本科生创新实验项目申请书.docx
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本科生创新实验项目申请书
附件：
项目编号：
中医药大学本科生创新实验项目
申请书
项目名称花治疗酒精性脂肪肝大鼠的实验研究
项目负责人（学生）吴向维
所在学院班级中药学院2007级中药学专业
指导教师政木、龙泳伶
单位中药学院
电话
申请日期2009-3-25
中医药大学教务处
二OO七年九月
说明
1.学生参与学生创新实验项目，均须填写《中医药大学本科生创新实验项目申请书》。
2.填写表格前必须认真阅读《中医药大学本科生创新实验项目实施与管理暂行办法》，并根据教务处发布的项目招标公告和项目指南的要求认真填写。
3.指导教师必须保证确有时间和精力在查阅资料、设计课题、实验操作、分析结果与撰写论文等环节对学生给予全程指导，并签署意见。
4.有关实验室要按照实验室开放的原则为学生提供完成创新实验项目的必要条件，并由实验室负责人签署意见。
如果个别项目是以教研室或我校其他实践教学基地为主实施完成的，需要相应部门签署意见，保证提供必要的条件支持。
5.项目申请人须为入学以来平均学分积点在3.0以上的在读二年级及以上本科生，由学生所在学院负责审核。
研究项目
项目名称
花治疗酒精性脂肪肝大鼠的实验研究
学科名称
中药学院
申请金额
2000元
起止时间
2009年3月至
2010年3月
项目负责人
吴向维
学院
中药学院
平均学分积点
3.5
性别
男
年级
2007级
指导老师
政木
职称
教授
性别
男
单位
中药学院
Email
项目小组成员
性别
学院
年级班别
平均学分积点
林顺粦
男
第一临床医学院
2004级中医学七年制
3.5
钟成培
男
中药学院
2007级中药学（营销与物流）
3.4
戚伯成
男
中药学院
2007信息管理学院
3.2
吴文瀚
男
中药学院
2007级中药学（营销与物流）
3.0
胡奕荣
男
中药学院
2007级制药工程
3.5
研究容和
意义简介（400~500字）
随着我国社会经济的快速发展和人民生活水平的提高，酗酒、暴饮者明显增多，与之相关的酒精性脂肪肝（AFLD）患者也逐年增多。
据悉，约75%～95%慢性嗜酒者有不同程度的肝脂肪浸润。
AFLD属酒精性肝病（ALD）的早期表现，症状不明显，很多患者在初次诊断为AFLD时，往往存在不重视或不相信心理，缺乏对AFLD危害的了解，延误早期治疗的时机，导致本来可缓解甚至治愈的疾病不能得到有效控制，进而发展至酒精性肝炎、肝纤维化、肝硬化、甚至肝癌，严重影响了患者的生活质量和寿命，故寻找安全有效的治疗脂肪肝的中药研究越来越引起人们的重视。
因此，现用花对酒精性脂肪肝的大鼠模型进行实验研究，找出对酒精性脂肪肝更有效的防治方法。
立论依据
1.选题依据：
1.1提出问题及其意义：
随着我国社会经济的快速发展和人民生活水平的提高，酗酒、暴饮者明显增多，与之相关的酒精性脂肪肝（AFLD）患者也逐年增多。
据悉，约75%～95%慢性嗜酒者有不同程度的肝脂肪浸润[1]。
AFLD属酒精性肝病（ALD）的早期表现，症状不明显，很多患者在初次诊断为AFLD时，往往存在不重视或不相信心理，缺乏对AFLD危害的了解，延误早期治疗的时机，导致本来可缓解甚至治愈的疾病不能得到有效控制，进而发展至酒精性肝炎、肝纤维化、肝硬化、甚至肝癌，严重影响了患者的生活质量和寿命[2]，故寻找安全有效的治疗脂肪肝的中药研究越来越引起人们的重视。
因此，现用花对酒精性脂肪肝的大鼠模型进行实验研究，找出对酒精性脂肪肝更有效的防治方法。
1.2国外的研究现状述评
1.2.1文献资料来源
笔者通过CKNI-KNS4.0全文期刊数据库和维普数据库,使用“篇名/关键词/摘要”模糊匹配的方法,对1995年以来关于对酒精性脂肪肝大鼠的预防及治疗的文献进行了检索，通过对这些文献的初步整理和分析,可以看出在文献中均以选取AFLD的特异性指标的形式来得出结论的定量研究。
文献的思路是：
所有的研究者都主要通过实验分组，设立病理模型进行对比分析的实验方法来初步得出药物对酒精性脂肪肝的防治作用。
在文献中,研究者的研究对象为通过建模所人为形成的酒精肝大鼠模型;以对照实验的方法，实验大多数采用血清谷丙转氨酶（ALT）和碱性磷酸酶（ALP）活性以及总蛋白（TP）及白蛋白（ALB）的含量作为检测指标，对数据处理应用SPSS12．0统计软件。
1.2.2关于酒精性脂肪肝的研究成果
1.2.2.1酒精性脂肪肝的研究
乙醇水溶性极强，极易为消化道吸收，饮酒后5分钟便可从血液中检出，30—60分钟血中浓度达高峰。
吸收后的乙醇98％通过生物氧化被清除，少量可由呼吸道及尿液排出。
主要在肝脏代，在生理条件下经乙醇脱氢酶（ADH）代为乙醛，进而转化为乙酸，进入体循环。
此外，肝脏中还存在微粒体乙醇氧化酶系（MEOS）等代系统，MEOS的米氏常数（Km=86mmol/L）比ADH（2mmol/L）大数倍，主要在摄取高剂量乙醇时发挥作用[3]。
乙醇在代过程中诱发自由基的产生，对肝脏等多个器官造成损害。
乙醇脂溶性较大，可透过血脑屏障入脑[4]。
酒精性脂肪肝的发生与以下因素有关：
（1）TG合成增多，这是酒精损伤肝脏引致脂肪肝的主要原因；
（2）肝脏分解脂肪的能力下降；（3）肝脏输出TG的能力下降[5]。
1.2.2.2中药花解酒功能的研究
明兰茂（滇南本草>载：
“花解酒醒脾；酒毒酒痢，吐血呕血。
消热，解酒毒。
”据此，说明花（FlosPuerariae）是中国传统医学中最具代表性的解酒药物[6]。
文献通过每日予大鼠白酒灌胃方法复制大鼠酒精性肝损伤模型。
观察中药花对大鼠酒精性肝损伤的预防作用。
110只雄性Wistar大鼠随机分为6组：
空白组、模型组、花醇提物低剂量组、花醇提物中剂量组、花醇提物高剂量组和阳性对照药东宝甘泰片组。
在造模的同时灌胃花醇提物及东宝甘泰片水溶液。
连续灌胃8周，8周末取材观察：
血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）活性。
总蛋白（TP）及白蛋白（ALB）含量；肝组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量、还原型谷胱甘肽（GSH）含量；肝组织病理变化。
结果显示，模型组大鼠出现肝组织脂肪变性和炎性浸润，血清ALT、AST、ALP活性较空白组显著增加。
TP、ALB含量较空白组显著降低；且肝组织中SOD活性显著降低。
MDA含量显著升高。
花醇提物组大鼠的肝组织脂肪变性和炎性浸润均较模型组有所减轻。
血清ALT、AST活性较模型组显著降低，TP、ALB含量较模型组显著升高肝组织SOD活性较模型组显著升高。
MDA含量显著低于模型组。
GSH含量较模型组也明显升高。
研究表明，花醇提物具有明显预防酒精性肝损伤的作用[7]。
1.2.2.3中药花解酒的作用机制
花主要作用为解酒和保肝。
花中的异黄酮可使血中乙醇、乙醛浓度下降，以及降低BUN的升高，从而起到解酒作用；异黄酮及三萜皂苷对CCl4所致小鼠肝损伤，可使AST、ALT显著下降[8]。
花能够在乙醇的肠胃吸收及代两个环节发挥作用。
其水提取物通过激活乙醇脱氢酶活性来降低乙醇的浓度，从而有效地降低血中乙醇浓度，对酒精引起的肝细胞损害有保护作用[9~11]。
花中的有效成分对酒精代障碍及肝功能有改善作用；对酒精引起的脏器障碍及消化道功能障碍也有一定的改善作用[12]。
此外，花异黄酮还能扩脑血管、心血管和外周血管，使血压骤降、心输出量锐减，使脑组织缺血缺氧，异黄酮还能解除平滑肌痉挛[13]。
花解酲汤可降低酒精所致小鼠ALT、HI升高。
减轻肝脏损害，有明确的保肝作用，也是治疗酒精性肝病的有效方药[13]。
2．研究方案：
2.1研究目标：
用花对酒精性脂肪肝大鼠模型进行治疗研究，找出对酒精性脂肪肝更有效的防治方法。
2.2材料与方法
2.2.1动物及饲料
健康雄性Wistar大鼠40只，体重200±20g，二级动物（由学校实验动物中心提供）。
普通饲料喂养，动物室温度（25±2）℃
2.2.2药物及试剂
高度白酒（酿酒总厂生产的红星二锅头酒，56度）；玉米油（华北制药康欣生产）；花（购自杏园春药材）；谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）测定试剂盒（化工生产）。
2.2.3造模方法
将40大鼠正常饲养1周后，随机取10只作为空白组正常饲养，其余30只动物为造模组。
造模8周后随机分为模型组、花水煎液组、花粉末组，每组10只动物。
按照厉有名[14]等的造模方法，给予基础饲料加1％胆固醇、5％猪油、10％玉米油做成的混合饲料，另外结合怡宁[15]等白酒灌胃的方法，按白酒剂量为1mL/100g／次，每日上午9时灌胃。
2.2.4给药方法
除正常喂养外，每日上午按1mL/100g分别灌胃：
空白组以生理盐水灌胃；花水煎液组按0.16g/mL花水煎液灌胃，花粉末组按1.4g/kg粉末喂食。
3h后模型组和花水煎液以及粉末组分别灌相同量的白酒，持续8周。
2.3测试指标
于第8周末，所有大鼠均禁食12h，取全血以2500rpm低温离心15分钟分离血清，血清ALT、AST采用改良赖氏法检测；取出大鼠肝脏观察，并取肝右叶距肝脏边缘0.5cm处组织一小块，放入10％甲醛固定，常规石蜡包埋，切片，HE染色，光镜下观察。
2.4统计学方法
应用SPSS12.0软件进行录入和统计分析，组间比较统计方法为一般性描述性统计，单因素方差分析、相关和回归分析等。
2.5预期结果
至第8周末，模型组大鼠的体重较空白组大鼠体重明显减轻（P<0．01），花水煎液以及粉末组大鼠体重与模型组无显著差异。
至第8周末．模型组大鼠肝指数与空白组相比显著增加（P<0．01）。
花的两组组肝指数与模型组相比均有显著下降（P<0．05）。
模型组肝细胞的变态及炎性浸润程度要比空白组以及花两组大。
2.6技术路线
讨论定题
主要是我们浏览了各类期刊后再针对社会医学的研究的热点和近年来出现频率越来越高的疾病现象确定我们要研究的方向和定下课题主题。
查找撰写
定好题目后我们分工合作查找相关资料，主要通过上校园网检索，或其它搜索还有利用学校图书馆的文献资源，撰写好综述。
实验设计
参考文献的实验，针对实际情况，设计出属于自己的实验方案。
讨论分析
针对实验中出现的与预期目标不符合或相反的情况进行分析，找出其原因所在。
2.7拟解决的重要问题及难点
本课题的难度在于实验过程中取血以及肝脏的处理，因为本人对该实验还没完全熟练，故需要老资格的师兄协助完成。
2.8创新性
2.8.1选题的切入点恰当，采用标准的实验分析方法对数据进行分析汇总
2.8.2文献使用的是花的醇提取物，我们改用花的水煎液以及粉末进行对照性实验，以另一个角度对花的功效与它的剂型是否相关有更深的认识。
2.9研究进度
第一阶段：
在四月初到四月中旬购买研究需要材料。
第二阶段：
在四月中旬到五月中旬进行对大鼠的喂养。
第三阶段：
五月中旬到六月初进行实验。
第四阶段：
六月初将实验得到的数据进行处理及汇总完成论文。
3.可行性分析
此次研究是在别人研究工作的基础上进行的，有前人的大量工作可供借鉴，吸取其中的优点，避免其中的缺点，从而此次研究的有据可寻，有理可依。
本课题组成员理论知识扎实，有很好的独立思考问题能力和团队合作精神，有过多次实验的经验，熟悉有关的步骤。
我校的师资队伍和科研力量都比较强大，有相关经验的师兄师姐也表示会支持我们的课题和提供建议和帮助，这也将很有助于我们的课题的开展。
参考文献
[1][2]秀芬。
酒精性脂肪肝患者的健康指导。
中国误诊学杂志2008年8月第8卷第23期
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23
（1）：
23
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（2）：
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[13]王东坡，谭学林．花解醒汤对酒精性肝病防治作用研究[J]．中医学院学报，2002，24
（2）：
5
[14]厉有名，夏维新．脂肪肝现代诊疗[M]．：
科学技术，2003．65．
[15]怡宁，尚荣军．白酒灌胃法建立大鼠早期酒精性肝病模型[J]．医学杂志，2002，6（32）：
565．
教师与学生承担的工作及责任
1.教师在该研究项目中承担的工作及责任：
指导和监督课题的进行
2.学生在该研究项目中承担的工作及责任：
负责课题实验的进行、数据统计、论文撰写
预期成果类别：
□社科类社会调查报告及学术论文
□自然科学类学术论文
经费预算
序号
经费开支科目
经费预算
金额（元）
1
雄性Wistar大鼠
30.00元*40只
1200.00
2
白酒
28元*15瓶
420.00
3
花
150.00
4
ALT、AST试剂盒
ALT、AST试剂盒各一瓶
84.00
5
显微镜用品
50.00
6
玉米油
30元*2L一瓶
30.00
7
常规石蜡
20.00
8
以上科目预算经费合计1954.00
参与项目的学生承诺：
我保证上述填报容的真实性。
如果获得资助，我与本项目组成员将严格遵守《中医药大学本科生创新实验项目实施与管理暂行办法》的有关规定，切实保证研究工作时间，按计划认真开展研究工作，按时报送有关材料。
签名：
指导教师意见：
本课题选题合理、研究思路清晰，技术路线合理，目标明确，同意对其进行指导。
如获资助，确保项目顺利开展并完成工作目标。
签名：
指导教师所在实验室意见
同意提供可能的帮助，以完成课题。
主任签章：
年月日
学生所在学院意见
单位盖章：
年月日
教务处审批意见
负责人签章：
年月日
升级会员 