中性耐温植酸酶对青鱼生长养分表观消化率及血清生化指标的影响.docx
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中性耐温植酸酶对青鱼生长养分表观消化率及血清生化指标的影响
中性耐温植酸酶对青鱼生长、养分表观消化率及血清生化指标的影响
植酸酶是近几年来发展很迅速的饲用酶制剂之一，市场上常见植酸酶一般在酸性环境下能发挥较大酶活性，可在畜禽等酸性环境的消化道内发挥较好作用，因而在畜禽饲料生产中已为人们接受。
常规淡水鱼饲料主要由菜粕、棉粕、麦类等植物原料构成，植酸含量较高，一般占配方0.4%以上。
据研究，植酸含量与水产动物采食量、生长速度呈负相关（VegardDenstadli等，2006），而水产动物不能分泌降解植酸的植酸酶，对植酸中的磷利用率较低，磷随排泄物进入水中，造成水体富营养化（Correll，1999），最终影响养殖效益。
饲料中添加植酸酶是提高水产动物对磷的利用率和生产性能、降低磷污染的有效途径。
据报道，中性植酸酶发挥作用的适合pH值在7.0左右（Kim等，1998；Tye等，2002），适合在消化道环境为中性的无胃鱼中发挥作用。
近年来，国内中性植酸酶在鱼中的应用效果也已经得到证实（曾虹等，2002；罗琳等，2007）。
从缓解饲料资源短缺、提高水产养殖业经济效益和利于环保等功效来看，中性植酸酶在水产料中具有重要的价值和良好的应用前景。
本试验旨在研究中性耐温植酸酶对青鱼生长、血液生化指标及养分消化率的影响，为中性植酸酶在无胃鱼中的应用提供参考。
1材料与方法
1.1试验鱼和试验酶
试验青鱼购自武汉东西湖渔场，初始体重27.3g
左右。
正式试验前在动物营养与饲料科学湖北省重点
实验室（武汉工业学院动物科学与营养工程学院）暂养
池（2m×1.5m×1.5m）饲养驯化1周。
中性耐温植酸酶由武汉新华扬生物股份有限公司
提供，活性2500HYU/g（酶活性单位定义：
在温度
30℃、pH值6.00条件下，每分钟从浓度为5.0mmol/l
植酸钠溶液中释放1mmol无机磷，即为一个植酸酶活
性单位，以HYU表示。
）
1.2试验分组及日粮处理
选择体质健康、大小基本一致的试验鱼，经药物
浸洗后随机分为5组，每组设3个重复，每个重复15
尾鱼，随机放入已经消毒的室内圆形水族箱（直径
80.0cm，高60.0cm）中饲养。
采用牧羊颗粒饲料机-180（DDC调质器）生产
2mm粒径的试验日粮，调质温度控制（85±2）℃。
试验
分组及日粮配方分别见表1、表2。
《饲料工业》·2010年第31卷第8期
项目
对照组
试验Ⅰ组
试验Ⅱ组
试验Ⅲ组
试验Ⅳ组
处理
基础日粮
试验配方1
试验配方2
试验配方3
试验配方4
描述
对照组配方
对照组配方降低0.75%Ca（H
2
PO
4
）
2
，同时添加植酸酶500HYU/kg饲料
对照组配方添加植酸酶500HYU/kg饲料
对照组配方降低0.75%Ca（H
2
PO
4
）
2
，同时添加植酸酶1000HYU/kg饲料
对照组配方添加植酸酶1000HYU/kg饲料
表1试验分组及日粮处理
1.3饲养管理
试验于2008年9月9日至11月25日在动物营
养与饲料科学湖北省重点实验室进行，试验期77d，采
用循环水养鱼，24h充气增氧，每天投喂2次，时间分
别为9:
00和16:
00，投喂率为鱼体重的2%~3%。
保持水
中溶解氧大于6mg/l，NH
3
-N小于0.2mg/l，试验期间
保持水温为25~30℃，pH值为7.0~7.5，光照周期为12h
光照和12h黑暗（8:
00~20:
00）。
1.4试验指标
1.4.1生长性能
试验结束前1d停食以重复为单位对试验鱼称
重，计算增重率和饵料系数。
酶制剂
12增重率（%）=[（试验末鱼均重-试验初鱼均重）/试验
初鱼均重]×100；
饵料系数（F/G）=摄取的饲料总重量/（试验末鱼总
体重-试验初鱼总体重）。
1.4.2养分表观消化率
采用虹吸管收集鱼粪便，具体方法如下：
饲喂含
0.1%Cr
2
O
3
饲料7d后，每天喂料后2h用虹吸管收集
粪便，再挑选外表带有包膜的完整条状粪便于65℃烘
箱中烘干备用。
采用二苯碳酰二肼丙酮法测定Cr
2
O
3
含量，常规方法[水分测定采用冷冻干燥机干燥测定
法、粗蛋白采用凯氏定氮法（GB6432—86）、粗脂肪采
用索氏抽提法（GB6433—86）、粗灰分采用高温灼烧法
（GB6438—86）、钙的测定采用EDTA法、磷的测定采
用磷矾钼酸比色法]检测饲料及粪便干物质、粗蛋白
质、粗脂肪、粗灰分、钙和磷含量，计算饲料干物质、粗
蛋白质、粗脂肪、粗灰分、钙和磷的表观消化率。
干物质表观消化率（%）=（1-饲料Cr
2
O
3
含量/粪便
Cr
2
O
3
含量）×100；
某养分表观消化率（%）=（1-
饲料Cr
2
O
3
含量
粪便Cr
2
O
3
含量
×
粪便某养分含量
饲料某养分含量
）×100。
1.4.3血液生化指标
血液送武汉市第七医院检测血清碱性磷酸酶
（AKP）、血钙及血磷含量。
1.5数据分析
结果用平均数±标准差表示。
数据采用SPSS16.0
软件进行ONE-WAYANOVA分析，并以LSD作多重
比较，以P＜0.05作为差异显著性判断标准。
2结果与分析
2.1中性耐温植酸酶对青鱼生长的影响（见表3）
表3中性耐温植酸酶对青鱼生长的影响
项目
对照组
试验Ⅰ组
试验Ⅱ组
试验Ⅲ组
试验Ⅳ组
初均重（g）
27.36±1.04
27.35±1.25
27.31±3.06
27.36±2.31
27.35±1.90
末均重（g）
57.63±6.23
58.37±8.65
63.33±7.80
60.66±9.53
67.63±8.35
增重率（%）
110.49±8.79
a
113.42±6.27
a
131.93±5.57
b
121.71±7.28
ab
147.36±9.48
b
饵料系数
2.01±0.13
2.05±0.25
1.85±0.32
2.03±0.39
1.79±0.17
注：
同列数据肩标小写字母不同者表差异显著（P<0.05），下表同。
从表3可以看出，配方中直接添加植酸酶（试验
Ⅱ组、试验Ⅳ组）增重率相对对照组显著提高19.4%
和33.4%（P<0.05），添加1000HYU/kg植酸酶效果优
于500HYU/kg，但差异不显著（P>0.05）；植酸酶替代
配方0.75%的磷酸二氢钙（试验Ⅰ、Ⅲ组）增重率与对
照组相比分别提高了2.7%和10.2%（P>0.05）；饵料系
数方面，直接添加植酸酶的Ⅱ组饵料系数有所降低
（P>0.05），试验Ⅰ、Ⅲ组饵料系数有所增加，但各处理
组差异不显著（P>0.05）。
2.2中性耐温植酸酶对青鱼饲料表观消化率的影响
（见表4）
从表4可见，日粮中使用植酸酶均提高了青鱼对
干物质的消化率，其中试验Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组相对对照组差
原料
次粉（%）
大豆粕（%）
菜籽粕（%）
棉仁粕（%）
进口鱼粉（%）
豆油（%）
盐（%）
Ca（H
2
PO
4
）
2
（%）
氯化胆碱（%）
鱼用多维（%）
鱼用多矿（%）
Cr
2
O
3
（%）
抗氧化剂（%）
植酸酶（HYU/kg）
营养水平（%）
粗蛋白
粗脂肪
水分
粗灰分
钙
磷
对照组
23.86
37.82
15.00
12.00
6.00
2.00
0.30
1.50
0.30
0.30
0.80
0.10
0.02
0
34.07
2.41
10.02
8.21
1.30
0.81
试验Ⅰ组
24.51
37.82
15.00
12.00
6.00
2.00
0.30
0.75
0.30
0.30
0.80
0.10
0.02
500
34.11
2.40
10.05
8.15
0.91
0.61
试验Ⅱ组
23.76
37.82
15.00
12.00
6.00
2.00
0.30
1.50
0.30
0.30
0.80
0.10
0.02
500
34.09
2.42
10.04
8.20
1.31
0.82
试验Ⅲ组
24.41
37.82
15.00
12.00
6.00
2.00
0.30
0.75
0.30
0.30
0.80
0.10
0.02
1000
35.11
2.45
10.06
8.16
0.91
0.60
试验Ⅳ组
23.66
37.82
15.00
12.00
6.00
2.00
0.30
1.50
0.30
0.30
0.80
0.10
0.02
1000
34.09
2.41
10.04
8.23
1.31
0.82
表2试验日粮配方及营养水平
舒秋艳等：
中性耐温植酸酶对青鱼生长、养分表观消化率及血清生化指标的影响
酶制剂
13异显著（P<0.05），分别提高了12.9%、9.2%和15.8%；使
用植酸酶有提高青鱼对粗蛋白、粗脂肪、粗灰分及钙表
观消化率的趋势，但试验各处理组未表现出明显差异
（P>0.05）；植酸酶替代配方0.75%的磷酸二氢钙（试验
Ⅰ和Ⅲ组），青鱼对磷的表观消化率显著提高了9.3%
和9.4%（P<0.05），直接添加植酸酶（试验Ⅱ和Ⅳ组）磷
的表观消化率也有所提高，但差异不显著（P>0.05）。
2.3中性耐温植酸酶对青鱼血清生化指标的影响（见
表5）
表5中性耐温植酸酶对青鱼血清生化指标的影响
项目
对照组
试验Ⅰ组
试验Ⅱ组
试验Ⅲ组
试验Ⅳ组
碱性磷酸酶（U/l）
160.55±13.90
a
155.22±4.35
ab
144.11±19.45
ab
160.51±8.72
a
135.89±7.56
b
血钙（mmol/l）
3.04±0.29
3.09±0.71
3.05±0.35
3.03±0.13
3.29±0.16
血磷（mmol/l）
3.01±0.46
2.91±0.43
3.11±0.12
3.02±0.41
3.14±0.44
由表5可知，相对对照组，植酸酶替代配方0.75%
的磷酸二氢钙（试验Ⅰ和Ⅲ组）青鱼血清AKP有所下
降，差异不显著（P>0.05），直接添加植酸酶（试验Ⅱ和
Ⅳ组）也降低了青鱼血清AKP含量（P>0.05），试验Ⅳ组
AKP含量显著低于试验Ⅲ组和对照组（P<0.05），分别
下降了15.4%和15.3%；试验不同处理没有显著影响青
鱼血钙含量，组间差异不显著（P>0.05）。
直接添加植酸
酶有提高青鱼血磷含量的趋势，但差异不显著（P>
0.05），植酸酶替代配方0.75%的磷酸二氢钙也没有显
著影响青鱼血磷含量（P>0.05）。
3讨论
3.1中性耐温植酸酶对青鱼生长的影响
磷是水产动物生长必需营养素，中性植酸酶可水
解鱼配方原料中植酸释放磷从而有助促进鱼的生长
（罗琳等，2007）。
Schafer等（1995）在以大豆粉、鱼粉和
大麦为基础的饲料中添加500和1000FIU/kg植酸酶
饲喂鲤鱼，结果鱼体增重加快。
罗琳等（2007）研究中
性植酸酶在花鲈豆粕型饲料中替代磷酸二氢钙使
用时发现，经8周的养殖试验后，在饲料中用1000或
1500FTU/kg的中性植酸酶替代不同比例（60%、80%
和100%）的磷酸二氢钙后对花鲈的末均重、特殊生长
率、饲料系数、蛋白质效率以及成活率均没有显著影响
（P>0.05）。
曾虹等（2002）报道，在饼粕含量为65%的鲤鱼
料中，添加1000U/kg的中性植酸酶可以替代部分磷
酸二氢钙而不影响体增重，并得出结论：
饲料中添加中
性植酸酶对鲤鱼日增重的影响与添加0.85%～1.28%的
磷酸二氢钙相当，即添加中性植酸酶可替代0.17%~
0.27%的有效磷。
高春生等（2006）研究表明，饲料中添加
植酸酶可提高草鱼的平均日增重、平均日采食量，降
低饵料系数和病死率。
Soares（1994）在鲈鱼饲料中
添加2400U/kg植酸酶发现鱼的生长与添加1.3％的
磷酸二氢钙的鱼生长相同。
本试验研究发现，饲粮中植酸酶替代配方0.75%
的Ca（H
2
PO
4
）
2
使用没有影响青鱼生长性能，与他人报
道类似（杨林等，2000；罗琳等，2007）；饲料中直接添加
中性植酸酶提高了青鱼生长性能，表明配方有效磷水
平可能未满足青鱼生长需求，植酸酶释放出原料植酸
中的磷有助于青鱼发挥生长潜能。
3.2中性耐温植酸酶对青鱼饲料表观消化率的影响
植酸酶可提高水产动物对常规养分的表观消化率
（Cheng等，2002），主要原因是植酸对内源胃蛋白酶、
胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的活性有抑制作用（白东清
等，2004），会降低蛋白质、淀粉、脂肪这些营养物质的
消化吸收（BitarK等，1972），而植酸酶的添加可以解除
植酸与内源酶等的结合，提高内源酶的活性，从而提高
养分消化率（杨林等，2000）。
本试验发现，使用植酸酶
后，青鱼对粗蛋白、粗脂肪、粗灰分及钙表观消化率有
提高的趋势，但试验各处理未表现出明显差异（P>
0.05），可能原因是植酸酶的作用效果与底物-植酸的
含量、鱼的大小及消化道发育程度有关（Baruah等，
2004）。
植酸酶可提高鱼类对磷的利用率。
Schafer等
（1995）研究发现，鲤鱼豆粕型日粮中添加植酸酶500
或1000U/kg可释放20%和40%的植酸磷；余丰年等
（2000）研究发现，异育银鲫饲料中添加500U/kg的植
酸酶可分解60%的植酸磷，添加1000U/kg的植酸酶
表4中性耐温植酸酶对青鱼养分表观消化率的影响（%）
项目
对照组
试验Ⅰ组
试验Ⅱ组
试验Ⅲ组
试验Ⅳ组
干物质
66.45±2.34
a
70.24±3.01
ab
75.03±4.22
b
72.59±0.89
b
76.94±2.61
b
粗蛋白
87.90±2.71
88.80±3.37
89.08±3.39
89.11±0.47
87.93±0.67
粗脂肪
82.98±2.61
82.44±4.67
82.59±5.44
83.98±4.62
82.57±0.92
粗灰分
62.53±3.60
65.39±5.01
64.89±6.25
65.43±6.21
64.49±6.51
钙
44.24±3.25
47.13±5.63
47.87±4.63
50.14±3.94
48.59±0.91
磷
63.23±2.69
a
69.09±4.54
b
66.21±3.55
ab
69.15±4.71
b
65.45±2.67
ab
舒秋艳等：
中性耐温植酸酶对青鱼生长、养分表观消化率及血清生化指标的影响
酶制剂
14可分解80%的植酸磷。
Riche等（1996）发现，1000IU/kg
的植酸酶可提高虹蹲对豆粕中磷的表观利用率，并且
在很大程度上减少了磷的排泄量。
周萌等（2004）研究
表明，饲料中添加1000IU/kg植酸酶能有效改善南美
白对虾的磷利用率。
罗琳等（2007）研究表明，在饲料中
用中性植酸酶替代磷酸二氢钙能显著提高花鲈对饲料
中磷的利用，并推荐用中性植酸酶1000U/kg饲料替
代80%左右的磷酸二氢钙。
Furuya等（2001）、杨雨虹等
（2006）在罗非鱼和鲤鱼中也分别发现日粮中添加植酸
酶能提高磷的利用率25％～55％。
本试验发现，植酸酶
替换配方0.75%的磷酸二氢钙后，青鱼对磷的表观消
化率显著提高了9.3%和9.4%，差异显著（P<0.05），与
前人报道类似（罗琳等，2007；JohanneDalsgaard等，
2009）。
3.3中性耐温植酸酶对青鱼血清指标的影响
检测植酸酶对血浆中矿物元素含量的影响也是衡
量植酸酶改善动物矿物元素吸收利用最可靠、最敏感
的手段之一。
低磷日粮会导致虹鳟鱼血磷降低（Coloso
RM等，2003）。
本试验发现，各试验组没有显著影响
青鱼血钙和血磷含量，组间差异也不显著（P>0.05），表
明试验处理并未改变青鱼对Ca和P的吸收利用。
碱性磷酸酶（AKP）是广泛存在于动物血液和各种
器官内（骨骼肌、肝脏、肠粘膜）的一种糖蛋白，在成骨
过程中水解磷酸酯，为羟磷灰石的沉积提供必需的磷
酸，其浓度反映了成骨细胞的代谢活性，即当血磷浓度
降低（缺磷）时，成骨细胞活动增强，合成大量碱性磷酸
酶释放入血。
陈新宇等（2005）研究在对虾中应用植酸
酶时发现，添加植酸酶有降低对虾血清碱性磷酸酶活
性、提高血清磷浓度的趋势，同时对血清钙浓度影响不
大。
郑涛等（2006）研究无鱼粉饲料中添加磷和植酸酶
对奥尼罗非鱼生长性能及体成分的影响时发现，添加
植酸酶显著降低了罗非鱼血清碱性磷酸酶活性（P＜
0.05）。
Shuenn-DerYang等（2005）研究日粮磷水平对
澳洲银鲈生长的影响时也发现，当日粮磷缺乏时，银鲈
血清碱性磷酸酶含量会升高。
本试验发现，相对对照
组，植酸酶替代配方0.75%的磷酸二氢钙（试验Ⅰ组和
试验Ⅲ组）青鱼血清AKP有所下降，但差异不显著（P>
0.05），同时也没有显著影响青鱼血磷含量（P>0.05），表
明青鱼并未因植酸酶替代配方磷酸二氢钙而表现出缺
磷，植酸酶释放出原料中的磷弥补了减少的磷酸二氢
钙的磷的下降；直接添加植酸酶也降低了青鱼血清
AKP含量（P>0.05），可能原因是植酸酶没有影响血磷
含量（P>0.05），成骨细胞代谢活性没有变化导致AKP
不变，这些结论与陈新宇等（2005）研究结论类似。
4结论
饲料中直接添加中性耐温植酸酶500~1000HYU/kg
可有效促进青鱼的生长，提高青鱼对常规养分的表观
消化率（P>0.05）；饲料中磷酸二氢钙的用量降低0.75%
同时使用中性耐温植酸酶青鱼生长不受影响，同时磷
的表观消化率显著提高（P<0.05）。
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