安捷伦1100使用步骤.wps

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Agilent1100型高效液相色谱仪操作规程1.开机1.1开机前准备：

流动相使用前必须过0.45m的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。

A瓶棕色瓶：

为水相；B瓶：

为有机相。

超声去除瓶内液体中气泡。

1.2打开电脑，进入WindowsXP界面。

1.3从上到下打开液相各部件电源开关。

1.4在打开液相主机电源5分钟内双击桌面“联机”图标，仪器自检，进入工作站。

该页面主要由以下几部分组成：

最上方为命令栏，依次为“文件、运行控制、仪器”等；命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件等；中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：

进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。

1.5从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。

2.编辑参数及方法2.1开始编辑完整方法：

从从“方法方法”菜单中选择菜单中选择DEF-LC.M，再从，再从“方法方法”菜单中选择菜单中选择“编辑完整编辑完整方法方法”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击OK，进入下一画面。

2.2方法信息：

在“方法注释”中加入方法的信息，如方法的用途等。

单击OK，进入下一画面。

2.3泵参数设定：

进入“泵参数”画面，在“流量”处输入流量，如1.0mL/min；在“溶剂B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在“插入”一行“时间表”，编辑梯度；输入保留时间；在“最大压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。

单击OK，进入下一画面。

2.4DAD检测器参数设定：

进入“DAD信号”画面，输入样品波长及其带宽、参比波长及其带宽（参比波长带宽默认值为100nm）；选择“停止时间”输入相应的停止分析时间；在“光谱范围”中输入采集光谱方式“store”：

选All；如只进行正常检测，则可选None；“范围”：

可选范围为190950nm；“步长”可选2.0nm；阀值：

选择需要的灯；“峰宽”（响应时间）即响应值应尽可能接近要测的窄峰峰宽，可选“2s”或4s；Slit-：

狭窄缝，光谱分辨率高；宽时，噪音低。

可选4nm单击OK，进入下一画面。

2.5进入“SignalDetails”画面，单击OK，进入下一画面。

2.6进入“编辑积分事件”画面，单击OK，进入下一画面。

2.7进入“积分参数”画面，单击OK，进入下一画面。

2.8进入“Instrumentcurves”画面，单击OK，进入下一画面。

2.9进入“运行时间表”画面，选择“DateAcquistition”和“StandardDateAnalsis”，单击OK，完成参数设定，回到工作站画面。

2.10单击单击“方法方法”菜单，选中菜单，选中“方法另存为方法另存为”，输入文件名，单击，输入文件名，单击OK。

（路径：

eHPCHEM1methods*）注：

如果调用一个方法，则在“方法”菜单，选中“调用方法”，选方法名，单击OK。

2.11从菜单“视图”中选择“在线信号”，选中Window1，然后单击“改变”钮，将所要绘图的信号双击即可移到右边的框中，点OK。

（如同时检测二个信号，则重复该步骤。

）3.运行样品3.1单击泵图标下面的小瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，并且选停泵体积。

单击OK。

3.2手动打开手动打开Purge阀阀：

逆时针转23圈。

3.3单击泵图标，出现参数设定菜单，单击“泵参数”选项，进入泵编辑画面。

设流量：

设流量：

5.0ml/min，“溶液，“溶液A：

100%”，单击”，单击OK。

3.4开泵：

直接点泵图标下面的泵开关小图标，或单击图标，出现参数设定菜单，单击“泵控制”选项，选中“on”，单击OK。

3.5系统开始排液，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，系统开始排液，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，切换通道继续排液（双击泵图标，设置“溶液切换通道继续排液（双击泵图标，设置“溶液B：

100%”，确定），”，确定），直到所有通道无气泡为止。

直到所有通道无气泡为止。

（每个管线内液体约20ml，在2.0ml/min的流速下，均需10min左右才能排完）3.6单击泵图标，出现参数设定菜单，单击“泵设置”选项，进入泵编辑画面。

把“流量”改为把“流量”改为0.51.0ml/min，单击OK。

3.7等待流速降下来后，关闭排液阀。

等待流速降下来后，关闭排液阀。

3.8待压力稳定后，从“仪器”菜单中选择“系统启动”或单击GUI图标的On图标启动系统。

开始走基线，并可选择观察信号。

注：

仪器运行过程，画面颜色由灰色转变成黄色或绿色，当各部件都达到所设参数时，画面均变为绿色，左上角红色的“notready”变为绿色“ready”，表明可以进行分析。

（此时如果要终止仪器的运行，可单击流程图右下角的“off”，再单击“Yes”，关闭输液泵和检测器氘灯）。

3.9单击最大化按钮，将onlinePlot窗口放大。

待基线平稳后，点信号窗口的“平衡”，调至零点。

3.10等仪器Ready，从“运行控制”菜单中选择F5或“运行方法”。

3.11编辑样品信息：

从“运行控制”菜单中选择“Sampleinto”选项，选择“样品信息”，即打开了样品信息页面，输入操作者、数据存贮通道、样品名、进样瓶号、浓缩因子、稀释因子，“数据文件”中选择“前缀”，在“前缀”框中输入批号或日期等，在“计数器”框中输入计算器的起始位，仪器会自动命名。

（“样品量”、“内标量”可不选，Location只对自动进样器有用，不填则走空白，检查干扰峰的来源。

）单击OK。

3.12进样分析：

吸取一定量可直接进样的样品溶液，将进样阀逆时针旋转至“Load”档，将进样针从进样孔中水平插入，按进样器活塞将样品注入进样环后，立即将进样阀顺时针旋至“Inject”位置，与此同时，数据开始自动收集。

进样过程要求“快、准、轻”。

3.13进样分析结束，点Close键退出样品分析。

（注意：

检测完尽量要关（注意：

检测完尽量要关DAD的灯，以保持灯的寿命。

的灯，以保持灯的寿命。

单击DAD图标，出现参数设定菜单，单击control，选择关灯。

）4.数据分析方法编辑（一般应在“脱机”状态下操作，在“联机”状态下系统过于繁忙容易死机。

）4.1从“视图”菜单中选“数据分析”进入数据分析画面。

该页面最上方为命令栏，依次为“文件、Graphics，积分”等。

命令栏下为快捷操作图标，如积分、校正、色谱图、单一色谱图调用、多色谱图调用、调用方法、保存等。

4.2从“文件”菜单中选从“文件”菜单中选“Loadsignal”，或单击快捷操作的，或单击快捷操作的“单一色单一色谱图调用谱图调用”图标，选择色谱图文件名，单击图标，选择色谱图文件名，单击“OK”，画面中即出现所调，画面中即出现所调用的色谱图。

用的色谱图。

4.3做图谱优化，从做图谱优化，从“Graphics”菜单中选择菜单中选择“Signaloptions”选项。

选项。

从从“系列”“系列”Ranges中选择中选择Auaoscale及合适的显示时间，单击及合适的显示时间，单击OK，或选择或选择“UseRanges”调整。

反复进行，直到图的比例合适为止。

调整。

反复进行，直到图的比例合适为止。

4.4积分4.4.1先调用所要分析的色谱图，从“积分”中选择“自动积分”，从“积分”中选择“积分结果”，此时仪器将内置的积分参数给出积分结果。

如积分结果不理想，再从“积分”菜单中选择“积分事件”选项，或单击快捷操作的“编辑/设定积分表”图标，此时，在屏幕下方左侧出现积分参数表，右侧为积分结果，在积分参数表中按实际的要求输入修改的参数，如斜率、峰宽、最小峰面积、最低峰高等。

4.4.2从“积分”中选择“Integrate”选项或单击快捷操作的“对现有色谱图积分”图标，仪器即按照新设定的积分参数重新积分。

4.4.3若积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。

4.4.4完成后，单击左边的“”图标，将积分参数存入方法。

4.5打印报告：

4.5.1从“Report”菜单中选择“Specifyreport”选项，或单击最右侧快捷操作的“定义报告及打印格式”（右下角带叉的报告画面）图标，进入打印画面。

4.5.2根据实际要求选择报告的格式和输出形式等。

可在“Calculate”右则的黑三角中选“Percent”（面积百分比），其它项不变。

（如“Destination”项下选择“Screen”；“BasedOn”选“Area”；“SortedBy”选“Signal”；“RepirtStyle”选“Short”；选择“AddchromatogramOutput（打印色谱图）”；选择“WithCalibratedPeaks”；选择“Portrait”；可根据需要选择“Size”）。

4.5.3单击OK。

4.5.4选择快捷操作的“报告预览”图标，可预览报告的全貌。

从“Report”菜单中，选择“PrintReport”，则报告打印到屏幕上，如想输出到打字机上，则单击“Print”，即可进行报告的打印。

最后，单击“close”退出此操作页面。

4.6定量分析如果需要进行标准曲线制备，可按此项进行操作。

4.6.1一级校正表的建立：

在“DataAnalysis”界面下，调用最低浓度的色谱图，在“栏“Calibration”下，选择“ewCalibrationTable”，选择“AutomaticSetupLevel”，并设校正级数为“1”，单击“”。

在画下方左侧出现校正表，右侧为校正图。

在画面左下侧的校正表中选择所要的色谱峰，输入校正级数、化学物名称及浓度，如果采用内标法，需对内标峰进行标记。

单击，工作站提示是否删除0浓度行，单击Yes。

4.6.2二级校正表的建立：

调用第二个色谱图，在命令栏“Calibration”下，选择“AddLevel”，设为“2”，单击“”，在画面左下侧的校正表中输入校正级数、化学物名称及样品浓度。

（如需对校正表中的某些数据进行重新修正，可调用新的图谱，在命令栏“Calibration”下，选择“Recalibration”，并在校正表中输入校正级数，样品浓度。

）此时，校正表右侧自动绘制各组分的标准曲线，并进行线性回归。

单击校正表中的“Print”，可进行打印。

5.关机5.1关机前，用过缓冲盐溶液必须先用100%的水冲洗系统（打开排液阀，调流速为5ml/min，冲洗约5min，然后调流速为1ml/min，待流速降下来后，关闭排液阀，再冲洗冲洗约20min）；然后用甲醇同法清洗20min，然后关泵。

注意：

此方法适用于反相色谱柱，而正相色谱柱应用适当的溶剂冲洗。

5.2清洗进样器：

将进样器扳至Load的位置，用专用的注射器装约10ml适当溶剂冲洗进样器。

当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口，同时扳动进样阀数次，每次数毫升。

5.3退出化学工作站，及其它窗口，关闭计算机（用shutdown）。

5.4关掉Agilent1100电源开关。

6.清理台面，按有关规定填写仪器作用记录。

1.开机1.1开机前准备：

流动相使用前必须过0.45m的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。

A瓶棕色瓶：

为水相；B瓶：

为有机相。

超声去除瓶内液体中气泡。

1.2打开电脑，进入WindowsXP界面。

1.3从上到下打开液相各部件电源开关。

1.4在打开液相主机电源5分钟内双击桌面“联机”图标，仪器自检，进入工作站。

该页面主要由以下几部分组成：

最上方为命令栏，依