枸杞中枸杞多糖含量的测定Word文档下载推荐.docx
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三、实验原理
用80%乙醇溶液提取以除去单糖、低聚糖、苷类及生物碱等干扰性成分，然后用水提取其中所含的多糖类成分。
多糖类成分在硫酸作用下，先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后和苯酚缩合成有色化合物，用分光光度法于适当波长处测定其多糖含量。
四、试剂
80%乙醇溶液：
用95%乙醇或无水乙醇加适量蒸馈水配制。
硫酸。
苯酚液：
取苯酚100g，加铝片O.lg与碳酸氢钠0.05g，蒸馏收集1721馏分，称取此馏分10g，加水150mL，置于棕色瓶中即得。
葡萄糖标准溶液：
精密称取105T：
干燥至恒重的标准葡萄糖O.lOOOg，加水溶解并定容至lOOOmL即得。
五、仪器
）实验室用样品粉碎机、分光光度计、电热恒温水浴。
六、操作步骤
1-样品处理
精密称取样品粉末0.4g（精确到0.000lg）置于圆底烧瓶中，加80%乙醇溶液200ml回流提取lh，趁热过滤，残渣用80%热乙醇溶液洗涤（约10mLx10次），残渣连同滤纸置于烧瓶中，加蒸馏水l00ml，加热提取1h，趁热过滤，残渣用热蒸馏水充分洗涤（约lOmLxl0次），洗液并入滤液，冷却后移入250mL容量瓶中，用水定容，待Ho
2•标准曲线的绘制%精密吸取葡萄糖标准溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1-OmL中，各加蒸馏水使体积为2.OmL，再各加苯酚液l.OmL，摇匀，迅速滴加硫酸5.0mL,摇匀后放置5min，置沸水浴中加热15min，取出冷却至室温;
另以蒸馏水2mL，加苯酚和硫酸，同上操作为空白对照。
于490nm处测定吸光度，绘制标淮曲线。
3.试样的测定
准确吸取待测液一定量（视待测液含量而定），加蒸馏水至2niL,以下操作按标准曲线绘制下的方法测定吸光度，根据标准曲线查出显色液中葡萄糖含量。
七、结果处理
1.结果记录
比色管号'
葡萄糖标准溶液量/mL
吸光度
1
2
平均
0.00
0.10
0.20
3
0.40
4
0.60
5
0.80
6
1.0
绘制标准曲线。
2.结果计算
式中
w--多糖含量，％;
m2——显色液中葡萄糖的含量
f--3.19,葡萄糖换算为多糖的换算系数；
M2--试样质量，g;
V--吸取待测液的体积，mL。
说明
（1）此方法可很好地用于食品中粗多糖含量的测定，因为不需要对多糖进行纯化和脱色处理。
（2）洗涤粗多糖沉淀时，一定要将离心管壁上粘的其他糖分和碳水化合物用80%乙醇洗净，否则结果会受影响。
实验十二饮料中糖精钠、苯甲酸、山梨酸含量的测定
用高效液相色谱法测定饮料中糖精钠、苯甲酸、山梨酸的含量。
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