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四、组织学技术简介

（一）光镜技术光学显微镜分为普通光学显微镜和特殊光学显微镜，以普通光学显微镜最常用，其放大率可达1500倍左右，分辨率为0.2μm。

观察的标本须制成切片并进行染色，常用的制片方法是石蜡切片术，其染色方法是苏木精—伊红染色，简称HE染色。

特殊光学显微镜主要包括荧光显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜等。

（二）电镜技术电子显微镜的分辨率约为0.2nm，放大倍数可达几十万倍。

电子显微镜又分为透射电镜和扫描电镜。

①透射电镜术是利用电子束穿透标本，经过电磁场的会聚、放大后在荧光屏上显像或照像后观察。

经固定的电镜标本需制成超薄切片（厚约50~80nm），并用柠檬酸铅和醋酸铀等染色。

②扫描电镜术是用于观察细胞、组织表面的立体微细结构。

组织块经固定、干燥后，在其表面喷镀薄层碳膜或金属膜后方能观察。

（三）组织化学术

1.一般组织化学术利用化学反应原理检测组织和细胞内某种化学成分，如用过碘酸希夫反应检测多糖；

用酶化学染色检测某种酶；

用福尔根反应显示DNA等。

2.免疫组织化学术是根据免疫学抗原与抗体特异性结合的原理，检测组织、细胞中多肽和蛋白质等抗原物质的一种技术。

这种方法特异性强、敏感度高、应用广泛。

首先要获得被检多肽或蛋白质的抗体，并对抗体进行标记，常用的标记物有荧光素、辣根过氧化物酶和胶体金等。

用相应的显色和观察方法检测标记抗体而获知该肽或蛋白质的分布情况。

3.原位杂交术是根据两条单核苷酸链可通过碱基互补原则进行结合即杂交的原理，用标记的RNA或DNA探针在细胞原位检测RNA或DNA片段的一种方法。

（四）放射自显影术（略）

（五）图像分析术（略）

（六）细胞培养术和组织工程细胞培养术是将离体细胞和组织置入模拟体内的条件下进行培养的技术。

细胞培养术可直接研究细胞的生长分化、代谢及形态功能变化，还可研究各种理化因子（激素、药物、毒物、辐射等）对细胞的影响。

组织工程是用细胞培养术在体外模拟构建肌体组织或器官的技术，目前正在研究构建的组织和器官中，以组织工程皮肤较为成功。

问答题

试述免疫组织化学术的基本原理和用途。

第八章循环系统中文纲要英文纲要

掌握心脏的结构；

掌握大动脉、中动脉和小动脉的结构特点和功能；

掌握毛细血管的一般结构和毛细血管的分类；

了解静脉的一般结构特点；

了解微循环的概念和各段血管的结构特点与功能；

了解淋巴管壁的一般结构。

一、心脏

（一）心壁的结构

心壁由三层组成，从内向外依次为心内膜、心肌膜和心外膜。

1．心内膜包括内皮、内皮下层和内膜下层三层。

内皮下层由细密的结缔组织组成，含少许平滑肌纤维。

内膜下层由疏松结缔组织组成，内含血管、神经，心室的内膜下层还有心传导系统的普肯野纤维。

2.心肌膜主要由心肌纤维构成，心肌纤维间有丰富的毛细血管。

心肌纤维呈螺旋状排列，大致可分为内纵、中环和外斜三层。

心房肌纤维还含有电子密度较高的膜包颗粒，颗粒内含有心房钠尿肽，它有很强的利尿、排钠、扩张血管和降血压的作用。

3.心外膜为浆膜，由一层间皮和其下面的薄层结缔组织组成，含有血管和神经，并常有脂肪组织。

4.心瓣膜包括房室瓣、主动脉瓣和肺动脉瓣，是心内膜形成的薄片状结构，表面被覆内皮，内部为致密结缔组织，与心骨骼的纤维环相连。

（二）心脏传导系统

心壁内有由特殊心肌纤维组成的传导系统，其功能是发生冲动并传导到心脏各部，使心房肌和心室肌按一定的节律收缩。

该系统由窦房结、房室结、房室束及其分支组成。

窦房结位于右心房心外膜的深部，其它均分布在心内膜下层。

主要由三种细胞组成。

1.起搏细胞存在于窦房结和房室结，是心肌细胞的起搏点。

此细胞较小，呈梭形或多边形，包埋在较致密的结缔组织中。

胞质内有少量肌原纤维和较多糖原。

2.移行细胞主要存在于窦房结和房室结的周边及房室束。

移行细胞比一般心肌纤维细而短，肌原纤维较起搏细胞稍多。

3.普肯野纤维组成房室束及其分支,较一般心肌纤维粗而短，着色淡，肌原纤维较少，位于细胞的周边，相邻细胞间有发达的缝隙连接。

此细胞有快速传导冲动的作用。

二、动脉

（一）大动脉又称弹性动脉，结构特点是：

内膜的内皮下层较厚；

中膜主要由40～70层弹性膜组成，弹性膜之间有胶原纤维、弹性纤维及环行平滑肌；

外膜较薄，由结缔组织构成。

（二）中动脉又称肌性动脉，结构特点是：

内膜的内皮下层薄，内弹性膜明显；

中膜主要由10～40层环行平滑肌组成；

外膜厚度与中膜相近，与中膜交界处有明显的外弹性膜。

（三）小动脉也属肌性动脉，结构特点是：

较大的小动脉有明显的内弹性膜，中膜有数层环行平滑肌，一般没有外弹性膜。

（四）微动脉是管径在300μm以下的动脉，有1～2层环行平滑肌，外膜薄。

三、毛细血管的基本结构和分类

（一）毛细血管的结构毛细血管管壁薄，结构简单，管径约6～8μm，管壁主要由一层内皮细胞和基膜组成。

在内皮细胞和基膜之间有一种扁平而有突起的细胞，称周细胞。

（二）毛细血管的分类毛细血管可分为连续毛细血管、有孔毛细血管和血窦三种类型。

1.连续毛细血管其特点是内皮细胞间有紧密连接，基膜完整，胞质中有许多吞饮小泡。

这种毛细血管的通透性较小，分布于结缔组织、肌组织、肺和中枢神经系统等处。

2.有孔毛细血管其结构与连续性毛细血管相似，但其内皮细胞不含核的部分更薄，有许多贯穿胞质的孔有的内皮细胞的孔有隔膜封闭。

此型毛细血管的通透性较大，主要分布于胃肠黏膜、某些内分泌器官和肾血管球等处。

3.血窦又称窦状毛细血管，其管腔较大，形状不规则。

内皮细胞之间有较大的间隙，基膜不连续，因而通透性最大。

主要分布于肝、脾、骨髓和一些内分泌腺中。

四、静脉

静脉是运送血液回心脏的血管，可分为大静脉、中静脉、小静脉、和微静脉。

静脉管壁也可分为内膜、中膜和外膜三层，但三层分界不明显。

与同级动脉相比，静脉的管腔大，管壁薄，弹性组织结构和平滑肌都不及动脉发达，管径2mm以上的静脉常有静脉瓣。

1．试述大动脉、中动脉、小动脉和微动脉管壁的结构特点。

2．试述毛细血管的基本结构、分类和各类毛细血管的超微结构及功能特点。

3．试述心脏壁的的微细结构。

4．试述心传导系统的组成、分布和生理功能。

第二十二章消化呼吸系统发生中文纲要英文纲要

了解原始消化管的形成和分化；

掌握咽囊的发生和演变；

了解甲状腺的发生及其先天性畸形；

掌握消化管的发生和先天性畸形；

掌握肝、胆囊和胰腺的发生；

了解呼吸系统的发生及先天性畸形。

一、消化系统的发生

原始消化管起自口咽膜，止于泄殖腔膜。

从头端至尾端，依次分为三段，分别称前肠、中肠和后肠。

前肠将分化为部分口腔底、舌、咽至十二指肠乳头之间的消化管、肝、胆囊、胆管、下颌下腺、舌下腺、胰腺、喉及其以下的呼吸道、肺、胸腺、甲状腺和甲状旁腺等器官。

中肠将分化为自十二指肠乳头至横结肠右2/3之间的消化管。

后肠将分化为自横结肠左1/3至肛管上段的消化管以及膀胱和尿道的大部。

消化管与呼吸道的上皮及腺上皮来自原始消化管的内胚层，而结缔组织和肌组织则来自脏壁中胚层。

（一）咽的发生及咽囊的演变原始咽为消化管头端的膨大部。

在原始咽的侧壁有5对咽囊，它们将演化形成一些重要器官。

第一对咽囊：

内侧份演化为咽鼓管，外侧份演化为中耳鼓室，第一鳃膜分化为鼓膜，第一鳃沟形成外耳道。

第二对咽囊：

内侧份演化为腭扁桃体，外侧份退化。

第三对咽囊：

背侧份分化为下一对甲状旁腺，腹侧份分化为胸腺原基。

第四对咽囊：

背侧份分化为上一对甲状旁腺，腹侧份退化。

第五对咽囊：

形成后鳃体。

（二）甲状腺的发生第4周初，为原始咽底壁正中线处内胚层细胞增生下陷形成甲状舌管，它沿颈部正中向尾端延伸，末端向两侧膨大，形成甲状腺的侧叶。

第11周时，甲状腺滤泡出现，不久即分泌甲状腺素。

（三）食管和胃的发生食管由喉气管憩室至胃之间的一段前肠分化而来。

第5周时食管还很短，后来，随着颈的出现和心、肺的下降而迅速增长。

胃原基出现于第4周，是前肠尾段形成的梭形膨大。

其背侧壁生长迅速，形成胃大弯；

腹侧壁生长缓慢，形成胃小弯，胃大弯头端向上膨出，形成胃底。

后来胃沿头尾轴顺时针方向旋转90度，由原来的垂直方位变成了由左上至右下的斜行方位。

（四）肠的发生由于中肠增长速度比胚体快，致使十二指肠以下的一段中肠向腹侧弯曲，形成一矢状位的“U”形中肠袢。

中肠袢顶部与卵黄蒂相连，并以此为界分为头支和尾支。

第6周时，中肠袢突入脐腔内，形成生理性脐疝。

中肠袢在脐腔内以肠系膜上动脉为轴，逆时针方向（由胚胎腹侧观）旋转90度，致使中肠袢由矢状位转为水平位。

同时，尾支近卵黄蒂处出现盲肠突。

第10周中肠袢从脐腔退回腹腔。

中肠袢在退回腹腔时，头支在前，尾支在后，同时，逆时针方向再旋转180度，使头支转至左侧，尾支转至右侧。

头支形成空肠和回肠的大部。

尾支形成回肠末段、升结肠和横结肠右2/3。

盲肠突形成盲肠和阑尾。

（五）直肠的发生和泄殖腔的分隔后肠末段膨大为泄殖腔，其腹侧与尿囊相连，末端以泄殖腔膜封闭。

第6～7周，尿囊与后肠之间的间充质增生形成尿直肠隔。

泄殖腔被尿直肠隔分为腹、背两份。

腹侧份称尿生殖窦，主要参与泌尿生殖管道的形成。

背侧份称原始直肠，发育为直肠和肛管上段。

泄殖腔膜被分为腹侧的尿生殖膜和背侧的肛膜，肛膜第8周破裂，肛凹加深演变为肛管的下段。

肛管上段的上皮来自内胚层，下段的上皮来自外胚层，两者的分界线为齿状线。

（六）肝和胆的发生第4周初，前肠末端腹侧壁内胚层上皮增生形成肝憩室。

肝憩室迅速增大，很快长入原始横隔内。

肝憩室末端分为头、尾两支。

头支较大，为肝原基；

尾支较小，为胆囊和胆道的原基。

肝憩室根部则发育为胆总管。

（七）胰腺的发生第4周末，前肠尾端内胚层细胞增生，形成腹胰芽和背胰芽，分别分化形成腹胰和背胰，后融合形成单一的胰腺。

胰芽形成各级导管及末端的腺泡；

部分细胞分化形成胰岛。

（八）主要畸形

1．甲状舌管囊肿是由于甲状舌管在发育过程中没有闭锁造成的囊肿。

2．消化管狭窄或闭锁消化管上皮细胞一度过度增生，致使管腔完全闭塞。

若管腔重建过程受阻，致使某一段消化管管腔过细，即为狭窄；

若完全无管腔，则为闭锁。

3．麦克尔憩室是由于卵黄蒂近端未退化所致，表现为回肠壁上距回盲部40～50cm处的囊状突起。

4．脐粪瘘是由于卵黄蒂未闭锁所致，粪便可通过瘘管从脐部溢出。

5．先天性脐疝是由于脐腔未闭锁所致，腹内压增高时，肠管可从脐部膨出。

6．先天性巨结肠是由于神经嵴细胞未能迁移至受损段肠壁内，使肠壁内副交感神经节细胞缺如所致。

由于受损段结肠不能蠕动，致使近段结肠内粪便淤积，肠管极度扩张。

7．肛门闭锁是由于肛膜未破或肛凹未能与直肠末端相通所致，常伴有直肠尿道瘘。

8．肠袢转位异常是由于肠袢在发育过程中转位异常所致，可表现为各种消化管异位。

二、呼吸系统的发生

（一）喉、气管和肺的发生第4周初，原始咽尾端底壁正中向腹侧形成喉气管憩室，是喉、气管、支气管和肺的原