花龄对蓝莓柱头可授性及花粉活力的影响-毕业论文.doc
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凯里学院本科毕业论文
学科代码：
070401
学号：
2009407059
本科毕业论文（设计）
题目：
花龄对蓝莓柱头可授性及花粉活力的影响
学院：
凯里学院
专业：
生物科学
班级：
09生本
学生姓名：
指导教师：
老师
2013年4月10日
目录
目录 Ⅰ
摘要 Ⅱ
关键词 Ⅱ
Abstract Ⅱ
key Ⅱ
1前言 1
2材料与方法 2
2.1材料 2
2.2方法 2
2.2.1散粉规律观察 2
2.2.2不同花发育阶段花粉活力与柱头的可授性 2
2.3数据与分析 3
3.结果与分析 3
3.1散粉特性 3
3.2花粉活力及花粉量 3
3.3柱头可授性与粘液分泌 4
4讨论 5
参考文献 7
致谢 8
花龄对蓝莓柱头可授性及花粉活力的影响
蔡陈
（凯里学院环境与生命科学学院贵州凯里556011）
摘要：
以南高从蓝莓“蓝雨”（vacciniumaustrale）为试材，研究了花龄对柱头可授性和花粉活力的影响。
结果表明：
蓝莓雌雄性器官的育性具有同步性，有利于自然授粉结实。
从1-5d花粉活力都较高，特别是花后第2-4天，花粉活力保持在50%以上，是人工辅助授粉花粉的良好收集期；花后第2d-4d柱头分泌黏液较多，此期柱头具有强可授性，是开展人工辅助授粉的最佳时期。
关键词：
蓝莓；花龄；柱头可授性；花粉活力
Effectsoffowlerageonstigmareceptivityandpollenviabilityinblueberry
CaiChen
（Environmentandlifescience,Kailiuniversity,Kaili，Guizhou556011）
Abstract：
Theeffectsoffowlerageonstigmareceptivityandpollenviabilityof‘lanyu’werestudied.Theresultsshowedthatthedevelopmentofmaleandfemaleorganwassynchronizationwhichwasbenefittosettinginopenpollination.Moreover,thepollenhadarelativehighpollenviabilityduring1d-5d,andit’sworthnotingthatthebesttimewas2-4dafterfloweringforthehighpollenviabilitymorethan50%,whichthepollenwasappliedforartificialpollination.Andthebesttimeofartificialpollinationwas2-4dafterfloweringwithstrongstigmareceptivity.
Keywords:
blueberryt;Fowlerage;Stigmareceptivity;pollenviability
5
凯里学院本科毕业论文
1前言
蓝莓（B1ueberry）又称越桔、蓝浆果，杜鹃花科（Ericaceae）越桔属（Vaccinium）多年生落叶或常绿灌木，原产于美国[1]。
其果实富含花青苷、绿原酸、黄酮素、亚麻油酸[2]，低糖、低脂肪，营养保健功能强，可以清除自由基[3]，抗氧化，护眼明目，对抗眼疾，预防癌症，增强身体免疫力，抗衰老，延缓脑神经老化，增强记忆力，强健心脑血管，预防高血压、心脏病和血栓，防治糖尿病及其并发症，强化胶原蛋白，美容护肤，消炎抗感染，对抗溃疡和炎症[4-5]。
随着人们生活水平的提高，蓝莓以风味独特、营养保健功能强，日益受到人们关注，被列入世界第3代水果行列。
目前蓝莓国内外市场需求极大，具有极高的经济价值，是我国调整优化经济林结构、提升果品产业层次的首选果品之一。
因此种植蓝莓必将成为我国一项新兴的快速致富产业[6]。
我国野生蓝莓主要生长在东北和西南山区的林下，发展蓝莓将促进林区产业结构调整，提高林地生产力和林农收入，为林改后林地多种经营提供新选择。
我国蓝莓栽培历史较短，目前正处于快速发展期，栽培管理技术急需普及和提高。
目前关于蓝莓研究的主要集中在扦插和常规的土肥水管理方面[7]，而关于蓝莓开花授粉生物学方面的研究尚未见报道。
授粉生物的研究对指导果树栽培及遗传育种具有重要的指导意义。
一直以来，蓝莓种植者熟知蓝莓多为异花授粉植物，高丛蓝莓自交可孕，但可孕程度在品种间有明显差异；而兔眼蓝莓和矮丛蓝莓一般自交不孕[8-9]，生产上须考虑多品种搭配建园，甚至开展人工辅助授粉以提高产量。
此外，随着近20年来我国蓝莓产业的迅速发展[10]，蓝莓产业在我国南方业得到了较好的发展，但由于其花期正值我国南方春季的‘倒春寒’和多雨季节，因此低温和阴雨等不良因素影响授粉而造成产量下降，开展人工辅助授粉是提高蓝莓坐果率，及应对恶劣天气对蓝莓生产影响的有效途径之一[11]。
花粉活力和和授粉时期是决定人工辅助授粉与否的关键[12]，然而，哪个发育阶段的柱头具有较强的可授性，是开展辅助授粉的最佳时期；那个发育阶段的花粉活力较高，是辅助授粉花粉收集的最佳时期？
这些至今尚未有科学合理的依据。
植物能够顺利完成传粉及受精需要经过花粉附着、花粉水合萌发等一系列复杂的过程[13]。
这一过程受植物自身许多生物学因素，如柱头可授性、花粉活力[14]，及雌雄性器官育性是否同步的影响。
因此开展花龄对蓝莓柱头可授性和花粉活力影响的研究不仅可以为了解蓝莓的生殖生物学特性提供基础资料，而且对生产栽培中人工辅助授粉花粉的选择以及授粉时期的确定提供科学的参考依据，对蓝莓生产具有重要意义。
2材料和方法
2.1材料
1材料
以栽植于贵州省麻江县宣威镇光明村引种试验基地的10棵长势一致，生长健壮且无病害的4年生‘蓝雨’蓝莓植株为试材。
2.2方法
2.2.1散粉规律观察
于盛花始期，每棵树随机选取10个健壮花枝（每个花枝至少100朵花）用枝剪剪下后培养于1%的蔗糖溶液中，迅速带回实验室置于光照充足的窗台进行培养，每天更换一次培养溶液，选10朵气球花挂牌作为观察参照，从开花当天至花瓣与花药自然脱落为止，每天从上午7:
00开始至傍晚19:
00，每隔1个小时随机取各发育阶段的花各10朵，然后将2.0ml的离心管放置于花的正下方，用镊子碰撞花冠，用放大镜观察各发育阶段的花对应的离心管内花粉粒多少，以此来判断各发育阶段花药散粉情况。
然后将碰撞后的各发育阶段的花置于JSZ6连续变倍体视显微镜下，详细观察柱头黏液分泌情况。
2.2.2不同花发育阶段花粉活力与柱头可授性差异
以散粉观察挂牌气球花为对照，选择300朵气球花去雄，然后用纱网套袋，作未授粉的柱头可授性观察材料。
从气球花开始至花瓣与花药自然脱落为止，每天上午11:
00~12:
00取与挂牌参照花开放程度一致的去雄套袋花及自然开放花各20朵。
随机选取10朵花用镊子将各处理材料的花瓣去掉，将柱头朝下，用镊子轻轻碰撞花药，使花药中的花粉全部落在称量纸的光滑面上，将花粉放入1.5ml离心管内，向离心管加入500µl含有0.5%TTC的磷酸缓冲液，摇荡混匀得到花粉悬液，黑暗条件下37℃水浴2h。
每个处理取20µl花粉悬液制片，在BM2000型生物显微镜（10×10）下统计5个视野中花粉粒总量（计算散粉量）及红色花粉占总花粉量的比例（花粉生活力），并照相。
同时将20朵花（包括用于取花粉的10朵花）随机分为两份，一份用JSZ6连续变倍体视显微镜观察花柱柱头黏液分泌情况；另一份参照红雨等[15]的方法，用解剖刀从花柱基部切取花柱，并将花柱置于凹面载玻片上，用联苯胺-过氧化氢法（1%联苯胺:
3%过氧化氢:
水=4:
11:
22，体积比）检测柱头的可授性，用JSZ6连续变倍体视显微镜观察柱头端气泡多少及其边缘颜色，并照相。
2.3数据统计分析
所有的数据用SPSS统计软件（SPSS16.0）进行品种内花龄对花粉散粉量与花粉活力影响，处理间差异在5%的显著度上进行SNK检验。
3、结果与分析
3.1散粉特性
花期跟踪观察发现，蓝雨蓝莓花为总状花序，多数侧生，有时顶生，花序上小花数变化范围较大，少的只有2夺或3朵，多的则有20多朵，花一般着生在枝条顶部，无香气。
蓝莓花为钟状花冠，自然下垂，蕾期花冠为红色或淡红色，随着花的不断发育至开放时，大多花冠变为白色，常具花柱1枚位于花的中央，花药10枚左右，花丝较短，着生于雌蕊的周围，为冠生雄蕊，花药瘦小，两室。
在蕾期花药为红色或淡红色或淡红色，随花的发育至气球花期，花药逐渐变为红棕色，且部分花药此时以孔裂的方式开裂，用手摇动花朵有极少量花粉能够散落在手上，至花后第3天或第4天，用手摇动花朵，此时有更多的花粉能够散落，但散落的花粉总量较少。
同时在气球花期就可以观察到柱头表面乳突细胞，并附着一层黏性水膜，属于湿性柱头，在花后第1-3天后就可以观察到柱头表面附着少量的花粉，在晴天上午9:
00-11:
00柱头分泌粘液较多，蓝莓单花可以持续开放6-8天。
此外，在花期，蜂及其他昆虫主要在晴天10:
30~17:
30时出现，但蜜蜂出现高峰为上午11:
00~12:
30，之后蜜蜂出现的频率越来越低，有时在气温较高的晴天下午16:
00~17:
00也有较多的蜜蜂出现；在温度较低的阴天很少观察到蜜蜂及其他昆虫，而在雨天根本就观察不到蜜蜂。
3.2花粉活力及花粉量
试验结果表明，在气球花期蓝雨蓝莓的花粉已具有一定的活力，并开始散粉，随花的不断发育，花粉的活力越来越高，同时也有更多的花粉能够落出来，到花后第3天花粉活力最高，为67.39%,同时，花后1-5天散粉量较高，特别是花后第2-4天，花粉活力保持在50%以上。
花后第6天，花粉活力与散粉量明显下降，到花后第7天只有极少数的花粉粒能保留在花药药室中，此时花粉活力极低，这与散粉情况结果一致（见表1）。
表1‘蓝雨’蓝莓不同发育阶段花粉活力与密度情况
Table1Pollenviabilityanddensityof‘Lanyu’blueberryatdifferentdevelopmentalstages
花后天数Dayafterblooming（d）
-1
1
2
3
4
5
6
7
8
花粉活力Pollenviability（%）
20.41
38.86
63.25
67.39
56.13
41.68
12.36
0
0
花粉密度Pollendensity（grain/visualfield）
110.40
198.60
286.20
376.60
204.60
99.80
38.60
14.20
0
注：
-1表示开花前1天花蕾。
表2同。
散粉量为10*10生物显微镜5个视野的花粉总量
3.3柱头可授性与黏液分泌
实验结果表明，蓝雨蓝莓在气球花期时的花无论是否去雄，此时已有部分花蕾的柱头已具有可授性并可以持续6天左右。
随着话的发育，蓝雨蓝莓的
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