植物生物学实验植物生理教案.docx

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植物生物学实验植物生理教案

植物生物学实验（植物生理）教案

实验一多酚氧化酶活性测定

一、实验目的：

掌握测定多酚氧化酶活性的方法；了解多酚氧化酶的特性二、实验原理：

多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化生成醌。

醌有颜色，在525nm下有最大光吸收，通过分光光度法测定反应体系颜色变化可测定酶活性。

三、器材与试剂

低温离心机、s22pc分光光度计、儿茶酚、pH磷酸缓冲液四、实验内容：

1．称取马铃薯克，加入pH磷酸缓冲液，少许PVP，研磨匀浆，转移到离心管，再用pH磷酸缓冲液冲洗研钵，合并提取液。

4℃4000rpm离心15分钟，上清液即为粗酶液。

2．在试管中，加入pH磷酸缓冲液，儿茶酚以及1mL粗酶液，空白调零以1mL磷酸缓冲液代替粗酶液。

3．A值测定：

加入粗酶液后迅速混匀，立刻于525nm下测定反应体系的A值，每隔30秒记录一次，共记录5次。

4．计算酶活力。

按下式计算PPO活性＝U/mingFW

A值增加定义为一个酶活力单位。

五、实验报告：

计算所测材料的PPO活性。

选择A值变化均匀的三组数值求平均值。

实验二植物耐盐生理指标测定

一、实验目的：

1、了解盐胁迫的机理以及植物的耐盐机制2、了解植物盐处理的方法

3、掌握植物体内脯氨酸含量测定的原理和方法4、掌握过氧化物酶活性的测定原理和方法5、掌握丙二醛含量的测定方法6、掌握基本的数据统计方法二、实验原理

植物在盐胁迫下,植物可通过积累一定量的脯氨酸降低水势,维持植物体内的水分平衡,保证植物的正常生长。

脯氨酸本身是一种水溶性最大的氨基酸，它可以防止原生质体的水分散失，在植物细胞生理干旱时，它的增加有助于细胞或组织保持水分。

用磺基水杨酸提取植物样品时，脯氨酸便游离于磺基水杨酸的溶液中，然后用酸性茚三酮加热处理后，溶液即成红色，色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。

在520nm波长下比色，从标准曲线上查出脯氨酸的含量。

植物在盐胁迫下，活性氧含量会明显增加，对植物体产生毒害，而过氧化物酶会清除植物体内多余的活性氧。

过氧化物酶广泛存在于植物的各个组织器官中。

在有过氧化氢存在的条件下，过氧化物酶可以使愈创木酚氧化，产生茶褐色物质，在470nm处有最大吸收峰，可根据单位时间内A470的变化值，计算POD活性大小。

植物在盐胁迫下，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛是其产物之一，通常将其作为脂质过氧化指标，用于表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。

丙二醛是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸反应生成红棕色的三甲川，其最大吸收波长在532nm。

但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，532nm处也有吸收。

植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。

三、实验主要仪器和试剂

仪器:

离心机；分光光度计；恒温水浴锅

试剂：

酸性茚三酮溶液；冰醋酸；标准脯氨酸溶液；3％磺基水杨酸；过氧化物酶测定反应液；磷酸缓冲液10％

TCA；％TBA

四、实验步骤

实验材料的培养

小麦种子吸胀8h后消毒、4℃下春化30天，采用砂培法种植，至三叶期，作为供试材料。

盐胁迫处理1

用200mmol/LNaCl对小麦进行盐胁迫，以未进行盐胁迫为对照，以进行盐胁迫为处理，盐胁迫3d后分别测定脯氨酸含量、过氧化物酶活性和丙二醛含量，对照和处理分别重复3次。

脯氨酸含量测定

1.标准曲线的制作

用100μg/ml脯氨酸配制成、、、、μg/ml的标准溶液。

取标准溶液各2ml,加2ml3%磺基水杨酸，2ml冰醋酸和%茚三酮试剂于具塞试管中，置沸水浴中显色1h，冷却后与波长520nm测定A值，以A值为纵坐标，脯氨酸浓度为横坐标绘制标准曲线。

2.脯氨酸的提取

称取小麦叶片，加3%磺基水杨酸5ml研磨提取，匀浆移至试管中，在沸水浴中提取10min，冷却后，4000rpm离心20min，上清液即为脯氨酸粗提液。

3.反应体系

取上清液2ml，并加入1ml冰醋酸，2ml酸性茚三酮，混匀置于沸水浴中显色。

以2ml磺基水杨酸，1ml冰醋酸，2ml酸性茚三酮为对照。

在可见分光光度计下520nm处测得A值。

4.脯氨酸的含量的计算

从标准曲线查得脯氨酸浓度，计算出样品中脯氨酸的含量，以每克材料鲜重含脯氨酸的微克数表示。

过氧化物酶活性的测定

1.过氧化物酶的提取

称取小麦叶片，加5mlpH的磷酸缓冲液，再加入PVP-30及少量石英砂研磨。

4℃，4000rpm离心15分钟，上清液为酶粗提取液2.反应体系

25μl酶粗提取液加入4ml反应液，在可见分光光度计下470nm处测A值，放入后立即记时，每隔20s记一次数值，连续记录三次，取平均值。

3.酶活力定义

过氧化物酶活性以每克鲜重每分钟在470nm下A值的变化值，设每变化为一个酶活力单位。

过氧化物酶活性=U/min·g丙二醛含量测定

1.丙二醛提取

小麦叶片，加入10﹪三氯乙酸（TCA）5mL（分两次加）和少量石英砂充分研磨，匀浆液以4000r/min离心20min，上清液即为样品提取液。

2.反应体系

取2mL提取液，分别加入2mL﹪TBA液，混匀，在试管上加盖塞，置于沸水浴中沸煮15min，迅速冷却，离心。

取上清液测定532nm和450nm下的A值。

以2mL水代替提取液调零。

含量计算：

根据C＝×A532－×A450，计算出样品提取液中丙二醛的浓度C，然后再计算出每克样品中丙二醛的含量（μmol/g。

五、思考问题

1.为什么设定重复处理？

2.分光光度法要求A值在多大范围内，数据才可靠，如何调整？

六、实验报告

主要内容包括：

1.实验目的及要求2.实验主要仪器和试剂3.实验原理4.实验步骤5.实验结果6.结果分析7.回答问题

实验三植物的元素缺乏症——砂培法

一、实验目的：

熟悉植物营养缺乏症的典型症状，熟悉砂培法。

二、实验原理：

除了水分，植物还需要各种矿质元素来维持正常的生理活动。

缺乏矿质元素植物就不能很好的生长，同时还会表现出相应的症状。

应用砂培法可以观察矿质元素对植物生活的必需性，并避免土壤里的各种复杂因素。

三、器材与试剂：

塑料盆、大烧杯、量筒试剂见实验指导

2

四、实验内容：

1．按照实验指导表格配制各种缺素培养液。

配制时，先取蒸馏水900毫升，然后加入贮备液，最后配成1000毫升，调pH。

2．将细砂洗净，装入干净的塑料盆内，然后选择长势一致的小麦或玉米幼苗进行移栽，均匀栽种，每盆8－10株。

浇灌相应的培养液，贴标签。

3．2－3周后观察结果，记录小麦植株的生长状况。

五、实验报告：

记录小麦缺素培养的症状，并进行分析。

实验四根系活力测定

植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水平。

本实验练习测定根系活力的方法，为植物营养研究提供依据。

一、实验目的：

掌握测定根系活力的方法及原理。

二、实验原理

氯化三苯基四氮唑是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲腙，生成的三苯甲腙比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化，所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体，植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原，可因加入琥珀酸，延胡索酸，苹果酸得到增强，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。

所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。

三、材料、设备仪器及试剂

材料：

水培或砂培小麦根系。

仪器设备：

1.分光光度计；2.电子天平；3.恒温水浴锅；4.研钵；5.离心机

试剂：

1.乙醇。

2.次硫酸钠，分析纯，粉末。

％TTC溶液。

4.磷酸缓冲液。

5.1mol/L硫酸。

四、实验步骤

TTC标准曲线的制作取％TTC溶液放入10ml量瓶中，加少许Na2S2O4粉摇匀后立即产生红色的甲腙。

再用乙醇定容至刻度，摇匀。

然后分别取此液、、、、置10ml容量瓶中，用乙醇定容至刻度，即得到含甲腙25μg、50μg、100μg、150μg、200μg的标准比色系列，以空白作参比，在485nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线。

称取根尖样品，放入10ml试管中，加入％TTC溶液和磷酸缓冲液的等量混合液10ml，把根充分浸没在溶液内，在37℃下暗保温1h，此后加入1mol/L硫酸2ml，以停止反应。

。

把根取出，吸干水分后与乙醇10ml和少量石英砂一起在研钵内磨碎，以提出甲腙。

3000rpm，15min，上清在分光光度计波长485nm下比色，以空白试验作参比测出吸光度，查标准曲线，即可求出四氮唑还原量。

五、结果计算

四氮唑还原强度＝四氮唑还原量/[根重×时间（h）]

实验五GA、NAA对植物生长的影响

一、实验目的

了解不同的植物激素对植物生长的影响。

二、实验原理

GA和NAA都能促进植物的伸长生长，但二者的作用有所区别，GA能够促进完整植株的伸长生长，而NAA则不能，只能促进离体组织如茎段、胚芽鞘的伸长。

三、器材与试剂：

塑料盆、大烧杯、GA3、NAA四、实验内容

1．将培养介质装入干净的塑料盆内。

2．各取30株高度一致的小麦，分为3组，去掉胚乳，分别浸入蒸馏水、GA3和NAA中，然

3

后移栽到塑料盆内。

3．3－4周观察不同处理小麦植株的伸长状况。

五、实验报告

列表比较各个处理的平均株高。

实验六乙烯对果实的催熟作用

一、实验目的：

了解乙烯对果实的催熟作用；了解乙烯利的作用机理二、原理：

乙烯是植物正常代谢的产物，是植物体内的一种内源激素，能够增加质膜透性，加速呼吸，引起有机物质强烈转化，进而促进果实成熟。

而乙烯利是一种人工合成的植物激素，pH>时，分解释放乙烯，而植物细胞液pH一般在－左右。

三、仪器药品

4000ppm乙烯利　　大烧杯四、方法：

1、取成熟度一致的青香蕉4支，2支放在4000ppm的乙烯利中浸泡1分钟，另2支放入蒸馏水中浸泡1分钟，取出后放在黑塑料袋中，避光保存。

2、5－10天后观察结果，比较果皮颜色和果实成熟度。

五、实验报告

从果皮颜色和果实成熟度对不同处理进行比较。

实验七叶绿体色素提取、分离及理化性质鉴定

一、实验目的：

了解并掌握叶绿体色素的提取、分离的原理和方法；了解叶绿体色素的理化性质；了解叶绿体色素的光学特性在光合作用中的意义二、原理

叶绿体含有叶绿体色素，叶绿体色素主要包括有Chla、Chlb、叶黄素和胡萝卜素，可用有机溶剂乙醇、丙酮等将它们提取出来。

纸层析法是分离叶绿体色素最简单的方法。

它的原理是利用混合色素中各个成分物理、化学性质的差别，分别以不同程度分布于两相中。

于它们以不同的速度移动，从而达到分离的目的。

叶绿体色素容易受光的破坏，变成褐色。

叶绿体色素具有荧光现象。

叶绿素分子的镁可被铜替代，形成铜代叶绿素。

叶绿体色素对不同波长的光具有吸收作用。

三、方法

1、叶绿体色素的提取

取菠菜叶子10g，加石英砂和碳酸钙少许，乙醇约5ml，研磨成匀浆，再加乙醇15ml，用漏斗过滤，即为色素提取液。

、纸层析法分离叶绿体色素

用滴管吸取上面的色素提取液4～5滴。

一滴一滴地滴在滤纸的中央。

待色素点风干后，向该色素点上慢慢滴加四氯化碳，使四种色素在滤纸上分离出来，四种色素在滤纸上的移动速度是胡萝卜素>叶黄素>叶绿素a（蓝绿色）>叶绿素b。

叶绿素的荧光现象

取上述色素乙醇提取液少许于试管中，在反射光和透射光下观察色素提取液的颜色有什么不同。

反射光下观察到的溶液颜色，即为叶绿素产生的荧光现象。

铜在叶绿素分子中的替代作用

取上述色素乙醇提取液少许于试管中，1滴1滴地加入盐酸，直至溶液出现褐绿色，此时叶绿素分子已遭破坏，形成去镁叶绿素。

然后加醋酸铜晶体1小粒，慢慢地在酒精灯上加热溶液，使溶液又产生亮绿色，此即表明铜已在叶绿素分子中替代了原来镁的位置。

黄色素和绿色素的分离

将叶绿体色素的提取液4毫升于大试管中，加入1毫升KOH-甲醇溶液，充分摇匀，然后加5毫升苯，摇匀，观察分层现象。

四、实验报告

1、将纸层析法分离叶绿体色素的实验结果贴在实验报告纸上，并给予分析。

2、解释叶绿体色素的光学性质。

4

实验八叶绿素a和b含量的测定

一、目的

学会Chla、b含量的测定方法，了解叶片中Chla、b的含量。

二、材料用具及仪器药品

菠菜叶片、721分光光度计、天平、研钵、剪刀、容量瓶、漏斗、滤纸、乙醇三、原理

叶绿素a、b在波长方面的最大吸收峰位于665nm和649nm，同时在该波长时叶绿素a、b的比吸收系数K为已知，我们即可以根据LambertBeer定律，列出浓度C与光密度D之间的关系式：

D665=+…………………………….

（1）D649=+Cb…………………………….

（2）

（1）

（2）式中的D665、D649为叶绿素溶液在波长665nm和649nm时的光密度。

Ca、CB为叶绿素a、b的浓度、单位为每升克数。

、为叶绿素a、b在、在波长665nm时的比吸收系数。

、为叶绿素a、b在、在波长649nm时的比吸收系数。

解方程式

（1）

（2），则得：

CA=A665-A649………………………（3）CB=A649-A665………………………（4）G=CA+CB=A665+A649………（5）

此时，G为总叶绿素浓度，CA、CB为叶绿素a、b浓度，单位为每升毫克，利用上面式，即可以计算叶绿素a、b及总叶绿素的总含量。

四、方法步骤

1．称取克新鲜叶片，剪碎，放在研钵中，加入乙醇10ml共研磨成匀浆，再加5ml乙醇，过滤，最后将滤液用乙醇定容到25ml。

2．取一光径为1cm的比色杯，注入上述的叶绿素乙醇溶液，另加乙醇注入另一同样规格的比色杯中，作为对照，在721分光光度计下分别以665nm和649nm波长测出该色素液的光密度。

计算结果：

五、实验报告

计算所测植物材料的叶绿素含量。

实验九离体叶绿体光还原反应

一、实验目的

了解光合作用在叶绿体中进行的光还原作用；熟悉离体叶绿体的提取方法二、仪器及药品

离心机、分光光度计、烧杯、试管、移液管、提取介质50mmol/LTris－HCl缓冲液，/L2.6-二氯酚靛酚溶液三、原理

5

离体叶绿体能使2.6－二氯酚靛酚进行需光还原作用，使染料从蓝色变为无色，这些变化在4－5分钟内呈线性关系。

其反应原理如下：

四、方法步骤

1.离体叶绿体的提取选取生长正常的菠菜叶子洗干净，用吸水纸擦干，去柄及粗脉，称1克叶子。

将叶子剪碎放在研钵中，加入10ml提取介质及少量的石英砂，研磨成匀浆。

把匀浆倒在四层沙布中过滤至离心管中1000rpm速度离心3分钟，弃沉淀，要上清液。

上清液在3000rpm离心5分钟，弃上清液，沉淀即是叶绿体；将沉淀用提取介质使叶绿体悬浮。

2.叶绿体光还原反应的测定取干净试管3支，按下表加入样品及其它试剂。

管号123提取介质/ml　　叶绿体悬液/ml

3.比色。

将上面的各试管液分别倒入比色杯中，立即在分光光度计进行测定，读出A值，然后将比色杯取出放在光下照光，每隔1min，再测定A值。

五、实验报告

作出叶绿体对2.6－二氯酚靛酚的还原作用的曲线图。

A值为纵坐标，时间为横坐标。

实验十苯丙氨酸解氨酶活性的测定

一、实验目的

了解测定苯丙氨酸解氨酶活性的方法。

二、实验原理

苯丙氨酸解氨酶催化苯丙氨酸的脱氨反应，使NH3释放出来形成反式肉桂酸。

此酶的在植物体内次生物质代谢中起重要作用。

根据其产物，反式肉桂酸在290nm处吸光度的变化可以测定该酶的活性。

三、材料、仪器设备及试剂　　材料：

马铃薯块茎

仪器设备：

1.紫外分光光度计；2.离心机；3.恒温水浴锅；4.研钵。

试剂：

1./L硼酸盐缓冲溶液；2./L苯丙氨酸。

四、实验步骤

1.酶粗提液的制备：

称马铃薯2g,置于研钵中，加少许石英砂，少量PVP，20ml硼酸盐缓冲溶液，研磨匀浆，4℃，5000rpm离心15分钟，上清液为酶粗提液。

2.A值测定：

1ml酶液加/L苯丙氨酸，2ml硼酸盐缓冲溶液，总体积为5ml。

对照以1ml硼酸盐缓冲溶液代替酶液；反应液置恒温水浴40℃中保温，后以50μl盐酸终止反应。

用紫外分光光度计在290nm处测定吸光度。

以每小时在290nm处吸光度变化所需酶量为一单位。

五、实验报告：

根据下述公式计算酶活力。

PAL活性＝U/g

煮沸/min—15—染料/ml55—6

实验一多酚氧化酶活性测定

一、实验目的：

掌握测定多酚氧化酶活性的方法；了解多酚氧化酶的特性二、实验原理：

多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化生成醌。

醌有颜色，在525nm下有最大光吸收，通过分光光度法测定反应体系颜色变化可测定酶活性。

三、器材与试剂

低温离心机、s22pc分光光度计、儿茶酚、pH磷酸缓冲液四、实验内容：

1．称取马铃薯克，加入pH磷酸缓冲液，少许PVP，研磨匀浆，转移到离心管，再用pH磷酸缓冲液冲洗研钵，合并提取液。

4℃4000rpm离心15分钟，上清液即为粗酶液。

2．在试管中，加入pH磷酸缓冲液，儿茶酚以及1mL粗酶液，空白调零以1mL磷酸缓冲液代替粗酶液。

3．A值测定：

加入粗酶液后迅速混匀，立刻于525nm下测定反应体系的A值，每隔30秒记录一次，共记录5次。

4．计算酶活力。

按下式计算PPO活性＝U/mingFW

A值增加定义为一个酶活力单位。

五、实验报告：

计算所测材料的PPO活性。

选择A值变化均匀的三组数值求平均值。

实验二植物耐盐生理指标测定

一、实验目的：

1、了解盐胁迫的机理以及植物的耐盐机制2、了解植物盐处理的方法

3、掌握植物体内脯氨酸含量测定的原理和方法4、掌握过氧化物酶活性的测定原理和方法5、掌握丙二醛含量的测定方法6、掌握基本的数据统计方法二、实验原理

植物在盐胁迫下,植物可通过积累一定量的脯氨酸降低水势,维持植物体内的水分平衡,保证植物的正常生长。

脯氨酸本身是一种水溶性最大的氨基酸，它可以防止原生质体的水分散失，在植物细胞生理干旱时，它的增加有助于细胞或组织保持水分。

用磺基水杨酸提取植物样品时，脯氨酸便游离于磺基水杨酸的溶液中，然后用酸性茚三酮加热处理后，溶液即成红色，色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。

在520nm波长下比色，从标准曲线上查出脯氨酸的含量。

植物在盐胁迫下，活性氧含量会明显增加，对植物体产生毒害，而过氧化物酶会清除植物体内多余的活性氧。

过氧化物酶广泛存在于植物的各个组织器官中。

在有过氧化氢存在的条件下，过氧化物酶可以使愈创木酚氧化，产生茶褐色物质，在470nm处有最大吸收峰，可根据单位时间内A470的变化值，计算POD活性大小。

植物在盐胁迫下，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛是其产物之一，通常将其作为脂质过氧化指标，用于表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。

丙二醛是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸反应生成红棕色的三甲川，其最大吸收波长在532nm。

但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，532nm处也有吸收。

植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。

三、实验主要仪器和试剂

仪器:

离心机；分光光度计；恒温水浴锅

试剂：

酸性茚三酮溶液；冰醋酸；标准脯氨酸溶液；3％磺基水杨酸；过氧化物酶测定反应液；磷酸缓冲液10％

TCA；％TBA

四、实验步骤

实验材料的培养

小麦种子吸胀8h后消毒、4℃下春化30天，采用砂培法种植，至三叶期，作为供试材料。

盐胁迫处理1

用200mmol/LNaCl对小麦进行盐胁迫，以未进行盐胁迫为对照，以进行盐胁迫为处理，盐胁迫3d后分别测定脯氨酸含量、过氧化物酶活性和丙二醛含量，对照和处理分别重复3次。

脯氨酸含量测定

1.标准曲线的制作

用100μg/ml脯氨酸配制成、、、、μg/ml的标准溶液。

取标准溶液各2ml,加2ml3%磺基水杨酸，2ml冰醋酸和%茚三酮试剂于具塞试管中，置沸水浴中显色1h，冷却后与波长520nm测定A值，以A值为纵坐标，脯氨酸浓度为横坐标绘制标准曲线。

2.脯氨酸的提取

称取小麦叶片，加3%磺基水杨酸5ml研磨提取，匀浆移至试管中，在沸水浴中提取10min，冷却后，4000rpm离心20min，上清液即为脯氨酸粗提液。

3.反应体系

取上清液2ml，并加入1ml冰醋酸，2ml酸性茚三酮，混匀置于沸水浴中显色。

以2ml磺基水杨酸，1ml冰醋酸，2ml酸性茚三酮为对照。

在可见分光光度计下520nm处测得A值。

4.脯氨酸的含量的计算

从标准曲线查得脯氨酸浓度，计算出样品中脯氨酸的含量，以每克材料鲜重含脯氨酸的微克数表示。

过氧化物酶活性的测定

1.过氧化物酶的提取

称取小麦叶片，加5mlpH的磷酸缓冲液，再加入PVP-30及少量石英砂研磨。

4℃，4000rpm离心15分钟，上清液为酶粗提取液2.反应体系

25μl酶粗提取液加入4ml反应液，在可见分光光度计下470nm处测A值，放入后立即记时，每隔20s记一次数值，连续记录三次，取平均值。

3.酶活力定义

过氧化物酶活性以每克鲜重每分钟在470nm下A值的变化值，设每变化为一个酶活力单位。

过氧化物酶活性=U/min·g丙二醛含量测定

1.丙二醛提取

小麦叶片，加入10﹪三氯乙酸（TCA）5mL（分两次加）和少量石英砂充分研磨，匀浆液以4000r/min离心20min，上清液即为样品提取液。

2.反应体系

取2mL提取液，分别加入2mL﹪TBA液，混匀，在试管上加盖塞，置于沸水浴中沸煮15min，迅速冷却，离心。

取上清液测定532nm和450nm下的A值。

以2mL水代替提取液调零。

含量计算：

根据C＝×A532－×A450，计算出样品提取液中丙二醛的浓度C，然后再计算出每克样品中丙二醛的含量（μmol/g。

五、思考问题

1.为什么设定重复处理？

2.分光光度法要求A值在多大范围内，数据才可靠，如何调整？

六、实验报告

主要内容包括：

1.实验目的及要求2.实验主要仪器和试剂3.实验原理4.实验步骤5.实验结果6.结果分析7.回答问题

实验三植物的元素缺乏症——砂培法

一、实验目的：

熟悉植物营养缺乏症的典型症状，熟悉砂培法。

二、实验原理：

除了水分，植物还需要各种矿质元素来维持正常的生理活动。

缺乏矿