奥维森基因扩增子样品质检报告模板Word文档下载推荐.docx
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PCR扩增。
三、样品检测结果
序号
样品名称
样品编号
扩增区域
检测结果
检测等级
备注
1
N5
SD********
16SV3-V4
不合格
D
2
N55
3
N52
C
4
N45
5
N44
6
N51
7
N24
8
N67
9
N46
10
N1
11
N28
12
N14
合格
B
13
N6
14
N61
15
N48
16
N15
17
N59
18
N26
19
Q43
20
Q43B
21
Q43c
22
ZX
23
Q40B
24
Q40C
25
Q57
26
Q57B
27
Q57C
28
Q61
29
Q61B
30
Q61C
31
Q55
32
Q55B
33
Q55c
34
Q69
35
Q69B
36
Q25
37
Q25B
38
Q25C
39
Q28
40
Q28B
41
Q28C
42
JLH
43
Q33B
A
44
Q33C
45
Q38
46
Q38B
47
Q50
48
Q50B
49
Q50C
50
Q23
51
QL2
52
Q23C
53
Q26
54
Q26B
55
Q26C
56
Q34
57
Q34B
58
Q34C
59
Q35
60
Q35B
61
Q35C
62
Q36
63
Q36B
64
Q36C
65
Q37
66
Q37B
67
Q54
68
Q54B
69
Q54C
70
Q58
71
Q58B
72
Q47
73
QB
74
Q24
75
Q24B
76
Q24C
77
Q27
78
Q27B
79
Q27C
80
Q19
81
Q19B
82
Q19C
83
Q18B
84
Q18C
85
Q21
86
Q21B
*注:
1.检测结果和备注是依据DNA样品判定标准,对被检测样品是否符合要求给出的意见和解释,检测结果类别分类要求如下:
A类:
PCR产物目的条带大小正确,且总量满足2次或者2次以上建库需要;
B类:
PCR产物目的条带大小正确,且总量满足1次但不足2次建库需要;
C类:
PCR产物有非特异性条带,目的条带浓度低,可风险建库但不保证测序质量;
D类:
PCR产物无目的条带或浓度低不能满足建库要求,不建议使用,需重新送样。
四、附件
1.检测前处理
将样品在冰上融化后,离心并充分混匀,Nanodrop检测样品质量,取30ng进行PCR扩增。
2.PCR扩增体系
试剂成分
体积
DNA样品
X(30ng)
ForwardPrimer(5uM)
1μL
ReversePrimer(5uM)
BSA(2ng/μL)
3μL
2xTaqPlusMasterMix
12.5μL
ddH2O
7.5-XμL
Total
25μL
3.扩增引物序列
第一轮:
引物序列
AGAGTTTGATCMTGGCTCAG
TACGGYTACCTTGTTACGACTT
第二轮:
GTACTCCTACGGGAGGCAGCA
GTGGACTACHVGGGTWTCTAAT
4.PCR扩增程序
第一轮:
94℃5min
94℃60s
30Cycles
55℃30s
72℃120s
72℃7min
4℃end
第二轮:
94℃30s
50℃30s
72℃60s
5.琼脂糖凝胶电泳检测参数
胶浓度:
1%;
电压:
170V;
电泳时间:
30min
6.琼脂糖凝胶电泳检测结果
点孔
次数
稀释倍数(×
)
上样量(μL)
N