258株铜绿假单胞菌的耐药性分析与研究_精品文档Word下载.doc
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[关键词]抗生素；
铜绿假单胞菌；
耐药性
铜绿假单胞菌是氧化酶阳性非发酵革兰阴性杆菌，是临床常见的条件致病菌，对于住院患者，特别是重症（如ICU）患者，能引起医院获得性肺炎，成为医院严重的感染病原菌。
由于临床抗生素的预防用药和不合理使用造成该菌耐药性日趋严重，引起院内感染逐年增加，目前已出现高度耐药的铜绿假单胞菌。
因此，加强对铜绿假单胞菌的耐药性监测，了解其耐药性及变迁，对有效治疗和预防该菌的院内感染十分重要。
笔者从本院2004年1月-2007年9月的住院和门诊患者的标本中分离出584株铜绿假单胞菌，对其药敏结果进行分析，现报道如下。
1材料
1.1菌株来源我院2004年1月—2007年9月住院、门诊患者标本中分离出来的584株铜绿假单胞菌。
1.2仪器与试剂使用法国生物梅里埃公司BACTALERT3D血液培养仪和vitek-2型全自动微生物鉴定/药敏测试仪，ID-GNB革兰氏阴性杆菌鉴定卡和AST-GN药敏鉴定卡。
1.3K-B手工药敏纸片英国oxoid公司生产，由法国生物梅里埃公司提供。
1.4培养基广东江门凯林公司生产羊血琼脂培养基,巧克力琼脂培养基和MH琼脂培养基。
1.5质控菌株
大肠埃希菌ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853由法国生物梅里埃公司提供。
2方法
采用法国梅里埃公司vitek-2型全自动微生物鉴定/药敏测试仪，上ID-GNB革兰氏阴性杆菌鉴定卡，AST-GN药敏鉴定卡和K-B法手工药敏鉴定检测，按NCCLS标准判断结果。
用铜绿假单胞菌ATCC27853、大肠埃希菌ATCC25922进行质量控制。
3结果
3.1584株铜绿假单胞菌的标本分布与感染特点见表1。
显示铜绿假单胞菌的侵入部位既可在机体深部，也可在表层，且以呼吸道感染居多。
表1584株铜绿假单胞菌的标本分布与百分率
标本来源检出铜绿假单胞菌株数占总数百分率（%）
痰44476.03
中段尿6711.50
胸水294.97
伤口分泌物152.57
血液101.71
咽拭子81.37
胆汁和腹61.00
大便50.85
________________________________________________________________________
3.2药敏试验结果见表2。
以丁胺卡那霉素、哌拉西林/他唑巴坦抗菌作用最强；
表2584株铜绿假单胞菌药敏实验结果
抗生素名称实验株数敏感性（%）
敏感（S）中介（I）耐药（R）
丁胺卡那霉素57282.106.8110.80
氨曲南A52433.7035.8030.10
环丙沙星58345.408.7444.70
头孢曲松4731.692.3295.90
头孢吡肟58360.2013.2026.40
庆大霉素57655.309.2035.20
亚胺培南58457.308.0434.40
左旋氧氟沙星46847.209.6139.50
美洛培南52864.509.2825.90
哌拉西林56467.500.1732.00
复方新诺明5612.310.3597.10
头孢噻肟4890.811.6397.50
替卡西林/棒酸51743.90055.80
四环素4121.21098.70
替卡西林46537.800.2161.90
妥布霉素52965.005.1029.80
哌拉西林/他唑巴坦57580.80018.90
头孢唑肟4051.480.7497.70
头孢他啶58350.7012.8036.10
4讨论
铜绿假单胞菌广泛分布于自然界，正常人皮肤、呼吸道、肠道，医院病房及医疗器械等均有此菌存在，因此，很容易造成机会性感染。
近年来，铜绿假单胞菌的临床感染逐渐增多，其耐药菌株也有不同的变化[1]。
铜绿假单胞菌的耐药机制复杂，主要与以下因素有关：
①细菌产生抗菌活性酶，如金属β-内酰胺酶、氨基糖苷钝化酶；
②细菌改变药物作用的靶位，如青霉素结合蛋白（PBPS），使DNA旋转酶结构发生改变，从而逃避抗菌药物的抗菌作用；
③外膜通透性降低；
④生物膜形成；
⑤主动泵出系统等，其中主动泵出系统在铜绿假单胞菌多耐药机制中起着主导作用[2]。
本研究发现，青霉素类的派拉西林和替卡西林的4年的平均耐药率分别达到32%和61.9%，已基本失去治疗作用。
但当二者与β-内酞胺酶抑制剂联合用药后，派拉西林-他哇巴坦表现出较强的抗菌活力，4年的平均抑菌率达80.80%，耐药率仅为18.9%，而替卡西林-棒酸的抗菌活性增强不显著。
有研究表明，美国仅有24%的医院显示了铜绿假单胞菌对派拉西林-他哇巴坦的高敏性[3]，这可能与不同国家临床分离菌株差异及临床治疗方案不同有关。
头抱菌素类药物曾经是经典的抗铜绿假单胞菌药物，本实验表明除头孢吡肟外，头孢曲松、头孢噻肟、头孢唑肟、头孢他啶、已基本失去抗菌作用。
头孢吡肟的耐药率也已经达到了26.40%，这可能与过去第3、4代头抱菌素的被大量使用有关。
氟哇诺酮类的环丙沙星和左氧氟沙星，其4年的平均耐药率分别为44.7%和39.5%，临床使用价值不大。
氨基糖苷类抗生素妥布霉素和丁胺卡那霉素的抗菌效果较好，但耐药性也在不断升高，其中妥布霉素的耐药率已达29.8%。
丁胺卡那霉素的耐药率较低为10.8%，但应注意丁胺卡那霉素对耳、肾脏有一定的毒性，而铜绿假单胞菌多见于老年人或有严重基础疾病的患者，临床应短期内应用此类抗生素，并与β-内酞胺类药物联合应用。
碳青酶烯类抗生素的亚胺培南和美罗培南比其他β-内酞胺类更耐受β-内酞胺酶，且与所有的青霉素结合蛋白，特别是与青霉素结合蛋白2（PBP2）具有较强的亲和力，从而显示出了较强的抑菌活性，成为治疗院内严重感染、多重耐药菌感染的有效抗菌药物。
由于临床上广泛使用，近年来，铜绿假单胞菌对其耐药性也在逐步上升[4]。
本研究中，美罗培南的抗菌活性为64.50%，耐药率已达到了25.9%，而亚胺培南的耐药率已达到了34.4%，基本失去使用价值，应引起重视。
总之，本实验结果表明，在本地区丁胺卡那霉素、哌拉西林/他唑巴坦抗菌作用最强；
但临床抗感染经验证明，单一抗生素对大多数革兰阴性杆菌尤其是铜绿假单胞菌的治疗不理想，易出现耐药株，故应采用NCCLS等主张的多使用联合用药[5]，同时为了提高抗生素治疗效果，应经常监测本地区、本单位的病原菌对抗菌药物的敏感性与耐药特性，根据药敏结果有针对性地选用抗菌药物，控制医院铜绿假单胞菌感染的发生率。
参考文献:
[1]马均定，吴智刚，陈启然.铜绿假单胞菌耐药特性的分析及临床抗感染用药的方向性初探[J].海南医药，2005,16（11）:
115-116.
[2]何林，张立军，李勇长.铜绿假单胞菌对22种抗生素耐药性[J].中华医院感染学,2002,12（11）;
853-855.
[3]LeeK,LeeHS,JangSj,etal.Antinlicobialresistancesurveillanceofbacteriainl999inKoreawithaapecialreferencetoresistanceofenterococctiovancomycinandgram-negativebacillitothirdgeneration[J].KoreanMedSci,2001,16:
262-272.
[4]梅亚宁,文怡,陈友华,等.美罗培南和亚胺培南-西司他丁
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