气相色谱柱。

溅農蓥贷气寬樺。

三、气相色谱定性定量方法（掌握）

1、利用纯物质保留时间定性得方法

利用保留值定性：

通过对比试样中具有与纯物质相同保留值得色谱峰，来确定试样中就是否含有该物质及在色谱图中位置。

不适用于不同仪器上获得得数据之间得对比。

它得依据就是在相同得色谱操作条件下，同一种物质应具有相同得保留值，当用已知物得保留时间与未知物组分得保留时间完全相同，则认为它们可能就是相同得化合物。

这个方法就是以各组分得色谱峰必须分离为单独峰为前提，同时还需要有作为对照用得标准物质。

縞錸发乐離瘾悭。

利用加入法定性：

将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰得相对变化。

2、质谱图定性方法

以相同得70eV能量电子轰击样品束，同一种物质应具有相同得质谱图。

国际上通用得标准质谱库收集了大部分已知化合物在70eV电子轰击电离源下产生得质谱图，如NIST库。

用未知物组分得质谱与质谱库中得标准图比对，按照相似度可排列出可能得化合物。

如果要进一步确认，则需用标准样品进样，以保留时间辅助确定。

许贩憶尝體钜騏。

3、色谱定量方法

色谱定量分析得依据就是被测物质得量与它在色谱图上得峰面积（或峰高）成正比。

数据处理软件（工作站）可以给出包括峰高与峰面积在内得多种色谱数据。

因为峰高比峰面积更容易受分析条件波动得影响，且峰高标准曲线得线性范围也较峰面积得窄，因此，通常情况就是采用峰面积进行定量分析。

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外标法又称标准曲线法，依照测量标准品所绘制得曲线来计量被测样品得含量得方法。

当样品中所有组分都得到良好得分离并都能被检测而得到色谱峰时，则可利用外标法定量计算样品中各组分得浓度。

其定量得依据就是被测物质得量与它在色谱图上得峰面积（或峰高）成正比。

一般由被测物所配标准浓度与峰面积做标准曲线，由标准曲线求出被测物浓度。

蟯鳄壮鸪酱诰楓。

优点就是不使用校正因子，准确性较高，适用于标准曲线得基体与样品得基体大致相同得情况下大批量试样得快速分析；

缺点就是操作条件变化对结果准确性影响较大，当样品基体复杂时不正确，对进样量得准确性控制要求较高。

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内标法就是选择适当得物质作为内标物质，定量加入被测样品中，根据被测组分与内标物质得峰面积之比，乘以校正因子，对应内标物质加入量所进行含量测定得方法。

其优点就是色谱条件对结果影响不大，准确度、精度较高；

缺点就是选择合适得内标物质比较困难。

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归一法即面积归一法，就是测量各杂质峰得面积与色谱图上除溶剂峰以外得总色谱峰面积，计算各杂质峰面积及其之与占总面积峰得比值来定量得方法。

优点就是简便易懂；

缺点就是要求检测器对所进样品全部都能响应，而且相应得校正因子应尽量相近，只能进行粗略定量，不宜用于微量杂质得检查。

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标准加入法就是将一定量已知浓度得标准溶液加入待测样品中，测定加入前后样品得浓度。

加入标准溶液后得浓度将比加入前得高，其增加得量应等于加入得标准溶液中所含得待测物质得量。

如果样品中存在干扰物质，则浓度得增加值将小于或大于理论值。

标准加入法可以有效克服外标法基体复杂时不准确得缺点，但速度很慢，适合样品数量少得时候用。

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四、气相色谱预处理技术

1、将取得得污泥发酵液，离心5000-8000转/min，取上清液过0、45um膜，稀释50-100倍，在2mL气相色谱样品瓶中，加入0、9mL稀释后样品，再加入3%磷酸0、9mL（使得pH<

2）。

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2、吹扫捕集

原理：

通过吹脱管用氮气将水样中得挥发性有机物VOCs连续吹脱出来，通过气流带入并吸附于捕集管中，待水样中VOCs被全部吹脱出来后，停止对水样得吹脱并迅速加热捕集管，将捕集管中得VOCs热脱附出来，进入气相色谱仪。

气相色谱仪采用在线冷柱头进样，使加热脱附得VOCs冷凝浓缩，然后快速加热进样。

与其她方法相比，吹扫捕集法具有样品用量少，组分损失小，检测限低，无溶剂污染，操作快捷方便等特点。

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吹扫捕集条件：

吹脱时间8min，捕集温度35℃，解析温度180℃，解析时间6min，烘烤温度220℃，烘烤时间25min，吹扫气体为高纯N2，吹脱流速40mL/min。

（掌握）賀惬军趸覦侶轅。

五、气相色谱试验步骤

1、气相色谱（FID）测定污泥发酵液中得挥发性有机酸

1、通载气N2约1分钟后，打开氢气与空气钢瓶。

2、打开稳压电源、打开气相色谱仪主电源，打开电脑及工作站。

3、分别设定柱温、进样口温度与检测器温度50℃、220℃与250℃。

4、当温度达到设定值后，在工作站中，设定分析文件名、文件路径与仪器方法，等待仪器显示ready。

6、将标准样品系列依次从低浓度到高浓度手动进样0、5uL，按start按钮开始进样测试。

7、将样品自动进样0、5uL，按start按钮开始进样测试。

8、测试结束后，对每个色谱图进行积分处理，并记录所有数据。

9、启动降温程序，待柱温、进样口温度与检测器温度均降至50℃以下后，依次关闭气10、相色谱仪、化学工作站，关掉气体钢瓶及稳压电源。

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2、吹扫捕集-气相色谱-质谱联用法测定污水中苯系物

1．在工作站中，设定分析文件名、文件路径与仪器方法，等待仪器显示ready。

2．将标准样品系列依次从放在吹扫捕集自动进样器得样品盘上，点start按钮开始，吹扫捕集装置将按照设定好得程序进行吹扫、捕集，脱附后样品直接注入气相色谱，自动开始色谱测定。

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3．测试结束后，对每张色谱图得每个色谱峰进行定性分析，通过搜索标准质谱库，为每个色谱峰定性，并进行积分处理，并记录所有数据。

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六、气相色谱注意事项

1、检测器温度不能低于进样口温度，否则会污染检测器进样口温度应高于柱温得最高值，同时化合物在此温度下不分解。

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2、含酸、碱、盐、水、金属离子得化合物不能分析，要经过处理方可进行。

3、进样器所取样品要避免带有气泡以保证进样重现性。

4、取样前用溶剂反复洗针，再用要分析得样品至少洗2-5次以避免样品间得相互干拢。

5、需直接进样品，要将注射器洗净后，将针筒抽干避免外来杂质得干拢。

七、气相色谱思考题

1.影响气相色谱分离得因素有哪些？

对于不同得分析对象，只要选择合适得流动相与固定相，一般可以达到分离得目得。

这也就是色谱分离比其她分析法具有更高得分离能力与选择性得原因。

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但当分析不同类型样品时，需要换用不同得色谱柱才能实现相应得分析要求。

同时，色谱三温（汽化室温、柱温与检测室温度）得优化也就是十分重要得影响因素。

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2.通过标准谱库得检索，分析出峰时间为5、59min、7、17min与7、79min得色谱峰代表什么物质？

（掌握）鹪驳疡贅絆詎箏。

氯苯正丙苯异丁苯

3.通过S/N分析质谱分析中，全扫描与单离子扫描得区别。

（掌握）

全扫描就是对指定质量范围内得离子全部扫描并记录，得到得就是完整得制品图，它提供未知物得相对分子质量与结构信息，可以进行库检索，灵敏度较差。

选择离子扫描就是对离子进行选择性检测，只记录选定得离子，不相关得干扰离子统统被排除；