蛋白酶抑制剂_精品文档Word格式.doc
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【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。
一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗之。
凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。
PMSF在水溶液中不稳定。
应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。
PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。
pH值为8.0时，20μmmol/lPMSF水溶液的半寿期大约为85min，这表明将PMSF溶液调节为碱性（pH>
8.6）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。
蛋白水解酶抑制剂啊!
!
实验室常用的啊!
主要用于组织匀浆时用!
1）抑制丝氨酸蛋白酶（如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶，凝血酶）和巯基蛋白酶（如木瓜蛋白酶）;
2）10mg/ml溶于异丙醇中;
3）在室温下可保存一年;
4）工作浓度:
17~174ug/ml（0.1~1.0mmol/L）;
5）在水液体溶液中不稳定，必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。
EDTA
1）抑制金属蛋白水解酶;
2）0.5mol/L水溶液，pH8~9;
3）溶液在4℃稳定六个月以上;
0.5~1.5mmol/L.（0.2~0.5mg/ml）;
5）加入NaOH调节溶液的pH值，否则EDTA不溶解。
胃蛋白酶抑制剂（pepstantin）
l）抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶，血管紧张肽原酶，组织蛋白酶D和凝乳酶;
2）1mg/ml溶于甲醇中;
3}储存液在4℃一周内稳定，-20℃稳定6个月;
4）1作浓度:
0.7ug/ml（1umol/L）
5）在水中不溶解。
亮抑蛋白酶肽（leupeptin）
1）抑制丝氨酸和巯基蛋白酶，如木瓜蛋白酶，血浆酶和组织蛋白酶B;
2）lOmg/ml溶于水;
3）储存液4℃稳定一周，-20℃稳定6个月;
4）工作浓度0.5mg/ml。
胰蛋白酶抑制剂（aprotinin）
1）抑制丝氨酸蛋白酶，如血浆酶，血管舒缓素，胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶;
2）lOmg/ml溶于水，pH7~8
3}储存液4℃稳定一周，-20℃稳定6个月;
0.06~2.0ug/ml（0.01~0.3umol/L）;
5）避免反复冻融:
6）在pH>
12.8时失活。
蛋白酶抑制剂混合使用
35ug/mlPMSF………………………丝氨酸蛋白酶抑制剂
0.3mg/mlEDTA……………………金属蛋白酶抑制剂
0.7ug/ml胃蛋白酶抑制剂（Pepstatin）…………酸性蛋白酶抑制剂
0.5ug/ml亮抑蛋白肽酶（Leupeptin）…………广谱蛋白酶抑制剂
亮抑酶肽（Leupeptin）MolecularFormulaC20H38N6O4·
1/2H2SO4
storagetemp.-20°
C
ProductDescription
Specificity:
Inhibitsserineandthiolproteasessuchastrypsin,plasmin,proteinaseK,kallikrein,papain,thrombin,andcathepsinAandB.Notaffectedareα-,β-,γ-,andδ-chymotrypsins,pepsin,cathepsinD,elastase,renin,andthermolysin.
Suggestedworkingconcentration:
0.5-10μg/ml（1-20μM）
Solubility/Stability:
Highlysolubleinwater（1mg/ml）.Stableforatleast1weekat+2to+8°
Cand6monthsfrozeninaliquotsat-15to-25°
C.
QualityFunctiontest:
Performance-controlledwithtrypsin
PepstatinA（抑肽素）,
又称培普他丁,胃酶抑素,抑胃肽。
分子式C34H63N5O9,分子量685,91g/mol,一种酸性蛋白酶抑制剂。
由链霉菌Streptomycestestaceus产生的，能抑制胃蛋白酶、胃亚蛋白酶、组织蛋白酶D、各种天门冬氨酸蛋白酶，例如组织蛋白酶D、肾素、胃蛋白酶、细菌天门冬氨酸蛋白酶和HIV蛋白酶和血管紧张素释放酶.熔点228～229℃。
旋光度[α]D27-90°
（0.288％，甲醇）。
对Rydon-Smith、高锰酸钾呈阳性反应，对坂口和埃利氏呈阴性反应。
易溶于甲醇、乙醇、乙酸，不溶于乙酸乙酯、醚、苯、氯仿等有机溶剂。
紫外光谱为末端吸收，有13个组分。
Aprotinin蛋白酶抑制剂（抑肽酶）
SynonymTrypsininhibitor（basic）
MolecularFormulaC284H432N84O79S7
MolecularWeight6511.44
Application
Protectionofproteinsandenzymesduringisolation/purification.
Purificationofurokinase,trypsin,andchymotrypsinonimmobilizedaprotinin.
Quantificationofkallikreinactivityinmixturesofesterasesandproteases.
Guaranteethecontrolleddegradationofsubstratesbyavoidingnonspecificproteolysisinclinicalchemicaltests.
Inhibitionofproteaseactivity,whichincreasesthelifetimeofcellsincellandtissueculturestudies.
Aprotininasamodelproteininprotein-foldingstudies.
MolecularweightmarkerinSDS-polyacrylamidegelelectrophoresis.
Trypsininhibitor,pancreastype（BPTI）
Activity:
approx.630U/mg（25°
C,ChromozymTRYasthesubstrate）=approx.200U/mg（trypsininhibitorunits,25°
C,BAEEasthesubstrate）
Specificity:
SerineproteaseinhibitornotactingonthrombinorfactorX.Inhibitsplasmin,kallikrein,trypsin,andchymotrypsinwithhighactivity.
Workingconcentration:
0.06to2μg/ml（0.01-0.3μM）
Freelysolubleinwater（10mg/ml）oraqueousbuffersolution（e.g.,Tris,0.1M,pH8.0）.AsolutionadjustedtopH7–8isstableforapproximately1weekat+2to+8°
C.Aliquotsstoredat-15to-25°
Carestableforapproximately6months.
Note:
Avoidrepeatedfreezingandthawingandexposuretostronglyalkalinesolutions（inactiveatpH>
12.8）.
ContentsLyophilizate
QualityPurity:
Electrophoreticallyhomogeneous
离心力Centrifugalforce（F）离心力作为真实的力根本就不存在，在非惯性系中为计算方便假想的一个力。
请看下面的说明：
向心力使物体受到指向一个中心点的吸引、或推斥或任何倾向于该点的作用。
笛卡儿把离心力解释为物体保持其“限定量”的一种趋势。
它们的区别就是，向心力是惯性参考系下的，而离心力是非惯性系中的力。
我们处理物理题时都是在惯性系下（此时牛顿定律才成立），所以一般不用离心力这个概念。
由于根本不是一个情况下的概念，我们无法对他们的方向和大小进行比较。
F=mω2r
ω：
旋转角速度（弧度／秒）r:
旋转体离旋转轴的距离（cm）m：
颗粒质量
相对离心力Relativecentrifugalforce（RCF）
RCF就是实际离心力转化为重力加速度的倍数
g为重力加速度（9.80665m/s2）
同为转于旋转一周等于2π弧度，因此转子的角速度以每分钟旋转的次数（每分钟转数n或r/min）表示：
一般情况下，低速离心时常以r／min来表示。
3、分离因素计算公式：
RCF=F离心力／F重力=mω?
2r/mg=ω?
2r/g=（2*π*r/r*rpm）?
2*r/g注：
rpm应折换成转/秒
例如：
直径1000mm，转速1000转/分的离心机，分离因素为：
RCF（1000）=（2*3.1415*16.667）^2*0.5/9.8=104.72^2*0.5/9.8=560
DEPC（diethypyrocarbonate，焦碳酸二乙酯）处理过并经高温高压消毒的MiliQ纯水。
DEPC水可以用于RNA沉淀的溶解，含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等，以及其它各种要求无RNase、DNase和proteinase的反应体系。
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