奥维森基因扩增子样品质检报告模板Word文档下载推荐.docx

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PCR扩增。

三、样品检测结果

序号

样品名称

样品编号

扩增区域

检测结果

检测等级

备注

1

N5

SD********

16SV3-V4

不合格

D

2

N55

3

N52

C

4

N45

5

N44

6

N51

7

N24

8

N67

9

N46

10

N1

11

N28

12

N14

合格

B

13

N6

14

N61

15

N48

16

N15

17

N59

18

N26

19

Q43

20

Q43B

21

Q43c

22

ZX

23

Q40B

24

Q40C

25

Q57

26

Q57B

27

Q57C

28

Q61

29

Q61B

30

Q61C

31

Q55

32

Q55B

33

Q55c

34

Q69

35

Q69B

36

Q25

37

Q25B

38

Q25C

39

Q28

40

Q28B

41

Q28C

42

JLH

43

Q33B

A

44

Q33C

45

Q38

46

Q38B

47

Q50

48

Q50B

49

Q50C

50

Q23

51

QL2

52

Q23C

53

Q26

54

Q26B

55

Q26C

56

Q34

57

Q34B

58

Q34C

59

Q35

60

Q35B

61

Q35C

62

Q36

63

Q36B

64

Q36C

65

Q37

66

Q37B

67

Q54

68

Q54B

69

Q54C

70

Q58

71

Q58B

72

Q47

73

QB

74

Q24

75

Q24B

76

Q24C

77

Q27

78

Q27B

79

Q27C

80

Q19

81

Q19B

82

Q19C

83

Q18B

84

Q18C

85

Q21

86

Q21B

*注:

1.检测结果和备注是依据DNA样品判定标准,对被检测样品是否符合要求给出的意见和解释,检测结果类别分类要求如下:

 

A类:

PCR产物目的条带大小正确,且总量满足2次或者2次以上建库需要;

B类:

PCR产物目的条带大小正确,且总量满足1次但不足2次建库需要;

C类:

PCR产物有非特异性条带,目的条带浓度低,可风险建库但不保证测序质量;

D类:

PCR产物无目的条带或浓度低不能满足建库要求,不建议使用,需重新送样。

四、附件

1.检测前处理

将样品在冰上融化后,离心并充分混匀,Nanodrop检测样品质量,取30ng进行PCR扩增。

2.PCR扩增体系

试剂成分

体积

DNA样品

X(30ng)

ForwardPrimer(5uM)

1μL

ReversePrimer(5uM)

BSA(2ng/μL)

3μL

2xTaqPlusMasterMix

12.5μL

ddH2O

7.5-XμL

Total

25μL

3.扩增引物序列

第一轮:

引物序列

AGAGTTTGATCMTGGCTCAG

TACGGYTACCTTGTTACGACTT

第二轮:

GTACTCCTACGGGAGGCAGCA

GTGGACTACHVGGGTWTCTAAT

4.PCR扩增程序

第一轮:

94℃5min

 

94℃60s

30Cycles

55℃30s

72℃120s

72℃7min

4℃end

第二轮:

94℃30s

50℃30s

72℃60s

5.琼脂糖凝胶电泳检测参数

胶浓度:

1%;

电压:

170V;

电泳时间:

30min

6.琼脂糖凝胶电泳检测结果

点孔

次数

稀释倍数(×

上样量(μL)

N

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